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黄芪皂苷I对th1免疫反应的调节效应及机制研究

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云南中医中药杂志 2017年第12期38卷 72-74页

作者：顾瑛媛宋娜丽万春平常州市中医医院江苏常州213003 云南省中医中药研究院云南昆明650223 云南中医学院第一附属医院云南昆明650021

目的研究黄芪皂苷Ⅰ的免疫调节作用以及作用的分子机理。方法构建丝裂原诱导脾淋巴细胞增殖细胞模型,测定黄芪皂苷Ⅰ对Con A诱导T淋巴细胞增殖和LPS诱导B淋巴细胞增殖反应,构建anti-CD3 m Ab抗体诱导T淋巴细胞增殖,RT-PCR检测黄芪皂苷Ⅰ... 详细信息

目的研究黄芪皂苷Ⅰ的免疫调节作用以及作用的分子机理。方法构建丝裂原诱导脾淋巴细胞增殖细胞模型,测定黄芪皂苷Ⅰ对Con A诱导T淋巴细胞增殖和LPS诱导B淋巴细胞增殖反应,构建anti-CD3 m Ab抗体诱导T淋巴细胞增殖,RT-PCR检测黄芪皂苷Ⅰ对IL-2、IFN-γ和T-bet mRNA基因表达。结果黄芪皂苷Ⅰ在30n M显著促进Con A刺激T淋巴细胞增殖,差异有显著性意义(P<0.05);黄芪皂苷Ⅰ体外用药能够显著上调IFN-γ,T-bet的mRNA表达,而对IL-2表达水平无明显影响。结论黄芪皂苷Ⅰ可能特异性激活转录因子T-bet的转录,促进T淋巴细胞增殖和细胞因子的产生。

关键词：黄芪皂苷Ⅰ T淋巴细胞 th1免疫反应 IFN-γ T-bet

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畜牧兽医学报 2022年第1期53卷 250-262页

作者：王正荣马勋张艳艳孟季蒙薄新文省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室/新疆农垦科学院畜牧兽医研究所石河子832000 石河子大学动物科技学院石河子832000

本研究旨在解析巨噬细胞RAW264.7在应对细粒棘球绦虫原头蚴刺激时其th1、th2型免疫反应相关基因的差异表达规律,为进一步揭示巨噬细胞抗细粒棘球绦虫原头蚴免疫调控机制奠定理论基础。将细粒棘球绦虫原头蚴和巨噬细胞RAW264.7共培养6、2... 详细信息

本研究旨在解析巨噬细胞RAW264.7在应对细粒棘球绦虫原头蚴刺激时其th1、th2型免疫反应相关基因的差异表达规律,为进一步揭示巨噬细胞抗细粒棘球绦虫原头蚴免疫调控机制奠定理论基础。将细粒棘球绦虫原头蚴和巨噬细胞RAW264.7共培养6、24、72 h,收集RAW264.7细胞,提取总RNA,构建cDNA文库,利用RNA sequencing技术进行测序分析。结果表明,当细粒棘球绦虫原头蚴(PSC)与巨噬细胞RAW264.7共培养6、24、72 h后,和PBS对照组相比,PSC处理组分别有848、3745和7009个基因的表达出现显著差异变化,其中上调的基因分别为415、1159和2237个,下调的基因分别为433、2586和4772个。对th1、th2型免疫反应相关基因的差异表达分析结果显示,当巨噬细胞RAW264.7与细粒棘球绦虫原头蚴共培养6 h时,共有31个th1、th2型免疫反应相关基因的表达出现显著变化,其中15个基因出现显著上调,16个出现显著下调。当巨噬细胞RAW264.7与细粒棘球绦虫原头蚴共培养24 h时,共有111个th1、th2型免疫反应相关基因的表达出现显著变化,其中34个基因出现显著上调,78个出现显著下调。当巨噬细胞RAW264.7与细粒棘球绦虫原头蚴共培养72 h时,共有212个th1、th2型免疫反应相关基因的表达出现显著变化,其中50个基因出现显著上调,162个出现显著下调。这些差异表达的基因主要包括富亮氨酸重复序列蛋白LRRCs、G蛋白偶联受体GPCRs、C型凝集素受体CLRs、清道夫受体SRs等,同时还有一些模式识别受体PRR下游信号分子以及一些PRR下游效应分子。同时分析结果显示,当细粒棘球绦虫原头蚴与巨噬细胞RAW264.7共培养6、24 h时,其th1型的免疫反应相关的细胞因子编码基因,诸如Tnfrsf1a、Ifnar1的Tnfrsf12a等,它们的表达显著上调;而72 h时,其th2型免疫反应相关细胞因子编码基因,诸如IL4和IL6等,它们的表达显著上调。同时研究随机选取了部分差异表达的基因进行了qRT-PCR验证,结果表明其表达趋势与RNA-seq结果一致。本研究系统解析了巨噬细胞RAW264.7应对细粒棘球绦虫原头蚴刺激不同时间段其相关基因的差异表达谱特性,初步筛选了巨噬细胞RAW264.7应对细粒棘球绦虫原头蚴刺激固有免疫相关的基因,为进一步解析这些差异表达基因在巨噬细胞RAW264.7应对细粒棘球绦虫原头蚴刺激时发挥作用以及调控机制奠定了基础。

关键词：细粒棘球绦虫巨噬细胞RAW264.7 th1免疫反应 th2免疫反应

早期接种卡介苗对支气管哮喘小鼠白细胞介素-10和血管细胞黏附分子-1表达的影响

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中华结核和呼吸杂志 2009年第5期32卷 388-390页

作者：沈雪艳沈华浩黄华琼浙江大学附属第二医院呼吸科杭州310009

支气管哮喘（简称哮喘）是以气道慢性炎症和气道高反应性为主要特征的一种慢性炎症性疾病。卡介苗是结核分枝杆菌减毒活疫苗，一种th1免疫反应刺激剂，卡介苗免疫调节治疗哮喘的机制尚不明确。小鼠白细胞介素（IL）-10是炎症抑制因子，... 详细信息

支气管哮喘（简称哮喘）是以气道慢性炎症和气道高反应性为主要特征的一种慢性炎症性疾病。卡介苗是结核分枝杆菌减毒活疫苗，一种th1免疫反应刺激剂，卡介苗免疫调节治疗哮喘的机制尚不明确。小鼠白细胞介素（IL）-10是炎症抑制因子，对IL-1、IL-4等多种炎症因子具有抑制作用。

关键词：白细胞介素-10 接种卡介苗支气管哮喘哮喘小鼠细胞黏附分子-1 慢性炎症性疾病 th1免疫反应血管

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大黄鱼IFN-γ的分子特征及其功能研究

大黄鱼IFN-γ的分子特征及其功能研究

作者：杨思司国家海洋局第三海洋研究所

学位级别：硕士

干扰素γ（IFN-γ）是I型辅助T细胞（th1）标志性的细胞因子,在免疫和炎症反应的几乎所有阶段都发挥着重要的作用。研究表明,哺乳类IFN-γ是一种多效能的细胞因子,能增强抗病毒反应、抗肿瘤反应、增强抗原递呈作用、激活并介导炎性反应... 详细信息

干扰素γ（IFN-γ）是I型辅助T细胞（th1）标志性的细胞因子,在免疫和炎症反应的几乎所有阶段都发挥着重要的作用。研究表明,哺乳类IFN-γ是一种多效能的细胞因子,能增强抗病毒反应、抗肿瘤反应、增强抗原递呈作用、激活并介导炎性反应、促进th1免疫反应以及调控细胞增殖和凋亡等功能。目前已经有研究报道克隆出了多个鱼种的IFN-γ基因,且在一些鱼类中还发现了IFN-γ基因的同源物IFN-γrel。目前对鱼类IFN-γ的研究主要集中在其分子及表达特征方面,与哺乳类相比,目前对鱼类IFN-γ的功能认识还不够深入,因此有待于对鱼类IFN-γ功能进行全面且深入的研究。因此,本文展开我国重要海水经济鱼种——大黄鱼IFN-γ（LycIFN-γ）的分子特征及功能研究,将有助于深入了解大黄鱼IFN-γ在免疫反应中的功能,也为其病害防治提供新的思路。本文克隆了LycIFN-γ基因全长cDNA,长1466 bp,编码由200个氨基酸组成的蛋白。推断的LycIFN-γ蛋白包含鱼类IFN-γ的标识序列V157QSKALWELSGI168,及C末端由4个碱性氨基酸组成的核定位信号序列（RRRR）。组织表达分析显示,LycIFN-γ在各种组织,如脑、肠、头肾、皮肤、鳃、肝脏、脾脏、心脏和血液等中为组成型表达。LycIFN-γ在几种免疫相关细胞,如大黄鱼原代粒细胞、巨噬细胞、头肾白细胞和大黄鱼头肾细胞系（LYCK）中也均有表达。poly（I:C）和三联细菌灭活疫苗刺激后,LycIFN-γ转录水平在大黄鱼脾脏和头肾组织中显著上调。同样在poly（I:C）和LPS刺激条件下,LycIFN-γ转录水平在大黄鱼原代头肾白细胞中也发生明显上调。在大肠杆菌BL21中重组表达的LycIFN-γ融合蛋白（rLycIFN-γ）不仅能够增强大黄鱼巨噬细胞的呼吸爆发反应、上调诱导型一氧化氮合酶基因（i NOS）的转录水平以及一氧化氮（NO）的释放,而且还可上调炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-1β（IL-1β）的转录水平,这表明LycIFN-γ可参与大黄鱼的炎性反应。在rLycIFN-γ处理的大黄鱼头肾白细胞中,IFN-γ受体细胞因子受体B（CRFB13）,信号传导及转录激活因子（STAT1）,转录因子干扰素调节因子（IRF1）和T-bet（T-box expressed in T cells）,th1相关细胞因子IFN-γ和白细胞介素-2（interluekin-2,IL-2）的转录水平均发生上调,表明LycIFN-γ可能具有促进th1免疫反应的功能。这些结果提示LycIFN-γ可能具有与哺乳类IFN-γ相似的生物学功能。

关键词：大黄鱼 IFN-γ th1免疫反应

mTOR通过调控转录因子c-Fos而影响TLR诱导的th1反应的机制和功能研究

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mTOR通过调控转录因子c-Fos而影响TLR诱导的Th1反应的机制和功能...

作者：何丽苏州大学

学位级别：硕士

尽管IL-12在诱导th1和CTL细胞免疫应答中起着非常关键的作用,但单独用TLR配体刺激DC和巨噬细胞时,只能诱导少量的IL-12表达,表明其表达水平受着严格的调控。通过本项研究,我们发现并阐述了TLR诱导IL-12表达,促进th1应答的新机制。我们... 详细信息

尽管IL-12在诱导th1和CTL细胞免疫应答中起着非常关键的作用,但单独用TLR配体刺激DC和巨噬细胞时,只能诱导少量的IL-12表达,表明其表达水平受着严格的调控。通过本项研究,我们发现并阐述了TLR诱导IL-12表达,促进th1应答的新机制。我们通过筛选蛋白磷酸激酶的小分子抑制剂库,发现了一些参与调节LPS诱导IL-12表达的蛋白激酶。通过进一步的研究,我们发现PI3K,ERK和m TOR是在天然免疫细胞中调节IL-12和IL-10的表达,从而调控机体的th1免疫反应的关键激酶。此外,我们发现这些激酶都控制TLR诱导转录因子c-Fos的表达,而c-Fos直接参与调节LPS诱导的IL-12和IL-10的表达调控。c-Fos通过与NF-κB相互作用,影响NF-κB与IL-12和IL-10启动子的结合效率,因此在转录水平上调控IL-12和IL-10等基因的表达。而且,利用m TOR的抑制剂Rapamycin作为佐剂,可以有效地提升乙肝和丙肝疫苗的效果。总之,这些结果表明m TOR通过调控c-Fos,进而调控TLR诱导的IL-12和IL-10表达,影响疫苗诱导的th1免疫反应。

关键词： IL-12 mTOR Toll样受体 c-Fos th1免疫反应

细粒棘球蚴重组抗原蛋白BCG-egG1Y162免疫原性的初步研究

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新疆医科大学学报 2019年第5期42卷 593-598页

作者：李海丽刘永太张峰波李玉娇李智伟赵骁丁剑冰王红英新疆医科大学第一临床医学院乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院乌鲁木齐830011 阿克苏市兵团第一师医院检验科新疆阿克苏843000 省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室乌鲁木齐830011

目的初步研究细粒棘球蚴重组抗原蛋白BCG-egG1Y162的免疫原性。方法选取60只小鼠分别分为3组实验组、重组卡介苗组和正常组小鼠分别注射重组抗原蛋白BCG-egG1Y162、重组卡介苗(BCG)和生理盐水(NS)。在免疫的第0、2、4、6、8周收集各组... 详细信息

目的初步研究细粒棘球蚴重组抗原蛋白BCG-egG1Y162的免疫原性。方法选取60只小鼠分别分为3组实验组、重组卡介苗组和正常组小鼠分别注射重组抗原蛋白BCG-egG1Y162、重组卡介苗(BCG)和生理盐水(NS)。在免疫的第0、2、4、6、8周收集各组小鼠的血清,通过酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清中抗体IgG的动态变化水平。在第8周随机处死各组一半数量的小鼠提取脾淋巴细胞,分别通过四甲基偶氮咗蓝实验(MTT法)以及ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞体外增殖反应和细胞上清中IFN-γ、IL-4的水平变化。在免疫后第8周用活棘球蚴原头蚴感染各组存活的小鼠,感染后第24周处死各组小鼠,检测血清中IgG水平、包囊个数及其直径。结果 (1)免疫后的第2～8周,BCG-egG1Y162免疫组小鼠血清中IgG持续升高,与正常组和BCG组相比差异具有统计学意义(P0.05)。(2)BCG-egG1Y162免疫组小鼠的脾淋巴细胞在体外能被BCG-egG1Y162特异性的刺激增生,增殖水平显著高于BCG组和正常组(P0.05)。(3)在各组小鼠感染活棘球蚴原头蚴后的第24周,BCG-egG1Y162免疫组具有87.3%的免疫保护力,并且血清中的IgG水平显著高于BCG组和正常组(P免疫小鼠后可上调小鼠血清中抗体IgG的水平,刺激脾淋巴细胞增殖活化,特异性地增强脾淋巴细胞的th1免疫反应和机体抵抗细粒棘球蚴感染的能力,说明BCG-egG1Y162是具有研究价值的细粒棘球蚴病候选疫苗分子。

关键词：细粒棘球蚴病免疫原性重组蛋白BCG-egG1Y162 th1免疫反应

抑制性ODN对溃疡性结肠炎小鼠th1/th2免疫失衡的调节作用

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中国实验诊断学 2013年第12期17卷 2133-2135页

作者：孙鹏周晓晶刘伯岩杨文颖吉林省人民医院消化内科吉林长春130021 长春中医药大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

目的研究抑制性ODN对溃疡性结肠炎小鼠th1/th2免疫失衡的调节作用。方法首先利用我们已发表的研究[1]中的方法建立小鼠溃疡性结肠炎模型。建模成功后将结肠炎小鼠随机分为两组,分别给予腹腔内注射PBS、A151,记作PBS+UC组、A151+UC组,同... 详细信息

目的研究抑制性ODN对溃疡性结肠炎小鼠th1/th2免疫失衡的调节作用。方法首先利用我们已发表的研究[1]中的方法建立小鼠溃疡性结肠炎模型。建模成功后将结肠炎小鼠随机分为两组,分别给予腹腔内注射PBS、A151,记作PBS+UC组、A151+UC组,同时设一组健康小鼠对照并给予腹腔注射PBS,记作PBS+健康对照组。每组分别连续注射7天,末次注射后7天取小鼠血清并分离小鼠结肠组织制备匀浆。利用ELISA方法检测血清及结肠匀浆中IL-6、TNF-α、IL-10、IL-4水平。结果经检测发现抑制性ODN能明显下调IL-6和TNF-α的水平,而上调IL-10和IL-4水平。结论抑制性ODN对小鼠溃疡性结肠炎的抑制作用或许是通过调节th1/th2平衡来实现的。

关键词：溃疡性结肠炎 th2免疫反应 th1免疫反应

抗原特异性免疫治疗对过敏性鼻炎的疗效及免疫功能的影响

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实用临床医药杂志 2016年第3期20卷 95-97,111页

作者：秦阳江苏省南通市第一人民医院耳鼻喉科江苏南通226001

目的探讨抗原特异性免疫治疗(SIT)对过敏性鼻炎(AR)的疗效及免疫功能的影响。方法门诊收治持续性AR患者82例,随机分为观察组和对照组,各41例。观察组给予标准化屋尘螨变应原制剂皮下注射,对照组在发病期给予鼻内吸入表面激素或全身抗组... 详细信息

目的探讨抗原特异性免疫治疗(SIT)对过敏性鼻炎(AR)的疗效及免疫功能的影响。方法门诊收治持续性AR患者82例,随机分为观察组和对照组,各41例。观察组给予标准化屋尘螨变应原制剂皮下注射,对照组在发病期给予鼻内吸入表面激素或全身抗组胺药物等对症治疗。结果观察组临床总有效率(95.12%)高于对照组(78.05%),差异有统计学意义(P1年后低于治疗半年时,且均低于对照组。治疗后,对照组仅IL-4水平下降;观察组IL-2、IFN-γ水平上升,IL-4、IL-5水平下降,且升高或降低的幅度均优于对照组,差异均有统计学意义(P1)。结论对AR患者采取SIT治疗能够缓解临床症状,降低其对药品的需求,改善免疫功能。

关键词：过敏性鼻炎免疫球蛋白 th1免疫反应 th2免疫反应抗原特异性免疫治疗

母牛分枝杆菌菌苗对支气管哮喘豚鼠的免疫预防作用

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中华结核和呼吸杂志 2005年第12期28卷 859-859页

作者：赵云峰罗永艾黄习臣重庆医科大学附属第一医院肺科

支气管哮喘(简称哮喘)发病与th1/th2免疫反应失衡有关,表现为th2 反应增强,th1反应减弱.母牛分枝杆菌菌苗是一种th1免疫反应诱导剂,可下调th2细胞引起的哮喘炎症反应[1].我们的研究旨在探讨该菌苗对哮喘豚鼠的免疫预防作用.

关键词：母牛分枝杆菌菌苗免疫预防作用支气管哮喘哮喘豚鼠 th2免疫反应 th1免疫反应 th1反应 th2反应 th2细胞炎症反应