检索结果-南通市图书馆

ulbp2基因表达与宫颈癌临床病理特征关系及肿瘤免疫浸润的生物信息学分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

ULBP2基因表达与宫颈癌临床病理特征关系及肿瘤免疫浸润的生物信...

作者：周依婷苏州大学

学位级别：硕士

目的宫颈癌是威胁全球女性健康最常见的恶性肿瘤之一,是全球范围中女性较为多见的肿瘤病症,对女性患者的生命安全产生了严重影响,然而其发病机制尚不明确。生信分析数据库的出现,为肿瘤发生发展机制研究提供了一定的理论基础。因此,本... 详细信息

目的宫颈癌是威胁全球女性健康最常见的恶性肿瘤之一,是全球范围中女性较为多见的肿瘤病症,对女性患者的生命安全产生了严重影响,然而其发病机制尚不明确。生信分析数据库的出现,为肿瘤发生发展机制研究提供了一定的理论基础。因此,本研究的目的是利用生信分析数据库,分析ulbp2(UL16-binding protein 2)的表达与临床病理信息及肿瘤免疫浸润的关系进行探索,从而为宫颈癌提供新的诊断及预后生物标志物,并为基于分子水平的宫颈癌免疫治疗提供新思路。方法通过基因组织表达数据库(GTEx)和癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析人类泛癌(包括宫颈癌)中ulbp2的表达情况。再次通过GEPIA数据库验证ulbp2在正常宫颈组织、宫颈鳞状细胞癌和宫颈腺癌中的差异表达,并分析ulbp2与宫颈癌患者临床分期之间的关系;通过qRT-PCR、Western blot、免疫组化检测ulbp2在宫颈癌中的表达水平;通过单因素和多因素Cox回归分析及Kaplan-Meierplotter曲线分析宫颈癌组织中ulbp2表达与患者总生存率(OS)和疾病特异性生存率(DSS)等预后的关系;基于TISIDB和TIMER数据库和Spearman相关系数分析ulbp2与宫颈癌肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)及免疫检查点标志分子之间的相关性。结果相对于正常组织,ulbp2在大多数肿瘤中表达量均较高。GEPIA数据库分析发现ulbp2在宫颈癌组织中的表达水平显著高于正常组织,且差异具有统计学意义(Pulbp2在不同临床分期的宫颈癌患者中的表达无明显差异(P=0.471)。qRT-PCR、Western blot、免疫组化实验结果表明在宫颈癌组织中,ulbp2的蛋白及mRNA表达水平显著升高。进一步对宫颈鳞状细胞癌和宫颈腺癌中ulbp2的表达情况进行比较,研究发现,ulbp2显著高表达于宫颈鳞状细胞癌中,且差异具有统计学意义(Pulbp2表达水平与宫颈癌患者临床病理特征的相关性,发现ulbp2的表达与M分期(P=0.017)和宫颈癌组织学类型显著相关(Pulbp2的表达水平与M分期(P=0.026)和组织学类型显著相关(Pulbp2高表达的宫颈癌患者总体生存率和疾病特异性生存率更差,且差异具有统计学意义(pulbp2的患者预示更差的总生存期(p=0.002);在宫颈腺癌患者中,ulbp2的表达水平对患者的总体生存率无影响(p=0.733)。单因素和多因素Cox回归分析发现,N 分期(HR=3.395,P=0.002)和 ulbp2 的表达(HR=4.471,P=0.037)与宫颈癌较差的预后相关。因此,ulbp2可能成为一种潜在的子宫颈癌患者预后生物标志物。基于TISIDB数据库和TIMER数据库分析,ulbp2的表达与Tcm细胞、中性粒细胞、Tgd细胞、Th1细胞和Th2细胞的浸润水平呈正相关。相比之下,ulbp2的表达与CD8+T细胞、NK CD56 bright细胞、NK细胞、pDC细胞、Tem细胞、TFH细胞和Th17细胞的浸润水平呈负相关。进一步研究ulbp2的表达水平与免疫浸润之间的关系,发现浸润性免疫细胞水平存在显著差异,Tcm细胞、中性粒细胞、Tgd细胞、Th1细胞和Th2细胞在ulbp2高表组浸润细胞较多,而CD8+T细胞、NKCD56 bright细胞、NK细胞、pDC细胞、Tcm细胞、TFH细胞和Th17细胞在ulbp2高表组浸润细胞较少。结论与正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中ulbp2表达增加,其高表达与患者预后不良及肿瘤免疫浸润有关,且ulbp2表达水平是宫颈癌患者整体生存状态的独立预测因子。这些结果表明ulbp2可能在免疫功能调节方面发挥着重要作用,是宫颈癌患者预后的一个潜在生物标志物。

关键词：宫颈癌 ulbp2 肿瘤免疫浸润临床预后

癫痫患者脑脊液和血清中ulbp2的表达及临床意义

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

癫痫患者脑脊液和血清中ULBP2的表达及临床意义

作者：刘春昆明医科大学

学位级别：硕士

目的：ulbp2是一种新的免疫调节蛋白,人巨细胞病毒(HCMV)感染会使ulbp2的表达上调,ulbp2在癫痫患者脑组织中表达升高,通过活化受体NKG2D与免疫细胞结合从而激活免疫细胞而发挥作用。本研究观察UL16结合蛋白2(ulbp2)在癫痫患者脑脊液和... 详细信息

目的：ulbp2是一种新的免疫调节蛋白,人巨细胞病毒(HCMV)感染会使ulbp2的表达上调,ulbp2在癫痫患者脑组织中表达升高,通过活化受体NKG2D与免疫细胞结合从而激活免疫细胞而发挥作用。本研究观察UL16结合蛋白2(ulbp2)在癫痫患者脑脊液和血清中的表达,探讨其与癫痫发病的关系。方法： 50例癫痫患者脑脊液样本为实验组(18例为难治性癫痫患者,14例为抗癫痫药物治疗有效患者,18例为未经抗癫痫药物治疗患者),无癫痫发作的11例患者的脑脊液为对照。采取脑脊液同时分别采取了33例癫痫患者(13例为难治性癫痫患者,4例为抗癫痫药物治疗有效患者,16例为未经抗癫痫药物治疗患者)和11例非癫痫患者的外周血,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑脊液和外周血中ulbp2的表达,并对其表达差异进行分析。结果：经过酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测,我们发现癫痫组和对照组脑脊液和血清中ulbp2的表达具有差异性。脑脊液中癫痫组ulbp2的表达高于对照组(P=0.000);外周血血清中癫痫组ulbp2的表达高于对照组(P=0.034)。对癫痫患者进一步分组后,我们发现难治性癫痫组脑脊液ulbp2的表达高于未经抗癫痫药物治疗组(P=0.046),难治性癫痫组外周血血清中ulbp2的表达高于未经抗癫痫药物治疗组(P=0.000)。对癫痫患者按是否服用AEDs进行分组比较发现,服用AEDs患者脑脊液中ulbp2的表达高于未服用AEDs患者(P=0.007),服用AEDs患者血清中ulbp2的表达高于未服用AEDs患者(P=0.000)。结论：研究发现癫痫组和非癫痫组脑脊液与血清中ulbp2的表达存在差异;难治性癫痫组和未经抗癫痫药物治疗组脑脊液和血清中ulbp2的表达存在差异;服用AEDs组和未服用AEDs组脑脊液和血清中ulbp2的表达存在差异。ulbp2的表达在脑脊液和血清中的变化成相同趋势。癫痫组脑脊液中ulbp2的表达升高,与之前的研究ulbp2在癫痫患者脑组织中表达升高一致。外周血血清中ulbp2的表达同样高于对照组。高表达的ulbp2与NK细胞通过活化受体NKG2D特异性结合,引起细胞毒性反应、产生和分泌大量细胞因子／化学因子、导致许多自身免疫抗体大量产生或灭活减少,从而参与癫痫发生。这很可能为癫痫的免疫治疗提供新的靶点。

关键词：癫痫 ulbp2 脑脊液血清

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

ulbp2在胰腺癌组织中的表达及临床意义

现代生物医学进展 2012年第30期12卷 5911-5914页

作者：段小辉毛先海吴金术田秉璋欧晔湖南省人民医院肝胆外科湖南长沙410005

目的:探讨ulbp2在胰腺癌组织中的表达及其与胰腺癌发生发展的相关性。方法:应用免疫组化检测ulbp2在胰腺癌中的表达,分析ulbp2与胰腺癌临床病理学特征的相关性。结果:ulbp2在胰腺癌组织中的阳性表达率为87.5%(35/40),正常胰腺组织阳性... 详细信息

目的:探讨ulbp2在胰腺癌组织中的表达及其与胰腺癌发生发展的相关性。方法:应用免疫组化检测ulbp2在胰腺癌中的表达,分析ulbp2与胰腺癌临床病理学特征的相关性。结果:ulbp2在胰腺癌组织中的阳性表达率为87.5%(35/40),正常胰腺组织阳性表达率为18.1%(2/11),癌组织与正常胰腺组差异显著(X2=21.865,Pulbp2在胰腺癌组织中的表达水平与肿瘤远处转移和分化程度密切相关(X2=4.322,6.400 P=0.038,0.041)。结论:ulbp2可能在胰腺癌发生发展中起重要作用,ulbp2有望成为胰腺癌免疫治疗的靶点。

关键词：胰腺癌 ulbp2 免疫组织化学临床病理学

Bim和ulbp2的水平对肾母细胞瘤术后患儿复发及预后的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实用癌症杂志 2021年第2期36卷 236-239页

作者：李艳丽金建光周亚丽常新捷冯珏利闫俊强河南科技大学第一附属医院 471000

目的探讨并分析肾母细胞瘤术后患儿血清中Bim和ulbp2的水平变化,并分析其对患儿术后复发及预后的影响。方法选择行单侧肾母细胞瘤切除术患儿60例,根据不同分期分为2组,分别为中期组(Ⅱ~Ⅲ期,43例)和晚期组(Ⅳ~Ⅴ期,17例),人ELISA试剂盒... 详细信息

目的探讨并分析肾母细胞瘤术后患儿血清中Bim和ulbp2的水平变化,并分析其对患儿术后复发及预后的影响。方法选择行单侧肾母细胞瘤切除术患儿60例,根据不同分期分为2组,分别为中期组(Ⅱ~Ⅲ期,43例)和晚期组(Ⅳ~Ⅴ期,17例),人ELISA试剂盒检测各组患者血清中Bim和ulbp2的含量并进行比较,进一步分析其对患者复发及预后情况的影响。结果与中期组瘤组织相比,晚期组瘤组织中BIM相对表达量均显著降低,ulbp2相对表达量均显著增加(Pulbp2相对表达量均显著增加(P均ulbp2含量均显著下降(P均0.05)。与中期组相比,晚期组术前1 d、术后1 h以及术后1 w,患儿血清中Bim含量均显著上升,ulbp2含量均显著下降(P均ulbp2的含量呈显著正相关(P均ulbp2的水平变化对其复发及预后进行评价,其预后状况与根治性瘤肾切除术后血清中Bim的含量呈显著负相关,与血清中ulbp2的含量呈显著正相关。

关键词： Bim ulbp2 肾母细胞瘤肾母细胞瘤切除术复发

HIF-1α-ADAM10 induces hepatocellular carcinoma escape from NK cells by secreting soluble ulbp2

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

HIF-1α-ADAM10 induces hepatocellular carcinoma escape from ...

miR-34a-5p/ADAM10轴对结直肠癌增殖和转移的影响及其机制研究

第十届全国免疫学学术大会

作者： Mei Huang Weidong Jia Jinliang Ma Geliang Xu Anhui provicial hospital

Activating receptor NKG2D activates NK cells by interaction with its ligands expressed on tumor cells membrane,and tumor cells can escape immune attack from NK cells by secreting soluble NKG2D ligands,including MICA/B and ulbp1.However,there was few report about another NKG2D ligand,ulbp2,especially about soluble ulbp2(s ulbp2)involvement in immune evasion mechanism of hepatocellular carcinoma(HCC).In our clinical study,we found that serum s ulbp2 of HBV related HCC patients was significantly higher than healthy controls and closely related with HCC progression.Human hepatoma cell line MHCC97H cells which have high metastasis potential showed resistance to NK cells cytotoxicity by secreting s ulbp2,while Hep3B cells which showed low metastasis potential expressed membrane ulbp2 only on cell surface.Furthermore,we carried out NK cells transfer therapy to nude mice with HCC xenografts,and found s ulbp2 negative effect on NK cells immune therapy in this model.It was found that s ulbp2 was shedding from cell surface via HIF1α-ADAM10 pathway in MHCC97H cells,as s ulbp2 concentration was reduced in MHCC97H cell supernatant when HIF1αor ADAM10 was knockdown by si RNA.Together,these finding revealed that hepatocellular carcinoma could secrete soluble ulbp2 to inhibit NK cells activation via HIF1α-ADAM10spicing pathway,which may provide a new target for immunotherapy of hepatocellular carcinoma.

关键词： NK cells hepatocellular carcinoma ulbp2 HIF1-α ADAM10

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-34a-5p/ADAM10轴对结直肠癌增殖和转移的影响及其机制研究

作者：王远飚昆明医科大学

学位级别：硕士

【目的】评价miR-34a-5p在结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)组织中的表达水平及其与临床病理特征的相关性。体外实验探讨miR-34a-5p/ADAM10轴对CRC生物学功能的影响及其可能的分子机制,为CRC的诊治提供新的分子标记物和治疗靶点。【方法... 详细信息

【目的】评价miR-34a-5p在结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)组织中的表达水平及其与临床病理特征的相关性。体外实验探讨miR-34a-5p/ADAM10轴对CRC生物学功能的影响及其可能的分子机制,为CRC的诊治提供新的分子标记物和治疗靶点。【方法】1.收集CRC患者癌组织和配对癌旁组织临床样本,RT-q PCR检测miR-34a-5p在组织中的表达情况,分析miR-34a-5p与患者临床病理特征之间的相关性;2.RT-q PCR检测miR-34a-5p在CRC细胞株中的表达情况,构建miR-34a-5p模拟物和抑制剂,转染CRC细胞,采用荧光显微镜拍照和RT-q PCR验证转染效率;3.将miR-34a-5p mimics或inhibitors瞬时转染HCT116和RKO细胞,采用CCK-8和克隆形成、划痕和Transwell实验检测miR-34a-5p对HCT116和RKO细胞的增殖能力、迁移和侵袭能力的影响;4.生物信息学预测miR-34a-5p和ADAM10的结合位点,双荧光素酶实验验证miR-34a-5p与ADAM10直接靶向结合;RT-q PCR和Western blot检测过表达miR-34a-5p后CRC细胞中ADAM10的表达水平,ELISA检测过表达miR-34a-5p后上清液中可溶性ulbp2的含量;5.流式细胞检测NK细胞表面分子表达情况,台盼蓝染色计数观察NK细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测NK细胞杀伤活性。【结果】1.RT-q PCR检测miR-34a-5p在癌组织中表达低于配对的癌旁组织(P0.05),与CA19-9的表达有相关性(P2.与人正常结直肠上皮细胞NCM460相比,miR-34a-5p在CRC细胞株中低表达(P2-MI表面分子CD56CD16的比例为96.65%,CD3CD56的比例为89.47%,随着NK细胞效靶比的增高,NK细胞的杀伤效率也逐渐增高,NK细胞杀伤转染miR-34a-5p mimics组的HCT116和RKO细胞杀伤效率明显高于mimics NC对照组,具有统计学差异(P2.miR-34a-5p可能通过抑制ADAM10的表达,抑制其对ulbp2蛋白的切割,减少ulbp2胞外结构域的脱落,并通过NKG2D-ulbp2的相互作用促进NK细胞杀伤CRC细胞。

关键词：结直肠癌 miR-34a-5p ADAM10 ulbp2 免疫治疗

去甲斑蝥素联合IL-12、IL-15处理增强PBMC对Raja细胞的杀伤效应

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国肿瘤生物治疗杂志 2012年第5期19卷 472-477页

作者：余莉华曾雅丽胡亮杉贺艳杰黄宇贤宋朝阳郭坤元南方医科大学珠江医院儿科广东广州510282 韶关粤北人民医院儿科广东韶关512000 南方医科大学珠江医院血液科广东广州510282

目的:探讨细胞因子IL-2、IL-15激活的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)对去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)处理后的人Burkitt淋巴瘤Raji细胞的杀伤效应及其可能机制。方法:锥虫蓝拒染法检测NCTD对Raji细胞和PBMC细胞增殖的影响;LDH释放法检测IL-2、IL-15激活后的PBMC对K562细胞和Raji细胞的杀伤;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测IL-2、IL-15诱导后PBMC表面NKG2D的表达,以及NCTD作用前后Raji细胞表面NKG2D配体(MICA、MICB、ulbp1、ulbp2、ulbp3)的表达。结果:NCTD抑制Raji细胞的增殖,具有剂量、时间依赖性(P0.05)。在效靶比为10∶1、20∶1时,IL-2、IL-15激活的PBMC对K562细胞的杀伤率较未激活的PBMC明显增高[(52.42±3.89)%vs(15.82±5.12)%,(79.55±9.22)%vs(27.67±3.66)%,P23.63±6.20)%vs(5.04±1.25)%,(41.80±4.09)%vs(8.59±2.19)%;P2、IL-15激活的PBMC对NCTD处理后Raji细胞的杀伤率较NCTD处理前明显提高[(38.97±2.76)%vs(13.19±3.67)%,(63.09±7.30)%vs(19.89±4.15)%;P2D表达率升高[(44.91±5.85)%vs(25.28±7.69)%,P2D的配体ulbp2表达显著升高[(12.69±3.99)%vs(1.03±0.42)%,Pulbp1、ulbp3的表达无明显变化(P>0.05)。结论:NCTD联合细胞因子IL-2、IL-15处理能增强PBMC对Raji细胞的杀伤效应,其机制与NCTD上调Raji细胞表面ulbp2表达和细胞因子上调PBMC表面NKG2D表达有关。

关键词：去甲斑蝥素 IL-2 IL-15 淋巴瘤 Raji细胞 NKG2D NKG2D配体 ulbp2

探索NKG2DL家族基因在结肠腺癌中潜在的临床应用价值

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

探索NKG2DL家族基因在结肠腺癌中潜在的临床应用价值

作者：阮国添广西医科大学

学位级别：硕士

研究内容:本研究分为两个部分:1.基于TCGA和GEO数据库的结肠腺癌中NKG2DL基因的生物信息挖掘和潜在诊断和预后价值的探索;2.结肠腺癌细胞和组织中ulbp2表达水平的验证及诊断和预后价值分析。目的:本研究是旨在挖掘NKG2DL家族基因生物信... 详细信息

研究内容:本研究分为两个部分:1.基于TCGA和GEO数据库的结肠腺癌中NKG2DL基因的生物信息挖掘和潜在诊断和预后价值的探索;2.结肠腺癌细胞和组织中ulbp2表达水平的验证及诊断和预后价值分析。目的:本研究是旨在挖掘NKG2DL家族基因生物信息学资源并探讨结肠腺癌(COAD)患者中NKG2DL家族基因mRNA表达水平的诊断和预后价值。材料和方法:我们从TCGA数据库和UCSC数据平台下载了与COAD相关的NKG2DL基因mRNA表达数据集和相一致的临床参数资料。运用生物信息技术对NKG2DL家族基因进行生物富集功能与途径分析及对NKG2DL家族基因进行相关性分析。然后我们分析和比较NKG2DL家族基因在COAD肿瘤组织和癌旁正常结肠组织中的表达差异,并且对其进行诊断价值的探讨。此外我们分析NKG2DL家族基因在COAD的预后价值,并且从GEO数据库下载与结肠癌(CC)相关的NKG2DL家族基因表达谱和临床数据对NKG2DL家族基因在CC中预后价值进行验证。最后我们对在COAD和CC中有预后价值的NKG2DL家族基因进行综合性预后价值分析。结果:生物富集功能和途径分析结果表明,NKG2DL家族基因可能参与了自然杀伤细胞介导的细胞毒性的过程和途径。皮尔森相关分析结果发现MICA与MICB,ulbp2与ulbp3,ulbp2与RAET1L,ulbp3与RAET1L,RAET1E与RAET1G及RAET1G与RAET1L之间存在一定相关关系,而且分析NKG2DL家族基因在基因-基因和蛋白-蛋白之间的关系时发现MIC家族成员之间及ulbp家族成员之间存在一定的同源及共表达关系。NKG2DL家族基因在COAD中差异表达结果显示ulbp1,ulbp2,ulbp3及RAET1L在COAD肿瘤组织及癌旁正常结肠组织有显著性差异性表达,并且它们在COAD肿瘤组织中的表达显著性高于癌旁正常结肠组织(Pulbp1,ulbp2,ulbp3,RAET1G和RAET1L在COAD上有显著性诊断学价值(所有的AUC>0.7,且Pulbp1[AUC(95%CI)=0.961(0.945‐0.9780)],ulbp2[AUC(95%CI)=0.986(0.977‐0.995)],ulbp3[AUC(95%CI)=0.955(0.932‐0.978)]和RAET1L[AUC(95%CI)=0.944(0.906‐0.983)]有较高的诊断价值(所有AUC>0.9,且Pulbp2基因的表达与COAD RFS[校正P=0.007,HR(95%CI)=2.940(1.349-6.405)]和OS[校正P=0.003,HR(95%CI)=3.199(1.479-6.922)]相关,而ulbp2基因在COAD中的高表达预示着较短的RFS和OS,预后较差,反之则预后较好;我们从GEO数据库下载并分析的结果表明,ulbp2基因与CC RFS[校正P=0.036,HR(95%CI)=1.423(1.024-1.979)]和OS[校正P=0.005,HR(95%CI)=1.563(1.146-2.130)]相关,COAD中ulbp2基因的低表达预示了更长的RFS和OS,预后更好,反之则预后更差。当我们对ulbp2基因对COAD和CC进行综合性预后分析结果发现ulbp2基因的表达量越高,RFS和OS预后风险评分越高,死亡率越大。结论:NKG2DL家族基因中ulbp1,ulbp2,ulbp3和RAET1L的mRNA表达可能是COAD潜在的诊断学生物标志物。单因素和多因素COX生存分析及综合性预后分析结果表明,ulbp2基因对COAD RFS及OS具有预后价值,特别的ulbp2基因可以作为COAD的独立诊断和预后分子生物学标志物。目的:本研究是对于ulbp2在结肠腺癌细胞和组织中的表达水平的进行验证以及诊断和预后价值分析。材料和方法:首先我们在人结肠腺癌细胞系(RKO,HCT116及SW620)和正常结肠细胞系(NCM460)进行RT-qPCR及Western blotting技术检测ulbp2基因的表达水平。其次我们从广西医科大学附属第一医院收集40例COAD患者的肿瘤组织和癌旁正常结肠组织进行RT-qPCR检测,分析ulbp2基因在COAD肿瘤组织及癌旁组织中的表达水平及诊断价值。最后,我们从广西医科大学第一附属医院收集了161例手术切除的癌组织蜡块和34例正常邻近结肠组织蜡块进行免疫组织化学染色和评分,并分析了ulbp2蛋白表达对COAD的诊断和预后价值。结果:首先对人结肠腺癌细胞系(RKO,HCT116及SW620)和正常结肠细胞系(NCM460细胞)进行RT-qPCR及Western blotting技术检测结果显示U

关键词：结肠腺癌 NKG2DL ulbp2 诊断预后生物信息学 RT-qPCR Western blotting 免疫组化

piwil2重编程人成纤维细胞形成肿瘤样干细胞的基因表达研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

piwil2重编程人成纤维细胞形成肿瘤样干细胞的基因表达研究

作者：郭文浩重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:利用基因芯片技术检测piwil2基因重编程人成纤维细胞形成肿瘤样干细胞的差异表达基因,分析主要差异表达信号通路,并研究其中一个差异显著的基因在儿童肾母细胞瘤中表达的意义。方法:采用前期已构建的piwil2-gfp基因、以gfp作为空... 详细信息

目的:利用基因芯片技术检测piwil2基因重编程人成纤维细胞形成肿瘤样干细胞的差异表达基因,分析主要差异表达信号通路,并研究其中一个差异显著的基因在儿童肾母细胞瘤中表达的意义。方法:采用前期已构建的piwil2-gfp基因、以gfp作为空载对照的慢病毒转染人包皮来源的成纤维细胞,获得稳定转染的肿瘤样干细胞,人成纤维细胞作为正常对照,采用基因芯片技术检测其转录差异表达,进行pathway分析,挑选差异表达明显的支链氨基酸代谢信号通路,采用q-PCR进行验证。应用免疫组织化学法检测差异表达基因ulbp2在儿童肾母细胞瘤中的表达,并分析ulbp2蛋白等临床病理特征与肾母细胞瘤患儿预后的相关性。结果:基因芯片结果显示,FB-piwil2组相较于FB,上调基因1 490个,下调基因1 484个,参与支链氨基酸代谢等多条信号通路;FB-piwil2组相较于FB-GFP组,上调基因3 765个,下调基因1 988个,参与支链氨基酸代谢等多条信号通路;FB-GFP组相较于FB组,上调基因2 095个,下调基因4 014个,参与破骨细胞分化等信号通路;q-PCR验证重编程形成的肿瘤样干细胞克隆的支链氨基酸代谢信号通路上调的7个基因(acad8,acadm,aldh3a2,bcat1,hibch,hmgcs1,mccc2)与基因芯片上调表达一致。ulbp2蛋白的表达量、不同的病理类型、不同的临床分期在预后良好组肾母细胞瘤和预后不良组肾母细胞瘤中有显著差异(Pulbp2蛋白高表达诊断儿童肾母细胞瘤患儿预后不良的灵敏度为100%,特异度为78.87%,阳性预测值为85.7%,阴性预测值为100%。结论:piwil2基因重编程人成纤维细胞形成的肿瘤样干细胞基因出现差异表达,与支链氨基酸代谢、NK细胞介导的细胞毒性相关。piwil2基因重编程人成纤维细胞的形成的肿瘤样干细胞的差异基因表达谱可为肾母细胞瘤的基础研究提供线索,并且ulbp2蛋白的高表达诊断肾母细胞瘤患儿预后不良具有较高的临床价值。

关键词： Piwil2 基因芯片肾母细胞瘤 ulbp2