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Hoechst33342/PI双染法和Tunel染色技术检测神经细胞凋亡的对比研究

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癌变．畸变．突变 2014年第3期26卷 180-184页

作者：杨细飞贺春娥汤瑞华田生礼刘建军田生礼深圳市疾病预防控制中心深圳市现代毒理学重点实验室广东深圳518055 深圳大学生命科学学院生物化学与分子生物学教研室广东深圳518060 深圳大学生命科学学院生物化学与分子生物学教研室广东深圳518060

目的：利用Hoechst33342/PI双染法和原位末端标记法（Tunel染色检测纳米二氧化硅（nm-SiO2）对神经细胞凋亡的影响，比较两种检测方法的优缺点。方法：以体外培养的人神经母细胞瘤SK-N-SH为研究对象，15和30 nm粒径的nm-SiO2（剂量为2.5... 详细信息

目的：利用Hoechst33342/PI双染法和原位末端标记法（Tunel染色检测纳米二氧化硅（nm-SiO2）对神经细胞凋亡的影响，比较两种检测方法的优缺点。方法：以体外培养的人神经母细胞瘤SK-N-SH为研究对象，15和30 nm粒径的nm-SiO2（剂量为2.5、5、10μg/mL）分别处理细胞24 h，另设1-5 m SiO2组和溶剂对照组，采用Hoechst33342/PI双染法和Tunel染色检测各处理组对SK-N-SH细胞凋亡的影响。结果：与对照组相比，两种检测方法分析均显示了nm-SiO2处理组SK-N-SH细胞凋亡率显著增加（P〈0.05），且具有尺寸、剂量依赖性，而微米级SiO2对凋亡的影响不显著（P〉0.05）。结论：nm-SiO2能诱导SK-N-SH细胞凋亡。Hoechst33342/PI双染法特异性高，简单易行；Tunel法灵敏度高，能检测少量的细胞凋亡，但成本较高，两种方法可结合使用以便更加准确的检测神经细胞的凋亡。

关键词：纳米二氧化硅神经细胞凋亡 Hoechst33342 PI双染 Tunel

不同制动时相兔骨骼肌萎缩与细胞凋亡的实验研究—原位缺口末端标记法(Tunel)的观察检测

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生物医学工程学杂志 2004年第4期21卷 628-630,635页

作者：金旭红瞿宁厚何勇郭英王纯刘昌乙李程韦钊岚陈洁英海南省海口市人民医院骨科海南570203 成都体育学院运动医学系成都610041

探讨制动后骨骼肌萎缩的发生机制与骨骼肌细胞凋亡的关系。按照 Sievanen法制备不同时相的制动实验组 ,2 4只实验兔随机分为 4组 ,每组 6只 ,实验侧用管形石膏固定 ,自身未固定侧做对照组。在制动后 3、7、14和 2 8d取材 ,应用末端转移... 详细信息

探讨制动后骨骼肌萎缩的发生机制与骨骼肌细胞凋亡的关系。按照 Sievanen法制备不同时相的制动实验组 ,2 4只实验兔随机分为 4组 ,每组 6只 ,实验侧用管形石膏固定 ,自身未固定侧做对照组。在制动后 3、7、14和 2 8d取材 ,应用末端转移酶介导的 U TP缺口末端标记法 (Td T— mediated d UTP nick end labeling,Tunel )检测萎缩骨骼肌中有无凋亡的骨骼肌细胞 ,并与形态学的观察结果相对照。对各组的数据进行统计学处理。结果表明不同制动时相所致的萎缩骨骼肌中均可发现有程度不一的骨骼肌细胞发生凋亡 ,以 14 d组最为显著。不同时相凋亡的肌细胞在空间的分布上呈不一致性。制动所致萎缩的骨骼肌中有时可见呈假阳性 TU NEL染色 ,但与凋亡的肌细胞的表现是不同的。我们认为 (1)制动后骨骼肌萎缩有骨骼肌细胞凋亡的参与。 (2 )骨骼肌细胞凋亡的多少与制动时相密切相关 ,以制动后 14 d最为明显。 (3)凋亡的骨骼肌细胞在空间分布上随制动时相不同而不同 ,呈不一致性。 (4 )制动后骨骼肌萎缩的程度与肌细胞凋亡的程度密切相关。

关键词：制动兔骨骼肌萎缩细胞凋亡实验原位缺口末端标记法 Tunel 检测骨骼肌细胞

Tunel法检测类猪圆环病毒2型因子P1诱导猪免疫器官细胞凋亡的研究

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华北农学报 2008年第B10期23卷 88-91页

作者：温立斌何孔旺杨汉春王玉然董美响江苏省农业科学院兽医研究所江苏南京210014 中国农业大学动物医学院北京100094 河北省动物卫生监督所河北石家庄050081 河北省饲料工业协会河北石家庄050011

研究类猪圆环病毒2型因子P1体内诱导的细胞凋亡作用。将P1分子克隆接种普通仔猪,用原位末端标记技术(Tunel)检测猪的扁桃体、脾脏、腹股沟淋巴结等免疫器官细胞的凋亡情况。猪感染P1后21和35 d的扁桃体、脾脏和腹股沟淋巴结等免疫器官... 详细信息

研究类猪圆环病毒2型因子P1体内诱导的细胞凋亡作用。将P1分子克隆接种普通仔猪,用原位末端标记技术(Tunel)检测猪的扁桃体、脾脏、腹股沟淋巴结等免疫器官细胞的凋亡情况。猪感染P1后21和35 d的扁桃体、脾脏和腹股沟淋巴结等免疫器官细胞出现了凋亡。P1可能引起猪的免疫抑制。

关键词：猪圆环病毒2型 P1 凋亡 Tunel

Tunel与碘化丙啶双染检测耳蜗毛细胞的损伤

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中华耳科学杂志 2006年第2期4卷 129-131页

作者：林春招江远仕周序玲翟所强郭维深圳市第四人民医院耳鼻咽喉-头颈外科深圳518033 解放军总医院耳鼻咽喉科研究所北京100853

目的应用Tunel与PI(碘化丙啶)双染法检测耳蜗毛细胞损伤。方法听力正常豚鼠经庆大霉素致聋后,做耳蜗基底膜铺片,用Tunel与PI双染检测耳蜗毛细胞损伤的情况。结果在核固缩、核碎裂及部分核肿胀的细胞中Tunel染色为阳性,细胞核正常及部分... 详细信息

目的应用Tunel与PI(碘化丙啶)双染法检测耳蜗毛细胞损伤。方法听力正常豚鼠经庆大霉素致聋后,做耳蜗基底膜铺片,用Tunel与PI双染检测耳蜗毛细胞损伤的情况。结果在核固缩、核碎裂及部分核肿胀的细胞中Tunel染色为阳性,细胞核正常及部分核肿胀的细胞中Tunel染色为阴性。所有有核细胞均能被PI染色。结论通过Tunel与PI双染可以确定Tunel染色为阳性的细胞为凋亡的细胞,而核肿胀的细胞中Tunel染色为阴性者可能为胀亡细胞。

关键词：凋亡胀亡耳蜗 Tunel 碘化丙啶

Tunel法和Annexin V-FITC流式细胞分析法检测成纤维细胞凋亡的对比研究

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口腔医学 2014年第S1期34卷 12-15页

作者：佟俊杰苗清王志国徐全臣青岛大学附属医院口腔科山东青岛266071 威海市口腔医院儿童牙病科山东威海264200 青岛大学附属医院整形美容科山东青岛266071

目的通过Annexin V-Fitc流式细胞分析法和Tunel法检测凋亡,比较两种方法的优缺点。方法以成纤维细胞为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统,分别给予周期性张应力(频率为10个循环/min,每一循环包括3 s收... 详细信息

目的通过Annexin V-Fitc流式细胞分析法和Tunel法检测凋亡,比较两种方法的优缺点。方法以成纤维细胞为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统,分别给予周期性张应力(频率为10个循环/min,每一循环包括3 s收缩/3 s舒张,力值定为12%)刺激6、12、24 h,并设立正常对照组。采用Tunel染色法和Annexin VFitc流式细胞法检测成纤维细胞凋亡。结果 Tunel染色结果显示,实验组较对照组的细胞核固缩,边界清楚,胞质淡染,染色质呈特异的棕黄色着染,而正常细胞的胞核不着染。流式细胞仪实验结果显示,实验组的G0/G1期的细胞比例明显增多,相对应的S期细胞比例明显减少,而在G2/M期较对照组却出现了明显的变化,6、12h组DNA含量分别为352.0±1.0、301.1±1.1,较未加力组255.2±1.7有显著延长,而24 h加力组DNA含量303.4±10.6与6 h组比较细胞周期却出现了缩短。结论Annexin V-Fitc流式细胞分析法特异性高,Tunel法灵敏度高,两种方法相结合检测细胞凋亡更准确。

关键词：成纤维细胞凋亡流式细胞术 Tunel

Tunel法检测类猪圆环病毒2型因子P1诱导猪免疫器官细胞凋亡的研究

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TUNEL法检测类猪圆环病毒2型因子P1诱导猪免疫器官细胞凋亡的研究

第四届中国畜牧科技论坛

作者：温立斌何孔旺杨汉春江苏省农业科学院兽医研究所中国农业大学动物医学院

目的:研究类猪圆环病毒2型因子P1体内诱导的细胞凋亡作用。方法:将P1分子克隆接种普通仔猪,用原位末端标记技术(Tunel)检测猪的扁桃体、脾脏、腹股沟淋巴结等免疫器官细胞的凋亡情况。结果:猪感染P1后21天和35天的扁桃体、脾脏和腹股沟... 详细信息

目的:研究类猪圆环病毒2型因子P1体内诱导的细胞凋亡作用。方法:将P1分子克隆接种普通仔猪,用原位末端标记技术(Tunel)检测猪的扁桃体、脾脏、腹股沟淋巴结等免疫器官细胞的凋亡情况。结果:猪感染P1后21天和35天的扁桃体、脾脏和腹股沟淋巴结等免疫器官细胞出现了凋亡。结论:P1可能引起猪的免疫抑制。

关键词：猪圆环病毒2型 P1 凋亡 Tunel

来源： cnki会议评论

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对凋亡细胞Tunel染色操作中的体会

实验动物科学 2014年第4期31卷 46-48页

作者：张翠香刘建勋董小霞洪晓华王杨慧侯金才付建华张伟中国中医科学院西苑医院基础医学研究所北京中药药理北京市重点实验室北京100091

凋亡细胞的Tunel染色已在科学研究中广泛应用。由于Tunel染色的步骤多,操作精细,影响DNA断裂的因素多,实验结果往往不够准确致使实验失败。总结多年实践经验,拟从组织的取材方式、取材大小、固定剂选择、组织离体后缺血时间、组织在固... 详细信息

凋亡细胞的Tunel染色已在科学研究中广泛应用。由于Tunel染色的步骤多,操作精细,影响DNA断裂的因素多,实验结果往往不够准确致使实验失败。总结多年实践经验,拟从组织的取材方式、取材大小、固定剂选择、组织离体后缺血时间、组织在固定剂内的固定时间以及实验操作中的诸多细节等方面进行介绍。

关键词：凋亡 Tunel 染色

大鼠脑出血后脑组织线粒体ATPase-6基因表达及Tunel阳性细胞变化研究(英文)

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中国临床康复 2004年第28期8卷 6218-6219页

作者：李玮王景周周中和张立云解放军第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所神经内科重庆市400042 万庄华北油田第一综合服务处医院内科河北省廊坊市065007

背景:凋亡参与了脑出血后的神经损伤机制,凋亡是一个需要能量的过程。但目前尚缺乏足够的直接证据证实脑出血后能量供应变化与凋亡发生的相关性。目的:研究脑出血后脑组织线粒体ATPase-6基因表达变化与细胞凋亡的相关性。设计:完全随机... 详细信息

背景:凋亡参与了脑出血后的神经损伤机制,凋亡是一个需要能量的过程。但目前尚缺乏足够的直接证据证实脑出血后能量供应变化与凋亡发生的相关性。目的:研究脑出血后脑组织线粒体ATPase-6基因表达变化与细胞凋亡的相关性。设计:完全随机对照实验。地点和对象:实验在解放军第三军医大学野战外科研究所神经内科实验室完成,对象为Wister大鼠40只干预:以50μL鼠尾血注入大鼠尾状核制作大鼠脑出血模型,注血后分别于12h,1,3,7d处死大鼠,断头取血肿周围脑组织;对照组仅进针不注血。用RT-PCR方法测定以上不同时相点大鼠脑出血后血肿周围水肿组织线粒体ATPase-6基因表达情况。TdT介导的dUTP缺口末端标记法检测Tunel阳性细胞的表达。主要观察指标:各组大鼠线粒体ATPase-6基因表达,Tunel阳性细胞表达。结果:出血后12h,1,3d线粒体ATPase-6基因表达较对照组下降,但差异不显著(P>0.05)。至第7天时表达明显下降(PTunel阳性细胞在出血后12h开始表达犤(24.33±2.50)个犦,3d达到高峰犤(214.17±21.45)个,7d时仍持续较高水平(124.88±18.94)个犦。结论:脑出血早期血肿周围水肿组织线粒体ATPase-6基因表达无明显减少,晚期表达明显下降,在出血早期存在凋亡发生的能量基础。

关键词：脑出血大鼠基因表达线粒体 Tunel 阳性细胞 ATP 高水平能量供应研究所

H5亚型AIV诱导组织细胞凋亡的Tunel检测

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中国兽医杂志 2006年第8期42卷 17-19页

作者：曹伟胜罗开健张桂红任涛辛朝安廖明华南农业大学兽医学院

细胞凋亡(apoptosis)是指细胞在一定的生理或病理条件下,按照其自身的程序,自已逐渐结束其生命的历程,通常最后细胞脱落离体,或者裂解为若干个凋亡小体而被其他细胞吞噬。随着对细胞凋亡研究和认识的不断深入。检测细胞凋亡的方法也不... 详细信息

细胞凋亡(apoptosis)是指细胞在一定的生理或病理条件下,按照其自身的程序,自已逐渐结束其生命的历程,通常最后细胞脱落离体,或者裂解为若干个凋亡小体而被其他细胞吞噬。随着对细胞凋亡研究和认识的不断深入。检测细胞凋亡的方法也不断更新和多样化。Gavrieli Y等(1992)首先建立的TUNEI。方法,该方法特别适合于组织切片的细胞凋亡原位检测。[第一段]

关键词：细胞凋亡原位检测 Tunel 诱导组织 H5亚型 AIV 凋亡小体组织切片