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染料木素衍生物对u87-mg细胞凋亡机制的研究

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药物分析杂志 2021年第6期41卷 986-993页

作者：李红侠吴超王文婷徐礼生单玲玲宿州学院生物与食品工程学院宿州234000

目的:研究染料木素衍生物(Ged)对u87-mg细胞的凋亡机制。方法:实验分为对照组,染料木素衍生物组(10、20、40μmol·L^(-1));以MTT法检测细胞体外抗增殖活性,流式细胞仪检测细胞的凋亡状况,荧光定量PCR仪检测细胞内Bax mRNA、Bcl-2 mRNA... 详细信息

目的:研究染料木素衍生物(Ged)对u87-mg细胞的凋亡机制。方法:实验分为对照组,染料木素衍生物组(10、20、40μmol·L^(-1));以MTT法检测细胞体外抗增殖活性,流式细胞仪检测细胞的凋亡状况,荧光定量PCR仪检测细胞内Bax mRNA、Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA水平,激光共聚焦检测线粒体膜电位变化和活性氧含量,酶标仪检测Caspase-3酶的活性。结果:随染料木素衍生物浓度的增加,对u87-mg细胞的抑制性增强,细胞的凋亡量成浓度依赖性,IC50为20.23μmol·L^(-1);荧光定量PCR结果显示,Bax mRNA、Bcl-2 mRNA、Cyt c、Caspase-3 mRNA的基因表达水平显著增加(P细胞的凋亡,活性氧的生成也与药物浓度呈依赖性;Caspase-3酶的活性在药物浓度为40μmol·L^(-1)时,达到极显著水平(Pu87-mg细胞的增殖,增强活性氧的簇产生、线粒体膜电位下降,随细胞凋亡量的增加,Caspase-3酶的活性增强,染料木素衍生物具有较强的抗癌活性。

关键词：染料木素衍生物细胞凋亡 u87-mg细胞机制

人u87-mg脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立

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中国药理学通报 2018年第5期34卷 735-739页

作者：王艳华楚建杰李子敏胡娜平李会会郑建民张彩勤师长宏杨志福奚苗苗文爱东翁琰西京医院药剂科陕西西安710032 西京医院放射科陕西西安710032 空军军医大学实验动物中心陕西西安710032

目的应用不同数量u87-mg细胞接种裸鼠脑内,建立裸鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法采用立体定向技术,分别将3.0×10^(10)·L^(-1)、4.0×10^(10)·L^(-1)、5.0×10^(10)·L^(-1)浓度的人脑胶质瘤细胞u87-mg单细胞悬液,接种于18只♂... 详细信息

目的应用不同数量u87-mg细胞接种裸鼠脑内,建立裸鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法采用立体定向技术,分别将3.0×10^(10)·L^(-1)、4.0×10^(10)·L^(-1)、5.0×10^(10)·L^(-1)浓度的人脑胶质瘤细胞u87-mg单细胞悬液,接种于18只♂裸鼠的右侧尾状核区,每只接种体积为5μL,另取6只裸鼠作为对照,接种同体积Hanks液。观察不同接种量实验鼠的生存状态、成瘤情况及脏器转移灶、带瘤生存期,测量肿瘤的最大径,计算肿瘤体积,将获取的全脑标本制作病理切片,行HE染色和免疫组化检查。结果各接种量的实验组成瘤率均为100%,未见颅外转移病灶,3组裸鼠的平均生存时间分别为(46.50±3.27)d、(38.50±3.28)d、(30.67±3.51)d;病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型;免疫组化GFAP和S-100蛋白呈阳性表达。结论立体定向脑内定量注射u87-mg细胞制备的人脑胶质瘤裸鼠原位移植模型成瘤率高、颅内生长稳定、颅外远隔部位转移率低,与人脑胶质瘤病理学及形态学特征相似,能为研究胶质瘤的发生、发病机制、生物学特性以及探寻有效的治疗措施提供可靠的动物模型。

关键词：脑胶质瘤原位移植裸鼠动物模型 u87-mg细胞 HE染色免疫组化

miR-370-3p对胶质母细胞瘤u87-mg细胞株增殖能力的影响

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中国临床神经外科杂志 2016年第4期21卷 223-226页

作者：彭泽生田道锋张申起陈谦学武汉大学人民医院神经外科武汉430060

目的探讨微小RNA-370-3p(miR-370-3p)对人脑胶质瘤细胞系u87-mg增殖能力的影响及其机制。方法将常规培养的u87-mg细胞分为空白组、无义序列转染组和模拟物转染组,后两组分别转染miRNA无义序列及miR-370-3p模拟物,qRT-PCR法检测其转染效... 详细信息

目的探讨微小RNA-370-3p(miR-370-3p)对人脑胶质瘤细胞系u87-mg增殖能力的影响及其机制。方法将常规培养的u87-mg细胞分为空白组、无义序列转染组和模拟物转染组,后两组分别转染miRNA无义序列及miR-370-3p模拟物,qRT-PCR法检测其转染效率,免疫印迹法检测转染细胞叉头框蛋白M1(FoxM1)的表达;采用Ed u法评估细胞的增殖能力,采用平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力。结果与空白组和无义序列转染组比较,模拟物转染组细胞miR-370-3p表达显著增加(Pu87-mg细胞增殖能力及克隆形成率均明显减少(Pu87-mg细胞的增殖能力,可能与减少FoxM1的表达有关。

关键词：胶质瘤 u87-mg细胞微小RNA mi R-370-3p 叉头框蛋白M1 细胞增殖

人u87-mg脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立

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中国药理学与毒理学杂志 2016年第10期30卷 1065-1065页

作者：王艳华楚建杰杨志福奚苗苗文爱东翁琰第四军医大学西京医院陕西西安710032

目的建立成瘤率高、可靠稳定的人u87-mg脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型,为研究人脑胶质瘤的发病机制和治疗方法提供操作平台。方法采用立体定向技术,分别将2.5×105个/5μL体外培养的人脑胶质瘤细胞u87-mg单细胞悬液,接种于15只雄性裸鼠... 详细信息

目的建立成瘤率高、可靠稳定的人u87-mg脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型,为研究人脑胶质瘤的发病机制和治疗方法提供操作平台。方法采用立体定向技术,分别将2.5×105个/5μL体外培养的人脑胶质瘤细胞u87-mg单细胞悬液,接种于15只雄性裸鼠的右侧尾壳核区,另取6只裸鼠作为对照,接种同体积Hanks液。分别于接种后7,14,21,28 d行活体动物体内荧光成像和核磁共振扫描动态观察肿瘤大小,之后采用心脏灌注技术固定裸鼠脑组织,将获取的全脑标本制作病理切片,行HE染色和免疫组化检查。结果接种u87-mg的裸鼠均于造模后14 d开始脑内出现肿瘤,成瘤率100%,直至28 d肿瘤持续增长,35 d内该造模裸鼠全部死亡,平均生存时间(30.67±2.03)d;病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型;接种后14 d左右是利用该模型进行实验的最佳时机。结论立体定向脑内定量注射u87-mg细胞制作的人脑胶质瘤裸鼠原位移植模型,简便易行、经济实用、成瘤率高、重复性好、颅外远隔部位转移率低、与人脑胶质瘤病理学及形态学特征相似,能为研究胶质瘤的发生、发病机制、生物学特性以及探寻有效的治疗措施提供可靠的动物模型。

关键词：脑胶质瘤原位移植裸鼠动物模型 u87-mg细胞

TRPV2基因敲除对胶质瘤u87mg细胞增殖能力的影响

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神经损伤与功能重建 2012年第2期7卷 84-87页

作者：胡争芮路何丹华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科武汉430000 阜外心血管病医院心外科北京100037 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经内科武汉430000

目的:探讨瞬时感受器电位离子通道蛋白V亚族2(TRPV2)基因敲除对胶质瘤u87mg细胞增殖及细胞周期进展的影响。方法:通过锌指核酶敲除u87mg细胞的TRPV2基因;Western Blot测定TRPV2蛋白的表达;Brdu掺入实验及Western Blot测定TRPV2基因敲除... 详细信息

目的:探讨瞬时感受器电位离子通道蛋白V亚族2(TRPV2)基因敲除对胶质瘤u87mg细胞增殖及细胞周期进展的影响。方法:通过锌指核酶敲除u87mg细胞的TRPV2基因;Western Blot测定TRPV2蛋白的表达;Brdu掺入实验及Western Blot测定TRPV2基因敲除对u87mg细胞增殖的影响;流式细胞技术测定TRPV2基因敲除对u87mg细胞细胞周期进展的影响。结果:TRPV2蛋白在u87mg细胞中转录表达;靶向TRPV2的锌指核酶能有效地阻断u87mg细胞内TRPV2基因在蛋白水平上的表达。TRV2-/-u87mg细胞Brdu阳性率为(47.37±4.03)%,处于S期细胞的百分率为(20.14±0.47)%,均显著高于TRV2+/+u87mg细胞(Pu87mg TRV2+/+细胞的(1.47±0.19)倍(Pu87mg细胞的增殖和细胞周期的进展。

关键词：瞬时感受器电位离子通道蛋白V亚族2 锌指核酶 u87-mg细胞细胞增殖细胞周期