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DNA型EGS抑制HCMV ul97基因的表达及病毒复制

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广东药科大学学报 2018年第3期34卷 365-370页

作者：刘琳伍婧茹张文军广东药科大学基础学院广东广州510006

目的研究DNA型外部引导序列对人巨细胞病毒(HCMV)ul97基因的靶向抑制作用及抗病毒作用。方法借助计算机软件(RNAStructure4.5)模拟HCMV ul97 RNA的结构,选择二级结构相对简单且具备核糖核酸酶P(RNase P)底物一级结构序列特征的位点作为... 详细信息

目的研究DNA型外部引导序列对人巨细胞病毒(HCMV)ul97基因的靶向抑制作用及抗病毒作用。方法借助计算机软件(RNAStructure4.5)模拟HCMV ul97 RNA的结构,选择二级结构相对简单且具备核糖核酸酶P(RNase P)底物一级结构序列特征的位点作为候选切割靶位,针对不同靶位设计并合成的DNA型EGS。将各EGS分别与体外转录的HCMV ul97 RNA及纯化的人RNase P体外混合,初步筛选具备靶向引导切割活性的EGS。进一步将体外有效的EGS转入HCMV感染的人胚肺成纤维细胞(HELF),通过Western与Northern印迹法检测EGS在宿主细胞内对靶基因表达的影响。此外,通过空斑试验测定病毒的生长曲线,测定EGS对病毒复制的影响。结果本文设计并合成了针对HCMV ul97基因6个不同靶位的DNA型EGS(EGS_(168)、EGS_(212)、EGS_(313)、EGS_(663)、EGS_(1580)和EGS_(1664))。体外切割试验证实,EGS_(212)、EGS_(313)、EGS_(663)和EGS_(1580)具有明显的靶向引导切割作用。在HCMV感染的宿主细胞中,EGS_(212)和EGS_(1580)均能够沉默病毒ul97基因的表达,并显著抑制病毒的复制,分别使病毒滴度降低高达约300倍和600倍。结论本研究成功获得两种具有抗HCMV潜力的DNA型EGS,为进一步研发新型抗HCMV核酸类药物奠定了基础。

关键词： DNA型EGS 核糖核酸酶P ul97基因人巨细胞病毒抗病毒

人巨细胞病毒在免疫力低下人群中耐药研究新进展

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检验医学 2009年第9期24卷 635-637页

作者：章莉张玥季育华上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025

随着抗人巨细胞病毒(HCMV)药物的进展,更昔洛韦(ganciclovir,GCV)等抗病毒药物对HCMV感染引起的相关疾病有较好的疗效,其他多种新型抗病毒药物也着手于体内外的各项试验.抗病毒药物治疗HCMV病外,更大用途是预防感染症状的发作.因为人群... 详细信息

随着抗人巨细胞病毒(HCMV)药物的进展,更昔洛韦(ganciclovir,GCV)等抗病毒药物对HCMV感染引起的相关疾病有较好的疗效,其他多种新型抗病毒药物也着手于体内外的各项试验.抗病毒药物治疗HCMV病外,更大用途是预防感染症状的发作.因为人群中HCMV感染是普遍的,且又呈现潜伏感染状态,一旦宿主免疫功能受损失控,潜伏.激活感染的危害是严重的.

关键词：人巨细胞病毒 ul97基因 ul54基因更昔洛韦耐药

人巨细胞病毒对更昔洛韦耐受性的基因型鉴别方法的建立和应用

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检验医学 2009年第9期24卷 642-645页

作者：曹国君章莉华丽张玥方风琴季育华上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025

目的建立实验室检测人巨细胞病毒(HCMV)更昔洛韦(GCV)耐药的基因型分析的常规方法。方法采用巢式聚合酶链反应(PCR)直接扩增33例HCMV感染患者的外周血白细胞及前期实验同步获得的33例临床分离毒株的HCMV ul97基因片段,对扩增产物进行测... 详细信息

目的建立实验室检测人巨细胞病毒(HCMV)更昔洛韦(GCV)耐药的基因型分析的常规方法。方法采用巢式聚合酶链反应(PCR)直接扩增33例HCMV感染患者的外周血白细胞及前期实验同步获得的33例临床分离毒株的HCMV ul97基因片段,对扩增产物进行测序,与HCMV标准毒株AD169序列比对,参照国外报道的耐药相关的热点突变,判定各临床分离毒株的耐药基因型。结果除有1株为HCMV ul97呈M460V突变型外,余32株同标准株AD169的序列一致。同一患者的分离毒株与外周血白细胞中测得HCMV ul97基因序列完全一致。结论建立的实验室检测HCMV耐药的基因型分析完全可以替代传统的耐药表型分析,前者无需分离活病毒,不仅需时短,而且相对安全,其技术要点更适宜临床推广应用。

关键词：人巨细胞病毒 ul97基因更昔洛韦耐药基因型

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人巨细胞病毒耐药性的研究进展

医药导报 2007年第1期26卷 49-51页

作者：罗丹方峰华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科临床病毒实验室武汉430030

抗人巨细胞病毒(HCMV)的治疗药物主要有更昔洛韦(GCV)、膦甲酸钠(FOS)和西多福韦(CDV)。但近年来,其耐药株呈增多趋势,主要的耐药机制为病毒ul97基因和ul54基因发生了突变。根据耐药株出现的时间和高危因素,可采用表型和基因型方法进行... 详细信息

抗人巨细胞病毒(HCMV)的治疗药物主要有更昔洛韦(GCV)、膦甲酸钠(FOS)和西多福韦(CDV)。但近年来,其耐药株呈增多趋势,主要的耐药机制为病毒ul97基因和ul54基因发生了突变。根据耐药株出现的时间和高危因素,可采用表型和基因型方法进行检测,以利于HCMV感染的及时监测并采取相应的处理措施。

关键词：人巨细胞病毒耐药 ul97基因 ul54基因表型检测基因型检测