检索结果-南通市图书馆

稳定表达马属动物SAMHD1蛋白的u937细胞系的建立及其抗病毒活性初步研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2017年第10期39卷 831-835页

作者：郭苗苗尹鑫姚秋成胡哲王晓钧中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/马传染病和慢病毒病研究创新团队黑龙江哈尔滨150069

为研究马属动物SAMHD1的抗病毒活性,本研究构建了稳定表达马SAMHD1(eqSAMHD1)、驴SAMHD1(doSAMHD1)的u937细胞系。利用pLPCX慢病毒表达载体构建重组质粒pLPCX-doSAMHD1-HA和pLPCX-eqSAMHD1-HA。将重组质粒和假病毒包装重组质粒(pCgp和pVSV-G)共转染于293T细胞中,制备表达SAMHD1的假病毒,将其感染人急性单核细胞白血病细胞系u937,利用嘌呤霉素筛选,建立了稳定表达doSAMHD1和eqSAMHD1的u937细胞系。经western blot鉴定,该细胞系能够稳定表达doSAMHD1和eqSAMHD1蛋白。将人类免疫缺陷病毒(HIV)和马传染性贫血病毒(EIAV)的假病毒感染该细胞系,结果显示表达eqSAMHD1和doSAMHD1的细胞系均能够显著抑制HIV假病毒复制,限制倍数分别为17~19倍和14~18倍;两种细胞系也能够抑制EIAV假病毒复制,限制倍数分别为3~4倍和2~3倍。该细胞系的建立为进一步评价和研究马属动物SAMHD1的抗病毒机制奠定了基础。

关键词：马驴 SAMHD1 u937细胞系 HIV-1 EIAV

rGM-CSF对u937细胞系膜MHC分子及CD86分子表达的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 1998年第1期14卷 8-10页

作者：尚红生吕平马树俊尹忆民北京医科大学

本实验研究了人重组ＧＭＣＳＦ对Ｕ９３７人单核细胞样细胞系ＨＬＡ和ＣＤ８６分子表达的调节作用。将Ｕ９３７细胞在ｒＧＭＣＳＦ１０μｇ／Ｌ培养１ｄ，ＨＬＡＤＲ分子的表达率为８３％，对照组为９１％；培养２ｄ，表达率为５... 详细信息

本实验研究了人重组ＧＭＣＳＦ对Ｕ９３７人单核细胞样细胞系ＨＬＡ和ＣＤ８６分子表达的调节作用。将Ｕ９３７细胞在ｒＧＭＣＳＦ１０μｇ／Ｌ培养１ｄ，ＨＬＡＤＲ分子的表达率为８３％，对照组为９１％；培养２ｄ，表达率为５１％，对照组为７８％；培养５ｄ，表达率为５３％，对照组为８１％。Ｕ９３７细胞在ｒＧＭＣＳＦ１０μｇ／Ｌ浓度下培养１ｄ，ＣＤ８６分子表达率为２％，对照组为１．６％；培养３ｄ，表达率为３．９１％，对照组为１％；培养５ｄ，表达率为５３２％，对照组为０．５８％。而ＭＨＣⅠ类分子表达率在１０μｇ／Ｌ浓度下培养５ｄ时，实验组和对照组均为１００％。以上结果显示，ｒＧＭＣＳＦ对Ｕ９３７细胞具有下调ＭＨＣⅡ类分子表达和上调ＣＤ８６分子表达的作用。ＭＨＣⅡ类分子和ＣＤ８６分子是Ｔ细胞重要的活化信号分子，因此可以说明，ｒＧＭＣＳＦ对Ｔ细胞参与的免疫应答具有重要的调节意义。

关键词： rGM-CSF u937细胞系 MHC分子 CD86

和厚朴酚对人白血病细胞系u937细胞增殖和凋亡的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中山大学学报（医学科学版） 2009年第4期30卷 408-412页

作者：薛芳成志勇杨琳李世辉张敬宇姚丽潘峻河北医科大学第二医院血液内科河北省血液病重点实验室河北石家庄050000 保定市第一医院血液科河北保定071000 北京航空工业中心医院肿瘤科北京100012

【目的】探讨和厚朴酚(HNK)对白血病细胞系u937细胞增殖和凋亡的影响。【方法】将u937细胞和正常外周血单核细胞分别与HNK共培养,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡形态,用噻唑蓝比色法(MTT)检测HNK对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检... 详细信息

【目的】探讨和厚朴酚(HNK)对白血病细胞系u937细胞增殖和凋亡的影响。【方法】将u937细胞和正常外周血单核细胞分别与HNK共培养,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡形态,用噻唑蓝比色法(MTT)检测HNK对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测凋亡;罗丹明123检测线粒体膜电位;Caspase3/7活性检测试剂盒检测Caspase3/7活性;荧光定量PCR(FQ-PCR)检测Caspase-3、Caspase-7mRNA水平变化。【结果】HNK对u937的体外增殖有显著抑制作用,48h半数抑制浓度(IC50)为11.8μg/mL,而对正常外周血单核细胞的IC50为40.3μg/mL,AnnexinV/PI双标染色显示,细胞凋亡与和厚朴酚呈浓度和时间依赖相关。HNK明显降低u937细胞线粒体膜电位,增加Caspase3/7活性及mRNA表达水平,但对正常外周血单核细胞的增殖抑制和凋亡作用不明显。【结论】HNK可能通过激活caspase-3/7抑制u937细胞增殖、诱导u937细胞凋亡。

关键词：和厚朴酚 u937细胞系膜电位,线粒体 Caspase3/7

汉防己甲素对人单核细胞样细胞系u937的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织化学与细胞化学杂志 1996年第4期5卷 430-434,510页

作者：舒丹毅唐军民张晓明唐岩北京医科大学组织学与胚胎学系

本文报导中药汉防己甲素（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，Ｔｅｔ）对人单核细胞样细胞系Ｕ９３７的形态、细胞化学特性以及增殖分化的影响。经浓度为５×１０－３ｍｇ／ｍｌ的Ｔｅｔ作用５天后，Ｕ９３７细胞的形态、细胞化学特性接近于单核... 详细信息

本文报导中药汉防己甲素（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，Ｔｅｔ）对人单核细胞样细胞系Ｕ９３７的形态、细胞化学特性以及增殖分化的影响。经浓度为５×１０－３ｍｇ／ｍｌ的Ｔｅｔ作用５天后，Ｕ９３７细胞的形态、细胞化学特性接近于单核／巨噬细胞。３Ｈ－ＴｄＲ掺入证明Ｔｅｔ对Ｕ９３７细胞的ＤＮＡ合成有抑制作用。银染核仁组织者区（Ａｇ－ＮＯＲ）显示细胞核内Ａｇ－ＮＯＲ计数亦明显下降。

关键词：汉防己甲素 u937细胞系 ~3H-TdR掺入细胞化学核仁组织者区相关嗜银蛋白

内毒素对人巨噬细胞系u937生物学性状和生长因子分泌能力的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华烧伤杂志 2004年第2期20卷 92-94页

作者：明佳刘旭盛刘亮徐辉冉新泽程天民第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室重庆400038 第三军医大学军事预防医学院复合伤研究所

目的　探讨不同浓度的内毒素 /脂多糖 (LPS)对人巨噬细胞系u937生物学性状和生长因子分泌能力的影响。　方法　分别以 0 .0、0 .1、1.0、10 .0、5 0 .0、10 0 .0 μg/ml的LPS刺激体外培养的u937,作用 2 4h后运用四氮噻唑蓝 (MTT)法测定... 详细信息

目的　探讨不同浓度的内毒素 /脂多糖 (LPS)对人巨噬细胞系u937生物学性状和生长因子分泌能力的影响。　方法　分别以 0 .0、0 .1、1.0、10 .0、5 0 .0、10 0 .0 μg/ml的LPS刺激体外培养的u937,作用 2 4h后运用四氮噻唑蓝 (MTT)法测定细胞增殖活力 ,应用流式细胞仪测定细胞凋亡率 ,并用酶联免疫吸附测定法检测细胞培养上清中转化生长因子 β1(TGF β1)和血管内皮生长因子(VEGF)浓度的变化。　结果　与LPS为 0 .0 μg/ml时比较 ,当其浓度为 0 .1～ 10 0 .0 μg/ml时可刺激u937细胞凋亡、促进其分泌TGF β1(P u937增殖 (P 0.0 5);高浓度 (5 0 .0、10 0 .0μg/ml)的LPS对u937的增殖无促进作用 (P >0.0 5 ),但能提高VEGF的分泌能力 (P u937并促使其分泌TGF β1,刺激浓度以 0 .1～ 10 .0 μg/ml为宜 ;LPS仅在较高浓度时能促进u937细胞分泌VEGF。

关键词：内毒素巨噬细胞 u937细胞系生物学性状生长因子流式细胞仪细胞凋亡炎症反应

水飞蓟宾对人单核细胞系u937的影响及机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水飞蓟宾对人单核细胞系U937的影响及机制研究

作者：王常丽沈阳药科大学

学位级别：硕士

水飞蓟宾是一类天然黄酮类化合物,广泛应用于慢性肝炎、中毒性肝损伤等疾病治疗,近来水飞蓟宾被报道对多种肿瘤均有抑制作用。本文初步探索了体外水飞蓟宾对人单核细胞系u937细胞的影响及其分子机制。实验结果显示,水飞蓟宾诱导u93... 详细信息

水飞蓟宾是一类天然黄酮类化合物,广泛应用于慢性肝炎、中毒性肝损伤等疾病治疗,近来水飞蓟宾被报道对多种肿瘤均有抑制作用。本文初步探索了体外水飞蓟宾对人单核细胞系u937细胞的影响及其分子机制。实验结果显示,水飞蓟宾诱导u937细胞的死亡呈时间-剂量依赖性,根据形态学和LDH试验分析可知,水飞蓟宾诱导的u937细胞死亡主要是凋亡的方式。对caspase途径研究发现caspase 8的抑制剂——z-IETD-fmk能逆转水飞蓟宾的细胞毒作用。水飞蓟宾能降低u937细胞中caspase 8前体和caspase 3前体量,并发现caspase 3底物ICAD被剪切,我们推测caspase 8和caspase 3相关信号途径可能被活化启动。在对线粒体信号通路的考察中,经检测发现,总体细胞色素c的表达水平并没有因水飞蓟宾的作用而变化,此外值得注意的是,我们发现随着凋亡加剧,通常起存活作用的Bcl-2蛋白水平上调。整合蛋白途径的重要分子焦点粘附激酶（FAK）和Src都是蛋白酪氨酸激酶,利用蛋白酪氨酸激酶抑制剂genistein与水飞蓟宾共同作用,发现其协同了水飞蓟宾的细胞生长抑制效应,同时,水飞蓟宾降低了FAK和其下游分子接头蛋白Grb2,以及ERK-MAPK和p38-MAPK的表达水平,虽然整合蛋白途径下游分子paxillin活性形式增加,但我们推测水飞蓟宾作用时整合蛋白信号总体发挥促存活作用。经自噬的特异性荧光染料MDC染色,流式细胞术检测,发现水飞蓟宾可提高MDC阳性u937细胞数,免疫蛋白印记实验证明自噬相关蛋白Beclin 1的表达增加,说明水飞蓟宾可提高u937自噬水平。进一步研究发现PI3K抑制剂wortmannin对水飞蓟宾诱导的自噬有增强作用,以wortmannin预处理,更为增强了水飞蓟宾对u937细胞的生长抑制作用,推测这与其对两类PI3K同时抑制有关。上述结果证明水飞蓟宾诱导的凋亡和自噬两个过程中PI3K均有参与。

关键词： u937细胞系凋亡自噬整合蛋白信号

甲氨蝶呤对单核细胞样细胞系u937的生长影响及其促凋亡作用

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验血液学杂志 2000年第1期8卷 43-47页

作者：叶辉顾龙君陈宏新陈静叶裕春卞锦国薛惠良上海第二医科大学附属新华医院/上海儿童医学中心上海200127

一般认为急性髓细胞白血病 (AML)是对甲氨蝶呤 (MTX)原发耐药的恶性肿瘤。AML细胞除急性单核细胞白血病 (AML M5)细胞与MTX孵育时 ,由于不能象急性淋巴细胞白血病 (ALL)细胞一样形成足够量的长链聚谷氨酸盐甲氨蝶呤 (MTXPG) ,而被认为对... 详细信息

一般认为急性髓细胞白血病 (AML)是对甲氨蝶呤 (MTX)原发耐药的恶性肿瘤。AML细胞除急性单核细胞白血病 (AML M5)细胞与MTX孵育时 ,由于不能象急性淋巴细胞白血病 (ALL)细胞一样形成足够量的长链聚谷氨酸盐甲氨蝶呤 (MTXPG) ,而被认为对MTX不敏感。为了开发对AML M5新的治疗 ,本实验采用了具有单核细胞特征的u937细胞系进行研究。细胞分别通过不同浓度 (1nmol/L - 10 0 μmol/L)MTX孵育 2 4小时或 4 8小时后 ,通过XTT法评估细胞生长抑制情况。 2 4小时的半数抑制浓度 (IC50 )为 0 .0 4 μmol/L ;4 8小时的IC50 为 0 .0 37μmol/L ,90 %细胞抑制浓度 (IC90 )为 0 .39μmol/L。为了解MTX细胞毒作用的发生机制 ,进一步分析了细胞的死亡过程。采用了系列实验 ,包括台盼蓝拒染法、流式细胞术、显微镜 (瑞氏染色法 )及DNA片段分析进行研究。结果在MTX作用后短时间内 (4或 6小时 )无明显的细胞凋亡特征出现。随 5nmol/L- 10 μmol/LMTX作用 8小时后 ,亚G1(凋亡 )峰的比率从 0 .1μmol/L的 3 2 %增加到 5 0 μmol/L的 18 2 %,S期的比率从 0 0 1μmol/L的 4 1 2 %到 10 μmol/L的 19 1%。可见到DNA片段电泳后细胞凋亡的特征性改变。MTX所引发u937细胞的生长阻滞和凋亡特征 ,提示它可用于AML

关键词：甲氨蝶呤 u937细胞系细胞凋亡白血病

人髓性白血病细胞系u937定向克隆cDNA表达文库的构建及其意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验血液学杂志 2003年第4期11卷 355-358页

作者：陈刚张王刚付杰曹星梅赵万红赵爱志韩月恒李福洋刘新平药立波西安交通大学第二医院血液内科西安710004 西安交通大学第二医院感染科西安710004 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室西安710032

本研究的目的是构建髓性白血病u937细胞系表达型cDNA文库 ,为肿瘤抗原的筛选奠定工作基础。提取u937细胞总RNA ,分离mRNA ,反转录合成双链cDNA ,消平cDNA末端 ,连接EcoRⅠ适配子 ,磷酸化EcoRⅠ适配子 5′端 ;XhoⅠ酶切后 ,丙烯葡聚糖凝... 详细信息

本研究的目的是构建髓性白血病u937细胞系表达型cDNA文库 ,为肿瘤抗原的筛选奠定工作基础。提取u937细胞总RNA ,分离mRNA ,反转录合成双链cDNA ,消平cDNA末端 ,连接EcoRⅠ适配子 ,磷酸化EcoRⅠ适配子 5′端 ;XhoⅠ酶切后 ,丙烯葡聚糖凝胶 S4 0 0柱除去小于 4 0 0bpcDNA片段 ,与λZAP表达载体连接 ,包装蛋白包装后建成cDNA文库 ;取出 1μl倍比稀释感染大肠杆菌XL1 Blue MRF′ ,测定文库大小、重组率 ;随机挑取 10个噬斑 ,在ExAssist辅助性噬菌体的作用下 ,释放出PBK CMV噬菌粒 ;感染大肠杆菌XLOLR ,铺于卡那霉素抗性的LB平板 ;挑取克隆 ,37℃震摇过夜 ;抽提质粒 ,经EcoRI和XhoI酶切后 ,初步确定片段的大小及多样性。结果 :构建成含 2 .87× 10 6重组子的u937细胞cDNA文库 ,重组子平均插入外源片段长约 1.7kb。结论 :所建文库合格 ,适合用于筛选目的cDNA克隆。

关键词： u937细胞系髓性白血病细胞系 cDNA表达文库

稳定表达反义ATM/PI3K细胞系u937-ASPI3K的建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验血液学杂志 2001年第1期9卷 22-25页

作者：周剑锋刘文励汤屹戴琪琳孙岚华中科技大学同济医学院附属同济医院内科武汉430030

为进一步研究DNA损伤杀灭肿瘤细胞的机制 ,为增强肿瘤治疗疗效提供一种有价值的细胞模型 ,构建了高效表达ATM基因编码羧基端 10 0kD功能片段的反义cDNA ,通过转染和筛选建立稳定表达反义ATM PI3KcDNA的细胞系u937 ASPI3K。结果显示 ,构... 详细信息

为进一步研究DNA损伤杀灭肿瘤细胞的机制 ,为增强肿瘤治疗疗效提供一种有价值的细胞模型 ,构建了高效表达ATM基因编码羧基端 10 0kD功能片段的反义cDNA ,通过转染和筛选建立稳定表达反义ATM PI3KcDNA的细胞系u937 ASPI3K。结果显示 ,构建的ATM PI3KcDNA经测序证明反向定位于表达载体 pZeoSV2 (+ )中。经转染和筛选得到稳定表达 pZeoSV(+ ) ATM PI3K的细胞系u937 ASPI3K和对照细胞系u937 pZeoSV (- ) ,前者ATM蛋白表达极度受抑制 ,后者以及淋巴瘤细胞系u937ATM蛋白的高表达未受影响。本实验为阐明细胞周期关卡 (checkpoint)在DNA损伤信号传导通路中的作用机制。

关键词：反义ATM/PI3K u937-ASPI3K细胞系 u937细胞系基因突变共济失调性毛细血管扩张症