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基于Notch信号通路探讨柚皮素调节Th17/Treg平衡治疗哮喘的机制研究

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中国免疫学杂志 2023年第7期39卷 1383-1389页

作者：陈雪石亚琳孙合圣李海艳宋延刚山东阳光融和医院儿科潍坊261061

目的:基于Notch信号轴探究柚皮素对支气管哮喘(BA)小鼠辅助性T细胞17(th17)/调节性T细胞(treg)平衡的影响,并初步探究其作用机制。方法:将C57BL/6小鼠建立BA模型,随机分为模型组、柚皮素组(75 mg/kg)、γ-分泌酶抑制剂(DAPT,Notch1配体... 详细信息

目的:基于Notch信号轴探究柚皮素对支气管哮喘(BA)小鼠辅助性T细胞17(th17)/调节性T细胞(treg)平衡的影响,并初步探究其作用机制。方法:将C57BL/6小鼠建立BA模型,随机分为模型组、柚皮素组(75 mg/kg)、γ-分泌酶抑制剂(DAPT,Notch1配体抑制剂)组(5µmol/L)、Notch配体-Jagged1过表达(ad-Jagged1)组(20µl/只)、ad-Jagged1阴性对照(ad-NC)组,每组15只,另取15只正常小鼠作为对照组。检测小鼠肺功能、支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数、IL-17、IL-22、IL-10、TGF-β水平及外周血th17/treg;HE染色观察肺组织变化;免疫组化检测th17转录因子-RoRγt、treg转录因子-Foxp3阳性表达;Western blot检测Jagged1、Notch1、RoRγt、Foxp3、TGF-β、毛状蛋白(Hes1)、核转录抑制因子(RBPJ)、IL-17蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型组小鼠肺功能减弱,肺组织炎症损伤加重,BALF中炎症细胞增加,th17/treg升高,th17介导的促炎途径Notch1/RBPJ/IL-17/RoRγt相关蛋白表达升高,而treg介导的抗炎途径Jagged1/TGF-β/Hes1/Foxp3相关蛋白表达降低(Pth17介导的促炎途径Notch1/RBPJ/IL-17/RoRγt,还可上调treg介导的抗炎途径Jagged1/TGF-β/Hes1/Foxp3活化,调节Th17/Treg平衡(Pth17介导的促炎途径Notch1/RBPJ/IL-17/RoRγt调节Th17/Treg平衡(Ptreg介导的抗炎途径Jagged1/TGF-β/Hes1/Foxp3活化调节Th17/Treg平衡(Pth17/treg介导的促炎及抗炎反应平衡,缓解BA病理损伤。

关键词：柚皮素哮喘 Th17/Treg平衡 Notch信号轴

针灸对帕金森病小鼠外周血Th17/Treg平衡的调节作用

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中华中医药杂志 2022年第12期37卷 7033-7038页

作者：高峻陈王璐王照钦陈奕奕吴玭李昆珊刘慧荣河南中医药大学郑州450046 上海市针灸经络研究所上海200030 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院上海200437

目的:研究th17细胞和treg细胞在帕金森病模型小鼠外周血的表达状况,并从Th17/Treg平衡角度探讨针灸治疗帕金森病的潜在机制。方法:8周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、针灸组和雷沙吉兰组。采用MPTP腹腔注射的... 详细信息

目的:研究th17细胞和treg细胞在帕金森病模型小鼠外周血的表达状况,并从Th17/Treg平衡角度探讨针灸治疗帕金森病的潜在机制。方法:8周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、针灸组和雷沙吉兰组。采用MPTP腹腔注射的方法建立帕金森病动物模型,模型组不做治疗,仅作抓取固定;针刺组针刺百会、双侧阳陵泉穴;针灸组在针刺组基础上艾灸关元穴;雷沙吉兰组予雷沙吉兰溶液灌胃。观测各组小鼠疲劳转棒实验评分(ORP),采用流式细胞术检测各组小鼠外周血CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)treg、CD4^(+)RORγt^(+)th17细胞数,采用ELISA法检测外周血肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-17、IL-22、IL-4、γ干扰素(IFN-γ)、IL-10、转化生长因子β(TGF-β)的表达情况。结果:模型组小鼠ORP评分显著低于空白组(Ptreg细胞数量显著减少(Pth17细胞数量显著升高(Ptreg细胞数量均显著增加,CD4^(+)RORγt^(+)th17细胞数量显著减少(P17、IL-22、IL-4、IFN-γ表达均显著升高(P17、IL-22、IL-4、IFN-γ表达均显著降低(Pth17和treg细胞分化和相关细胞因子的表达。

关键词：针灸帕金森病 Th17/Treg平衡 MPTP 免疫失衡百会阳陵泉

基于IL-6/STAT3和IL-2/STAT5信号通路探讨伏九贴敷药物调控th17/treg免疫平衡的抗哮喘作用机制

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中药新药与临床药理 2024年第1期35卷 26-34页

作者：付昆杨艳陆一菱仲蓬赵岚徐敏成都市第三人民医院西南交通大学附属医院重庆医科大学附属成都第二临床学院四川成都610031

目的考察伏九贴敷药物(白芥子、甘遂、延胡索、细辛组成)通过IL-6/信号转导器和转录激活因子3(STAT3)、IL-2/信号转导器和转录激活因子5(STAT5)信号通路对哮喘大鼠CD4+T辅助细胞17(th17)/CD4+CD25+调节性T细胞(treg)平衡的调节作用,揭... 详细信息

目的考察伏九贴敷药物(白芥子、甘遂、延胡索、细辛组成)通过IL-6/信号转导器和转录激活因子3(STAT3)、IL-2/信号转导器和转录激活因子5(STAT5)信号通路对哮喘大鼠CD4+T辅助细胞17(th17)/CD4+CD25+调节性T细胞(treg)平衡的调节作用,揭示其抗哮喘的作用机制。方法采用卵白蛋白(OVA)和氢氧化铝混合液致敏激发造模,然后于大鼠大椎穴、肺俞穴和肾俞穴敷上伏九贴敷药物,每次贴敷4 h,隔日1次,共给药7次。采用免疫组化检测肺组织th17特异细胞因子IL-17、treg转录因子Foxp3的阳性表达;流式细胞术检测外周血中th17、treg细胞比例;免疫蛋白印迹法检测肺组织IL-6/STAT3和IL-2/STAT5通路相关蛋白的表达。结果与模型组比较,伏九贴敷组大鼠肺中IL-17的阳性表达量明显减少(P0.05)。此外,伏九贴敷组大鼠外周血中th17细胞比例低于模型组,而treg细胞比例高于模型组,差异均具有统计学意义(Pth17/treg免疫失衡,伏九贴敷药物可通过抑制哮喘大鼠IL-6表达,下调磷酸化STAT3的表达,降低产生IL-17的th17细胞水平;同时增加IL-2表达,介导STAT5磷酸化,升高表达Foxp3的treg细胞水平,促进th17/treg趋于平衡,抑制大鼠哮喘免疫应答,从而发挥抗哮喘效应。

关键词：伏九贴敷哮喘 Th17/Treg平衡 IL-6/STAT3信号通路 IL-2/STAT5信号通路大鼠

黄芪-黄连药对通过激活STAT5信号通路诱导Th17/Treg平衡抑制小鼠动脉粥样硬化

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中华中医药杂志 2023年第6期38卷 2544-2549页

作者：吴斯佳李兆钰马度芳王琳张永健王永成王文婷李晓山东中医药大学济南250014 山东中医药大学附属医院济南250014

目的:观察黄芪-黄连药对对Th17/Treg平衡及STAT5信号通路的影响,探讨其抑制动脉粥样硬化的机制。方法:30只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组、芪-连组、芪-连+抑制剂组,每组10只,高脂饮食饲养12周诱导动脉粥样硬化模型;另取10只C57BL/6小... 详细信息

目的:观察黄芪-黄连药对对Th17/Treg平衡及STAT5信号通路的影响,探讨其抑制动脉粥样硬化的机制。方法:30只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组、芪-连组、芪-连+抑制剂组,每组10只,高脂饮食饲养12周诱导动脉粥样硬化模型;另取10只C57BL/6小鼠作为空白组。于高脂饮食干预的第13周开始给予相应药物灌胃治疗,共6周。检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、白介素(IL)-10、IL-17表达水平,油红O染色观察主动脉壁脂质沉积情况;Western blot检测主动脉组织IL-17、叉头/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)、p-STAT5、STAT5蛋白表达;流式细胞术检测脾脏辅助性T细胞(th)17、调节性T细胞(treg)细胞比率。结果:与模型组比较,芪-连组小鼠血脂、动脉壁脂质沉积面积占比、血清MMP-9及炎症因子水平、IL-17蛋白表达显著降低(Pth17/treg失衡得以改善(Pth17/treg淋巴细胞平衡从而抑制炎症反应有关。

关键词：动脉粥样硬化 Th17/Treg平衡黄芪-黄连药对 ApoE^(-/-)小鼠 STAT5信号通路

小檗碱调节AMPK/NF-κB信号通路对自身免疫性前列腺炎大鼠Th17/Treg平衡的影响

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天津医药 2023年第10期51卷 1104-1109页

作者：缪瑞宇王碧龙宗敏遵义市第一人民医院泌尿外科 563000 遵义市第一人民医院脑血管科 563000

目的探讨小檗碱调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对自身免疫性前列腺炎(EAP)大鼠辅助性T细胞17(th17)/调节性T细胞(treg)平衡的影响。方法将90只SD雄性大鼠随机分为对照组(正常饲养)、模型组、小檗碱低剂量组(2... 详细信息

目的探讨小檗碱调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对自身免疫性前列腺炎(EAP)大鼠辅助性T细胞17(th17)/调节性T细胞(treg)平衡的影响。方法将90只SD雄性大鼠随机分为对照组(正常饲养)、模型组、小檗碱低剂量组(25 mg/kg)、小檗碱高剂量组(50 mg/kg)、阳性对照组(40 mg/kg塞来昔布)、抑制剂组(50 mg/kg小檗碱+0.2 mg/kg AMPK抑制剂compound C),每组15只。除对照组外,其余组大鼠均采用盆腔区域及双侧肩胛皮下多点注射完全弗式佐剂与前列腺组织混合悬液构建EAP大鼠模型,建模成功后进行药物处理,每天灌胃给药1次,持续4周。HE染色观察各组大鼠前列腺组织病理情况;免疫组织化学法检测大鼠前列腺组织视黄酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉头蛋白3(Foxp3)表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清中白细胞介素(IL)-17、IL-10水平;流式细胞仪检测大鼠外周血中th17/treg细胞比值;通过Western blot法检测大鼠前列腺组织中AMPK/NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果与模型组比较,小檗碱低、高剂量组和阳性对照组大鼠前列腺组织腔内有粉色分泌物,腺上皮细胞排列整齐,炎症明显消退,血清IL-17水平、外周血th17/treg比值、前列腺组织RORγt和p-NF-κB p65/NF-κB p65表达水平降低,血清IL-10水平、前列腺组织Foxp3、p-AMPK/AMPK和IκBα表达水平升高(PTh17/Treg平衡的促进作用。结论小檗碱可通过调节AMPK/NF-κB信号通路促进EAP大鼠Th17/Treg平衡。

关键词：自身免疫性前列腺炎小檗碱 AMPK/NF-κB Th17/Treg平衡

淫羊藿多糖对再生障碍性贫血骨髓造血功能与Th17/Treg平衡的影响及其相关机制

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中国实验血液学杂志 2021年第5期29卷 1548-1554页

作者：张乐张友弟江明新疆医科大学第一附属医院血液病中心新疆乌鲁木齐830054

目的:观察淫羊藿多糖(EPS)对再生障碍性贫血(AA)小鼠骨髓造血功能及Th17/Treg平衡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:40只BALB/C小鼠随机分为4组:对照(control)、模型(model)、司坦唑醇(stanozolol)和EPS组,每组10只。除对照组外,其余... 详细信息

目的:观察淫羊藿多糖(EPS)对再生障碍性贫血(AA)小鼠骨髓造血功能及Th17/Treg平衡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:40只BALB/C小鼠随机分为4组:对照(control)、模型(model)、司坦唑醇(stanozolol)和EPS组,每组10只。除对照组外,其余各组采用乙酰苯肼、2.0 Gy照射、环磷酰胺三联应用的方法建立AA小鼠模型。造模后,司坦唑醇组以4 mg/kg司坦唑醇混悬液灌胃,EPS组以100 mg/kg EPS灌胃,对照组和模型组同时以等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,1/d×14。全自动动物血液分析仪检测外周血血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)的变化,流式细胞术检测treg、th17细胞比例,ELISA测定白介素2(IL-2)、白介素11(IL-11)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,计数骨髓有核细胞数,HE染色和免疫组化染色检测骨髓细胞数量变化及骨髓细胞增生与凋亡情况。采用Western blot检测信号转导和转录激活子3(STAT3)、维甲酸受体相关孤儿受体γ(RORγt)、转导和转录激活子5(STAT5)、叉状头转录因子3(Foxp3)蛋白的表达变化。结果:与模型组比较,司坦唑醇组和EPS组小鼠外周血Hb水平及RBC、WBC、PLT数均明显升高(Pth17细胞比例明显降低(Ptreg细胞比例明显升高(Pth17/treg比例失衡,其机制可能与抑制STAT3/RORγt途径和促进STAT5/Foxp3途径有关。

关键词：再生障碍性贫血淫羊藿多糖造血功能 Th17/Treg平衡

皱肺平喘胶囊对慢性阻塞性肺疾病稳定期肺肾气虚证患者外周血Th17/Treg平衡及相关炎症因子的影响

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中国中医药信息杂志 2024年第2期31卷 160-166页

作者：史捷宁博赵明君谭曦舒寇育乐王旭红王瑞哲贺宏伟陕西中医药大学附属医院陕西咸阳712000 陕西中医药大学陕西咸阳712000

目的探讨皱肺平喘胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期肺肾气虚证患者外周血辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞(th17/treg)平衡及相关炎症因子的影响。方法采用随机数字表法将40例COPD患者分为研究组与对照组各20例,另设健康组20例。... 详细信息

目的探讨皱肺平喘胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期肺肾气虚证患者外周血辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞(th17/treg)平衡及相关炎症因子的影响。方法采用随机数字表法将40例COPD患者分为研究组与对照组各20例,另设健康组20例。对照组予噻托溴铵粉吸入剂,18μg/次,1次/d,吸入;研究组在对照组基础上予皱肺平喘胶囊,3粒/次,3次/d,口服。2组均连续治疗8周。健康组未进行干预。比较治疗前后第1秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1/用力肺活量(FVC)、最大呼气中段流量(MMEF)、一氧化碳弥散量/肺泡通气量(DLCO/VA)、动脉血氧分压(PaO_(2))、动脉二氧化碳分压(PaCO_(2))、COPD患者自我评估测试(CAT)评分、外周血th17/treg比例、白细胞介素(IL)-17、IL-22、IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)。结果与本组治疗前比较,研究组治疗后肺功能指标(FEV1、FEV1/FVC、MMEF、DLCO/VA)、动脉血气指标(PaO_(2)、PaCO_(2))和CAT评分明显改善(Pth17、IL-17、IL-22明显降低,treg、IL-10、TGF-β1明显升高(Pth17、treg、IL-17、IL-22、IL-10、TGF-β1差异有统计学意义(Pth17由高到低为对照组>研究组>健康组;treg由高到低为健康组>研究组>对照组;IL-17、IL-22由高到低为对照组>研究组>健康组,IL-10、TGF-β1由高到低为健康组>研究组>对照组,差异均有统计学意义(PTh17/Treg平衡,下调th17、IL-17、IL-22水平,上调treg、IL-10、TGF-β1水平,以降低气道炎性反应、调节免疫稳态。

关键词：慢性阻塞性肺疾病皱肺平喘胶囊 Th17/Treg平衡炎症因子肺肾气虚

青蒿琥酯调控thl7/treg平衡抑制慢性移植物抗宿主病的实验研究

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中华血液学杂志 2019年第1期40卷 63-68页

作者：陈晓梅翁建宇赖沛龙王玉连黄欣耿素霞郭礼妍黄恬曾令基杜欣广东省人民医院(广东省医学科学院)血液科、广东省老年医学研究所广州510080

目的探讨青蒿琥酯抗慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的作用及可能机制。方法将B10D2小鼠的骨髓细胞和脾脏细胞混合悬液通过尾静脉输入近交系雌性BALB/c小鼠体内建立cGVHD模型,分别予青蒿琥酯(实验组)和丙酮腹腔(对照组)注射治疗。观察两组小... 详细信息

目的探讨青蒿琥酯抗慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的作用及可能机制。方法将B10D2小鼠的骨髓细胞和脾脏细胞混合悬液通过尾静脉输入近交系雌性BALB/c小鼠体内建立cGVHD模型,分别予青蒿琥酯(实验组)和丙酮腹腔(对照组)注射治疗。观察两组小鼠的cGVHD临床表现、生存时间和组织病理学改变;应用流式细胞术分析小鼠外周血和脾脏th17和treg细胞比例;免疫磁珠分选BALB/c小鼠脾脏CD4+T细胞,分别予丙酮和青蒿琥酯进行干预72 h,流式细胞术分析两组th17/treg细胞比例。结果①实验组小鼠cGVHD临床症状较对照组明显减轻,生存时间延长[(55.71±6.99)d对(46.57±7.83)d,χ^2=5.457,P=0.020]。②实验组小鼠皮肤及肺脏cGVHD病理损伤较轻。③与对照组比较,实验组小鼠外周血、脾脏th17细胞比例均降低[(0.58±0.19)%对(1.51±0.18)%,t=7.233,Ptreg细胞比例增高[(8.40±0.23)%对(4.45±0.04)%,t=15.680,Pth17/treg细胞比值均下降(0.09±0.03对0.34±0.05,t=7.621,P=0.002;0.06±0.02对0.19±0.03,t=6.993,P=0.002)。④体外培养小鼠脾脏CD4+T细胞,青蒿琥酯干预组较对照组th17细胞比例减低[(0.82±0.37)%对(3.39±1.22)%,t=4.044,P=0.007],treg细胞比例明显增高[(34.63±1.29)%对(14.28±1.69)%,t=19.119,Pth17/treg细胞比值下降(0.24±0.09对0.02±0.01,t=4.780,P=0.003)。结论青蒿琥酯可通过减少th17细胞及增加treg细胞,恢复Th17/Treg平衡,减轻cGVHD的临床与病理学损伤,从而发挥抗cGVHD作用。

关键词：青蒿琥酯 th17细胞调节性T细胞 Th17/Treg平衡慢性移植物抗宿主病

2010-2022年中医药调控Th17/Treg平衡研究文献可视化分析

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中国中医药信息杂志 2023年第5期30卷 50-57页

作者：李浩林李伟青金芳梅阚丽丽张浩张旭明闫丽丽王海东甘肃中医药大学甘肃兰州730000 甘肃省中医院风湿骨病中心甘肃兰州730050

目的了解中医药调控Th17/Treg平衡研究热点和发展趋势。方法检索中国知识资源总库(CNKI)、中文科技期刊数据库(VIP)、中国学术期刊数据库(万方数据)和Web of Science收录的2010年1月1日-2022年4月30日中医药调控Th17/Treg平衡研究文献... 详细信息

目的了解中医药调控Th17/Treg平衡研究热点和发展趋势。方法检索中国知识资源总库(CNKI)、中文科技期刊数据库(VIP)、中国学术期刊数据库(万方数据)和Web of Science收录的2010年1月1日-2022年4月30日中医药调控Th17/Treg平衡研究文献。采用NoteExpress3.6.0和EndNoteX9进行去重及人工筛选,采用Excel2019绘制纳入文献发文时间趋势图,采用VOSviewer1.6.18软件绘制核心作者密度视图和关键词共现分析图谱,采用CiteSpace5.8.R3软件对关键词进行聚类分析、突现分析及时间线分析。结果共纳入313篇中文文献和338篇英文文献,该领域发文量逐年增加,涉及1445名中文作者和2293名英文作者,中文文献形成了以姚成芳、刘宇、彭杰、朱小勤等为代表的研究团队,英文文献形成了以Liu Jian、Dai Zhenhua等为代表的研究团队。中、英文文献关键词各形成了10个有意义的聚类,显示该领域研究热点主要集中于哮喘、溃疡性结肠炎、多发性硬化症、类风湿关节炎等疾病;备受关注的中药复方及单体为芍药汤、左归丸、三拗汤、信筒子醌、射干苷等,针灸疗法的干预机制同样是研究热点;主要涉及TGF-β、IL-10、IL-23、Foxp3、TNF-α等因子及NF-κB、Akt等信号通路的研究。结论中医药调控Th17/Treg平衡的相关研究近年逐渐增多,发展前景良好,Th17/Treg平衡有望成为中医药治疗免疫、炎症、肿瘤等多类疾病相关研究的核心靶点,但该领域总体发文量较少,作者所在团队之间合作不甚紧密,研究者除扩大经典中药复方在该领域的研究外,对针灸疗法及穴位纳米复合水凝胶这类新颖、有效的治疗策略的机制研究亦需深入挖掘。

关键词：中医药 Th17/Treg平衡 VOSviewer CiteSpace 研究热点