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基于uhplc-qe-ms及网络药理学探讨固本化湿降脂汤调控肥胖大鼠进食机制

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中药新药与临床药理 2023年第6期34卷 806-817页

作者：易菲李淑豪易玉柳周丽苏丹王万春严张仁邱明亮曾晶晶陈浩江西中医药大学江西南昌330004 南昌大学第二附属医院影像中心江西南昌330006 江西省中医药管理局中药药效(防治精神障碍脑疾病)评价重点研究室江西南昌330006 江西中医药大学附属医院江西南昌330006

目的探讨固本化湿降脂汤(由参苓白术散化裁)对脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠进食机制的影响。方法采用超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱(uhplc-qe-ms)联用技术确定固本化湿降脂汤的入血成分;利用相关数据库查询入血成分的作用靶点;借... 详细信息

目的探讨固本化湿降脂汤(由参苓白术散化裁)对脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠进食机制的影响。方法采用超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱(uhplc-qe-ms)联用技术确定固本化湿降脂汤的入血成分;利用相关数据库查询入血成分的作用靶点;借助metascape数据库进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析及基因本体(GO)功能分析。建立脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠模型;模型复制成功后,连续灌胃给药4周,并观察大鼠体质量、Lee’s指数的变化;采用免疫印迹法检测大鼠下丘脑中阿黑皮素原(POMC)、刺鼠相关蛋白(AgRP)两个蛋白的表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清大鼠瘦素(Leptin,LEP)、大鼠脂肪素(Apelin)、大鼠脂联素(ADP)和大鼠游离脂肪酸(FFA)水平,以及炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)的表达。结果鉴定出31个固本化湿降脂汤的入血成分,获得591个预测靶点,核心靶点是IL6、EGFR、ESR1,涉及AGE-RAGE、HIF-1、乙型肝炎、细胞凋亡等信号通路。体内实验:与模型组比较,固本化湿降脂汤组大鼠下丘脑中POMC抑制食欲蛋白表达升高(P<0.001),AgRP促食欲蛋白表达降低(P<0.05);血清中ADP含量有所升高(P<0.01),LEP、Apelin、FFA含量不同程度降低(P<0.05,P<0.01);炎症因子含量都有所降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论固本化湿降脂汤可通过肠-脑轴来影响脾虚湿阻型单纯性肥胖大鼠进食机制,发挥其治疗作用。

关键词：脾虚湿阻单纯性肥胖肠-脑轴 uhplc-qe-ms 固本化湿降脂汤参苓白术散化裁网络药理学入血成分大鼠

基于uhplc-qe-ms方法分析壮药旱田草化学成分

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壮瑶药研究 2021年第1期 71-78,184-185页

作者：谢凤凤苏健蔡毅许立拔黎理广西中医药大学南宁530200

目的:采用uhplc-qe-ms技术对壮药旱田草进行次生代谢产物分析,结合多元统计分析方法鉴定不同大类成分,并进行差异代谢物KEGG通路富集分析,为旱田草资源开发利用提供实验依据。方法:应用uhplc-qe-ms技术对旱田草成分进行检测,鉴定成分,... 详细信息

目的:采用uhplc-qe-ms技术对壮药旱田草进行次生代谢产物分析,结合多元统计分析方法鉴定不同大类成分,并进行差异代谢物KEGG通路富集分析,为旱田草资源开发利用提供实验依据。方法:应用uhplc-qe-ms技术对旱田草成分进行检测,鉴定成分,再进行差异代谢物KEGG通路富集分析。结果:旱田草共鉴定出15类368种次生代谢产物,其中黄酮类、酚酸类及生物碱类成分共90种化学成分。反式-邻羟基肉桂酸、7-羟基-6-甲基-2H-1-苯并吡喃-2-酮、2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-2,3-dihydrochromen-4-one为相对含量最高的3种黄酮类成分。368种代谢物被注释到KEGG通路中得到34条代谢通路,根据代谢物富集数量及-In P-value值大小,筛选了主要5条通路,分别为氨基酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,苯丙氨酸代谢,淀粉和蔗糖的代谢,类胡萝卜素生物合成。差异代谢物为10个,分别为L-色氨酸、3-羟基邻氨基苯甲酸、3-吲哚乙腈、苯乙胺、L-谷氨酰胺、γ-氨基丁酸、蔗糖、D-麦芽糖、番茄红素、叶黄素。结论:uhplcqe-ms技术稳定可靠,可作为旱田草代谢产物检测手段。实验结果中得到的黄酮类、酚酸类及生物碱类是否为旱田草活性成分,需进一步实验研究。此外,筛选得到的5条代谢通路为挖掘旱田草活性成分积累提供了研究方向。

关键词： uhplc-qe-ms 旱田草化学成分代谢通路

基于GC-TOF-ms和uhplc-qe-ms的苏合香化学成分分析

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中南药学 2024年第1期22卷 36-42页

作者：牟菲张倩蔺瑞赵美娜陶星茹赵瑾怡汤海峰王婧雯空军军医大学第一附属医院药剂科西安710032 空军军医大学药学系西安710032

目的基于GC-TOF-ms和uhplc-qe-ms分析中药苏合香的化学成分。方法挥发性成分分析采用Agilent DB-5ms毛细管色谱柱(30 m×250μm×0.25μm);程序升温,进样口温度280℃;柱流速1.0 mL·min^(-1);进样量1μL;分流比15:1;通过标准谱库检索... 详细信息

目的基于GC-TOF-ms和uhplc-qe-ms分析中药苏合香的化学成分。方法挥发性成分分析采用Agilent DB-5ms毛细管色谱柱(30 m×250μm×0.25μm);程序升温,进样口温度280℃;柱流速1.0 mL·min^(-1);进样量1μL;分流比15:1;通过标准谱库检索并结合文献对主要色谱峰进行鉴定。可溶性成分分析采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1mm×100 mm,1.8μm);流动相为5.0 mmol·L^(-1)乙酸铵-5.0 mmol·L^(-1)乙酸和乙腈;梯度洗脱;NCE模式下碰撞能量;电喷雾离子源正负离子模式下对色谱流出物进行质谱检测,利用对照品、二级质谱信息及文献对各主要色谱峰进行归属。结果苏合香提取物中共鉴定出25个挥发性成分和32个可溶性成分。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于苏合香的成分分析。

关键词：苏合香化学成分 GC-TOF-ms uhplc-qe-ms

基于uhplc-qe-ms探讨高原鼠兔肾脏低氧适应机制的初步研究

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实验动物与比较医学 2024年

作者：何雨昕白振忠薛华郭子旭曹学锋青海大学医学院青海大学高原医学研究中心

目的运用超高效液相色谱四级杆静电场轨道阱质谱（uhplc-qe-ms）非靶向代谢组学分析不同海拔高原鼠兔肾脏低氧适应的代谢变化潜在机制。方法捕捉青海省果洛州玛多星宿海地区海拔4 360 m(MD组)和青海省海北州门源地区海拔2 900 m(MY组)... 详细信息

目的运用超高效液相色谱四级杆静电场轨道阱质谱（uhplc-qe-ms）非靶向代谢组学分析不同海拔高原鼠兔肾脏低氧适应的代谢变化潜在机制。方法捕捉青海省果洛州玛多星宿海地区海拔4 360 m(MD组)和青海省海北州门源地区海拔2 900 m(MY组)高原鼠兔各10只，运用代谢组学主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘方判别分析(OPLS-DA)及单变量统计分析识别差异代谢物；火山图、气泡图和矩形图识别差异代谢物及相关信号通路。结果MD组和MY组PCA、OPLS-DA模式判别结果显示，肾脏代谢物具有明显的聚类型分布。MD组蟾蜍二烯羟酸内酯、腺苷、核糖、腺嘌呤、薯蓣皂苷、盐酸小檗碱、喹啉类生物碱、鼠尾草酚、虾青素表达水平显著增加(VIP>1.5,P1.5,P<0.05)。缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成通路具有最大影响因子；泛酸盐和辅酶A生物合成通路呈现最显著富集。结论不同海拔高原鼠兔肾脏差异代谢物氨基酸、泛酸盐及辅酶A通路可能参与高原鼠兔高原低氧适应代谢机制。

关键词：高原低氧高原鼠兔肾脏 uhplc-qe-ms 代谢通路

基于uhplc-qe-ms方法结合网络药理学分析野山杏的抗菌活性成分

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基于UHPLC-QE-MS方法结合网络药理学分析野山杏的抗菌活性成分

中国毒理学会第九次全国青年科技大会暨第二届生物技术药物毒理与安全评价委员会学术会议

作者：冯慧勇吉利伟阿力米热卫丁一万政良王彦斌王利敏戴小华新疆农业大学新疆草食动物新药研究与创制重点实验室山东鲁抗舍里乐药业有限公司

目的为野山杏总黄酮抗菌活性和机制的开发利用提供实验依据。材料和方法采用uhplc-qe-ms方法对野山杏进行次生代谢产物分析,从而鉴定不同植物源活性成分,进而采用类黄酮广靶代谢组学分析,探讨野山杏总黄酮主要成分;利用SwissADME数据库... 详细信息

目的为野山杏总黄酮抗菌活性和机制的开发利用提供实验依据。材料和方法采用uhplc-qe-ms方法对野山杏进行次生代谢产物分析,从而鉴定不同植物源活性成分,进而采用类黄酮广靶代谢组学分析,探讨野山杏总黄酮主要成分;利用SwissADME数据库和Swiss Target Prediction数据库进行野山杏总黄酮活性成分的筛选;利用Geencards数据库、OMIM数据库、Uniport数据库、进行野山杏总黄酮活性成分抗菌相关靶点的筛选;利用Venn 2.1在线作图工具平台获取野山杏总黄酮的抗菌交集靶点;利用String数据库获取蛋白-蛋白相互作用,并通过Cytoscspe 3.8.0软件绘制PPI网络图;利用David数据库、GO功能分析和KEGG通路分析预测野山杏总黄酮的潜在抗菌机制。结果野山杏含有萜类、黄酮类、生物碱等24种植物源活性成分;野山杏总黄酮含有表儿茶素、二氢槲皮素、木犀草苷等10种主要药物成分,其中槲皮素、山奈酚、香叶木素、柚皮素4种成分类药性较好,可作用于170个成分相关靶点、102个抗菌活性相关靶点,香叶木素和槲皮素与抗菌靶点的Degree值为61和60,预示香叶木素和槲皮素可能是野山杏总黄酮发挥抗菌作用的主要成分;野山杏总黄酮可以通过凋亡过程的正向和负向调控,基因表达的负调控,RNA聚合酶Ⅱ启动子,DNA模板转录的正调控和信号转导等生物进程,通过EGFR、MAPK、PI3K-AKT信号通路联合发挥抗菌作用。结论 uhplc-qe-ms分析和网络药理学分析结果表明,野山杏总黄酮可能通过槲皮素、山奈酚、香叶木素、柚皮素等活性成分作用于AKT1、EGFR、BCL2L1、PTGS2、SRC和VEGFA等关键抗菌靶点,通过EGFR、MAPK和PI3K-AKT等信号通路联合发挥抗菌作用;野山杏总黄酮的抗菌活性潜能可被进一步开发。

关键词： uhplc-qe-ms 网络药理学野山杏总黄酮

来源： cnki会议评论

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北苍术与朝鲜苍术健脾作用及机制研究

中国药理学通报 2024年第1期40卷 181-188页

作者：崔名杨丁奕辉曲扬徐志立才谦辽宁中医药大学药学院辽宁大连116600

目的分析北苍术与朝鲜苍术干预后,脾虚大鼠血浆生物标志物及代谢通路的差异,从非靶向代谢组学的角度讨论两者的健脾机制。方法将SD大鼠采用饮食不节、疲劳过度加苦寒泻下的复合因素法,造成脾虚症模型。测定胃肠道和免疫学指标的水平;... 详细信息

目的分析北苍术与朝鲜苍术干预后,脾虚大鼠血浆生物标志物及代谢通路的差异,从非靶向代谢组学的角度讨论两者的健脾机制。方法将SD大鼠采用饮食不节、疲劳过度加苦寒泻下的复合因素法,造成脾虚症模型。测定胃肠道和免疫学指标的水平;采用超高效液相色谱串联Q Exactive质谱仪(uhplc-qe-ms)技术,联合主成分分析(PCA)与正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)方法,寻找脾虚大鼠血浆中生物标志物;利用Pathway数据库归纳代谢通路。结果经北苍术与朝鲜苍术给药后,脾虚大鼠血浆中各指标均有不同程度回调。代谢组学分析表明,北苍术与朝鲜苍术分别回调了70个和82个血浆差异代谢物,北苍术主要调节“甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢”与“硫胺素代谢”2个代谢通路,朝鲜苍术主要调节“甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢”、“硫胺素代谢”、“嘧啶代谢”、“丁酸代谢”与“核黄素代谢”5个代谢通路。结论北苍术与朝鲜苍术对脾虚大鼠均具有一定的调节作用,其作用机制可能与调节“甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢”、“硫胺素代谢”等代谢通路有关。

关键词：北苍术朝鲜苍术代谢组学健脾作用机制 uhplc-qe-ms

基于网络药理学和动物实验探讨管花肉苁蓉苯乙醇苷对糖尿病肾病的作用

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中成药 2024年第4期46卷 1365-1372页

作者：马冲耿若愚杨建华居博伟文丽梅胡君萍新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第五附属医院新疆乌鲁木齐830011

目的基于网络药理学和动物实验探讨肉苁蓉苯乙醇苷(CPhGs)对糖尿病肾病(DKD)的作用。方法 uhplc-qe-ms法分析CPhGs化学成分,TCmsP、Swiss Target Prediction数据库筛选核心成分,OMIM、GeneCards数据库获取DKD相关靶点,获得共同靶标后使... 详细信息

目的基于网络药理学和动物实验探讨肉苁蓉苯乙醇苷(CPhGs)对糖尿病肾病(DKD)的作用。方法 uhplc-qe-ms法分析CPhGs化学成分,TCmsP、Swiss Target Prediction数据库筛选核心成分,OMIM、GeneCards数据库获取DKD相关靶点,获得共同靶标后使用STRING网站构建蛋白互作网络,DAVID数据库进行GO、KEGG通路分析,Cytoscape软件构建“CPhGs核心成分-靶点-通路”网络。随机选取10只大鼠作为正常组,其余大鼠用高糖高脂饲料喂养及单次腹腔注射STZ建立DKD模型,分为模型组、达格列净(1 mg/kg)组和CPhGs高、中、低剂量(500、250、125 mg/kg)组,每组10只,药物干预6周,观察一般情况,每周称定体质量并检测血糖;末次给药后收集24 h尿液,检测24 h尿蛋白总量(24-UTP);腹主动脉取血并处死,分离血清,检测尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平,HE染色及Masson染色观察肾组织病理变化,ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,Western blot法检测肾组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS3蛋白表达。结果 uhplc-qe-ms技术共检测得到699种成分,经筛选后获得CPhGs核心成分16种,相关靶点323个,CPhGs与DKD共有靶点99个,关键靶点为STAT3、SRC、EGFR等。KEGG通路分析筛选了151条信号通路,显示IL-17信号通路、PI3K/Akt信号通路、TNF信号通路等可能在CPhGs治疗DKD的过程中发挥关键作用。CPhGs能增加DKD大鼠体质量(P<0.01),减少饮水量(P<0.01),调节糖脂代谢,降低24-UTP、BUN水平(P<0.01),改善肾脏组织病理损伤,降低肾组织p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达(P<0.01),提高SOCS3蛋白表达(P<0.01)。结论 CPhGs通过多成分、多靶点、多途径干预DKD,可能通过抑制DKD大鼠肾脏JAK2/STAT3信号通路来发挥作用。

关键词：肉苁蓉苯乙醇苷糖尿病肾病 uhplc-qe-ms 网络药理学动物实验 JAK2/STAT3信号通路

非靶向脂质组学探究花生四烯酸对奶牛乳腺上皮细胞的影响

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中国兽医学报 2023年第10期43卷 2086-2092页

作者：卢挺董伟韬陈艳赵晓萱刘佩雯贺海健张全伟贺钰烜赵兴绪张勇甘肃农业大学动物医学学院甘肃兰州730070 甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室甘肃兰州730070 甘肃农业大学生命科学与技术学院甘肃兰州730070

为探讨外源性花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对奶牛乳腺上皮细胞脂质代谢的影响,本试验采用超高效液相色谱-四级杆静电轨道阱质谱(ultra high performance liquid chromatography Q-exactive orbitrap mass spectrometry,uhplc-qe-ms)的非靶向脂质组学技术,识别和量化AA处理奶牛正常乳腺上皮细胞后改变的内源性脂质代谢产物。通过非靶向脂质组学分析,共检测到1145种脂质代谢物,涉及6个脂质类别,根据正交偏最小二乘判别分析(orthogonal-partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)显示有10种脂质代谢物含量存在显著性差异。其中,AA处理组中AcylGlcADG(14:1/14:1/14:1)、GlcADG(18:2/22:2)、MAG(18:1)、PC(22:5/22:5)、PC(4:0/27:0)、PC(7:0/26:1)、PEtOH(16:0/16:1)、PEtOH(16:1/18:1)和TG(16:0/18:0/20:4)的含量显著降低;SHexCer(d35:2)含量显著升高。综上,AA显著改变了奶牛乳腺上皮细胞的脂质代谢谱,这些差异表达的脂质分子可能成为奶牛乳房炎发展过程中的相关脂类干预靶点。

关键词：花生四烯酸非靶向脂质组学 uhplc-qe-ms 奶牛乳腺上皮细胞

基于代谢组学研究高脂诱导MAFLD模型大鼠血清脂质特征

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医学研究生学报 2022年第5期35卷 455-459页

作者：宋素菲赵冬梅白凤媛孙涛郑继贤徐秋玲刘涛海南医学院第一附属医院中医科海口570102 海南医学院第一附属医院针灸推拿科海口570102 海南医学院中医学院海口571199

目的代谢相关性脂肪肝(MAFLD)以肝细胞脂肪沉积和血脂异常为特征。文章旨在基于代谢组学探讨高脂诱导的MAFLD模型大鼠血清脂质代谢物特点。方法12只SD雄性大鼠随机数字表法分为正常组和模型组,每组6只,分别予普通饲料和高脂饲料喂养4周... 详细信息

目的代谢相关性脂肪肝(MAFLD)以肝细胞脂肪沉积和血脂异常为特征。文章旨在基于代谢组学探讨高脂诱导的MAFLD模型大鼠血清脂质代谢物特点。方法12只SD雄性大鼠随机数字表法分为正常组和模型组,每组6只,分别予普通饲料和高脂饲料喂养4周。油红O染色观察两组大鼠肝脏脂质沉积情况,利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(uhplc-qe-ms)非靶标代谢组学技术,筛选出潜在的差异代谢物并进行脂质富集分析。结果油红O染色结果显示模型组肝细胞内出现大量大小不等的红色脂滴堆积。代谢组学筛选出85个潜在差异代谢物,43个脂质差异代谢物,7种脂类物质,其中脂肪酸类、固醇脂类和甘油磷脂类差异有统计学意义(P<0.05)。结论MAFLD模型大鼠血清脂质代谢物存在显著变化。

关键词：代谢组学 uhplc-qe-ms 代谢相关脂肪性肝病