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紫杉醇对人tenon囊成纤维细胞增生的抑制作用及机制

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中华实验眼科杂志 2014年第2期32卷 119-124页

作者：陈宁虹毕宏生郭大东郭媛媛杜然然马晓华山东中医药大学济南250355 山东中医药大学附属眼科医院济南250002 山东中医药大学眼科研究所济南250002

背景人tenon囊成纤维细胞（HTFs）的异常增生是导致抗青光眼滤过手术失败的主要原因。寻找抑制HTFs增生的药物对抑制青光眼术后功能性滤过泡的瘢痕化有重要意义。目的观察紫杉醇对体外培养的HTFs增生、凋亡、细胞周期以及基质金属蛋白... 详细信息

背景人tenon囊成纤维细胞（HTFs）的异常增生是导致抗青光眼滤过手术失败的主要原因。寻找抑制HTFs增生的药物对抑制青光眼术后功能性滤过泡的瘢痕化有重要意义。目的观察紫杉醇对体外培养的HTFs增生、凋亡、细胞周期以及基质金属蛋白酶-1（MMP-1）表达的影响。方法收集抗青光眼滤过术中切除的人眼tenon囊组织，用组织块培养法培养HTFs并进行传代，取3～6代细胞用于实验。采用小鼠抗人角蛋白抗体、小鼠抗人波形蛋白抗体、小鼠抗人结蛋白抗体、小鼠抗人S-100抗体行免疫组织化学染色鉴定培养的HTFs。在培养基中分别加入0、1×10^-8、1×10^-8、1×10^-6mol／L紫杉醇，采用实时细胞电子分析系统（RT—CES）观察不同浓度紫杉醇作用后HTFs的细胞指数变化；采用DAPI染色法观察各组细胞的凋亡情况；用流式细胞术检测不同浓度紫杉醇作用后HTFs各细胞周期比例；采用实时定量PCR（real—timePCR）和ELISA法检测各组HTFs中MMP-1mRNA和蛋白的表达量，分别以MMP-1mRNA／GAPDHmRNA和MMP-1蛋白质量浓度（μg／L）表示。结果组织块原代培养7d内可见细胞游出，呈长梭形和不规则三角形，培养的细胞抗波形蛋白抗体染色阳性，而抗角蛋白抗体、抗结蛋白抗体和抗S-100抗体染色阴性。培养基中加入紫杉醇作用24h后，1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6mol／L紫杉醇组平均细胞指数值分别为1．09±0．191、0．665±0．093和0．473±0．117，均明显低于0mol／L紫杉醇组的1．514±0．283，差异均有统计学意义（均P=0．000）；紫杉醇作用后，HTFs的细胞核内可见呈DAPI蓝色荧光的颗粒状物质，荧光强度随着紫杉醇浓度的增加而增强。l×10^-8、1×10^-7、1×10^-6mol／L紫杉醇分别作用12h后，G，／M期HTFs的比例分别为（9．20±0．80）％、（12．37±0．45）％和（13．80±0．35）％，明显高于0mol／L紫杉醇组的（7．17±0．50）％，差异均有统计学意义（P=0．005、0．000、0．000）。与0mol／L紫杉醇组比较，1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6mol／L紫杉醇作用30min后HTFs中MMP-1mRNA的相对表达量均明显下降，差异均有统计学意义（均P=0．000）；1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6mol／L紫杉醇作用24h后，HTFs中MMP-1蛋白的表达量均明显低于0mol／L紫杉醇组，差异均有统计学意义（P=0．010、0．002、0．001）。结论1×10^-8～1×10^-6mol／L紫杉醇可抑制体外培养HTFs的增生，诱导细胞凋亡，阻断细胞的有丝分裂，其作用机制可能与下调细胞中MMP-1的表达有关。

关键词：紫杉醇药理学青光眼手术 tenon囊细胞学成纤维细胞细胞学基质金属蛋白酶一1

转化生长因子β2对人眼tenon囊成纤维细胞中赖氨酰氧化酶家族表达的诱导作用

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中华实验眼科杂志 2017年第4期35卷 314-319页

作者：郭凤朱晓燕陈侠张勇谭燕吴晓凤刘锐李磊鲜光军谢琳第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所研究室重庆400042

背景研究表明，转化生长因子β2（TGF-β2）促进tenon囊成纤维细胞（TFs）的活化，在青光眼滤过术后结膜下纤维化过程中发挥作用，但其作用机制尚未完全明了。赖氨酰氧化酶家族（LOXs）与细胞外基质重塑有关，了解青光眼术后滤过泡的纤... 详细信息

背景研究表明，转化生长因子β2（TGF-β2）促进tenon囊成纤维细胞（TFs）的活化，在青光眼滤过术后结膜下纤维化过程中发挥作用，但其作用机制尚未完全明了。赖氨酰氧化酶家族（LOXs）与细胞外基质重塑有关，了解青光眼术后滤过泡的纤维化过程中TGF-β2与LOXs活化的关系对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的防治具有重要意义。目的观察TGF-β2对体外培养的人眼TFs中LOXs蛋白表达变化的影响。方法将培养的第4～8代人TFs分为正常对照组和不同质量浓度TGF-β2培养组，分别在细胞培养液中添加终质量浓度为2、4、8和16ng／ml TGF-β2继续培养24h，采用Western blot法测定不同质量浓度TGF-β2培养组细胞中LOXs蛋白表达的变化，确定最适TGF-β2刺激质量浓度。用4ng／ml TGF-β2分别处理培养的TFs6、12、24和48h，采用Western blot法测定各时间点细胞中LOXs蛋白表达的变化。采用细胞免疫荧光法分别检测正常对照组和4ng／ml TGF-β2培养组TFs中LOX蛋白的表达及其在细胞中的分布。结果Western blot法检测显示，正常对照组及2、4、8和16ng／ml TGF-β2培养组人TFs中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3及LOXL4蛋白的表达强度均随TGF-β2质量浓度的升高而增加，各组间细胞中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3和LOXL4蛋白相对表达量的总体比较，差异均有统计学意义（F=37．338、13．438、31．067、11．767、15．167，均P〈0．01）。细胞中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3及LOXL4蛋白相对表达量的升高呈TGF-β2剂量依赖性。正常对照组及4ng／ml TGF-β2刺激人TFs后6、12、24和48h组，细胞中LOXL2蛋白的相对表达量分别为0．68±0．07、1．09±0．10、1．32±0．07、1．50±0．06和1．89±0．12，其表达强度呈时间依赖性，总体比较差异有统计学意义（F=82．832，P=0．000）。正常对照组人TFs中LOX蛋白表达强度较弱，主要位于细胞质中，TGF-β2培养组细胞中LOX蛋白的表达强度明显强于正常对照组，且表达LOX蛋白的细胞增多。结论正常人TFs中可见LOXs呈低表达，TGF-β2以剂量和时间依赖的方式上调人TFs中LOXs蛋白的表达。这个结果为青光眼术后滤过泡纤维化的相关防治研究提供了实验依据。

关键词：青光眼滤过手术/不良反应 tenon囊成纤维细胞人赖氨酰氧化酶转化生长因子β2/药物作用细胞培养

羟喜树碱通过蛋白激酶R样内质网激酶途径促进人tenon囊成纤维细胞自噬作用

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中华实验眼科杂志 2015年第3期33卷 201-206页

作者：范舒欣傅煜轩袁志兰南京医科大学第一附属医院眼科 210029 南京医科大学基础医学院生理系 210029

背景研究证实,羟喜树碱可通过蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）途径引起人tenon囊成纤维细胞（HTFs）凋亡,细胞自噬与凋亡均为细胞在外界压力下产生的程序性死亡反应,二者关系密切,但羟喜树碱与HTFs自噬之间的关系尚不明确. 目的探讨羟... 详细信息

背景研究证实,羟喜树碱可通过蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）途径引起人tenon囊成纤维细胞（HTFs）凋亡,细胞自噬与凋亡均为细胞在外界压力下产生的程序性死亡反应,二者关系密切,但羟喜树碱与HTFs自噬之间的关系尚不明确. 目的探讨羟喜树碱对HTFs自噬的作用及其机制.方法从健康成年眼球供体中取人tenon囊组织,经组织块培养法培养细胞,并用免疫组织化学法检测细胞中波形蛋白和角蛋白的表达以鉴定培养的细胞.利用293T细胞包装pLVX-PERK慢病毒,将慢病毒转染入HTFs,通过嘌呤霉素筛选出稳定的PERK敲除细胞系.用质量浓度为0.10 g/L的羟喜树碱处理细胞5 min后继续培养24h作为实验组,未用羟喜树碱处理的细胞作为对照组.采用Western blot法检测各组HTFs中自噬相关蛋白Beclin-1、自噬相关基因5（ATG-5）、微管相关蛋白1轻链3（LC-3）表达的灰度值;采用Cyto-ID荧光染色法检测各组HTFs中自噬小体的荧光强度及数量,将各实验结果进行分析比较. 结果 0.10 g/L羟喜树碱处理组HTFs中Beclin-1、ATG-5、LC-3-Ⅰ和LC-3-Ⅱ蛋白表达的灰度值分别为0.980±0.070、1.495±0.095、0.585±0.025和0.785±0.055,明显高于对照组的0.365 ±0.045、0.765 ±0.055、0.120±0.030和0.215±0.035,差异均有统计学意义（Beclin-1：P=0.018;ATG-5：P=0.022;LC-3-Ⅰ：P=0.007;LC-3-Ⅱ：P=0.013）.荧光显微镜检测发现,羟喜树碱处理组中自噬小体的绿色荧光强于对照组.Western blot检测结果显示,PERK敲除的细胞中PERK蛋白灰度值为0.130±0.030,明显低于对照组的0.765 ±0.055,差异有统计学意义（P=0.010）,而2个组间细胞中Beclin-1、ATG-5和LC-3蛋白反应条带强度无明显差别.0.10 g/L羟喜树碱处理组HTFs中PERK蛋白表达的灰度值为1.790±0.060,较对照组的0.880±0.070明显升高,差异有统计学意义（P=0.010）.PERK敲除±0.10 g/L羟喜树碱处理组HTFs中Beclin-1、ATG-5、LC-3-Ⅰ和LC-3-Ⅱ蛋白表达的灰度值分别为0.475 ±0.045、0.390±0.040、0.055±0.015和0.075±0.025,明显低于对照±0.10 g/L羟喜树碱处理组的0.955±0.065、0.765±0.055、0.155±0.015和0.280±0.030,差异均有统计学意义（Beclin-1：P=0.026;ATG-5：P=0.031;LC-3-Ⅰ：P=0.042;LC-3-Ⅱ：P=0.034）.PERK敲除＋0.10 g/L羟喜树碱处理组细胞中自噬小体的绿色荧光强度明显低于对照＋0.10 g/L羟喜树碱处理组. 结论羟喜树碱可能通过PERK途径诱导HTFs的自噬.

关键词：自噬羟喜树碱内质网应激信号转导人 tenon囊成纤维细胞基因转染基因敲除

结缔组织生长因子对人tenon囊成纤维细胞中E-cadherin蛋白表达的促进作用

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中华实验眼科杂志 2015年第8期33卷 695-698页

作者：李静谢安明陕西省人民医院眼科西安710068 西安交通大学第一附属医院眼科 710061

背景青光眼滤过手术后滤过通道的瘢痕化是手术失败的主要原因,其主要病理机制是成纤维细胞的异常增生、间质-上皮转分化及细胞外基质的重塑.结缔组织生长因子（CTGF）是促进瘢痕形成的关键因子,而CTGF是否能促进人tenon囊成纤维细胞（H... 详细信息

背景青光眼滤过手术后滤过通道的瘢痕化是手术失败的主要原因,其主要病理机制是成纤维细胞的异常增生、间质-上皮转分化及细胞外基质的重塑.结缔组织生长因子（CTGF）是促进瘢痕形成的关键因子,而CTGF是否能促进人tenon囊成纤维细胞（HTFs）的间质-上皮转分化尚不清楚.目的观察CTGF对HTFs间质-上皮转分化的影响.方法用体积分数10％胎牛血清的DMEM高糖型培养液进行HTFs体外常规培养和传代,取3～6代细胞用于实验.将培养的HTFs分为空白对照组和CTGF处理组,空白对照组用DMEM完全培养液培养细胞,CTGF处理组在培养液中加入CTGF,使终质量浓度为50 ng/ml.细胞培养后48 h,采用细胞免疫荧光染色技术鉴定HTFs中上皮钙黏素（E-cadherin）蛋白的表达,采用Western blot法对HTFs中E-cadherin蛋白的表达量进行检测.结果空白对照组及CTGF处理组HTFs均生长良好,呈长梭形,漩涡状排列.细胞免疫荧光染色显示,CTGF处理组HTFs细胞质呈红色荧光,细胞核呈蓝色荧光;空白对照组HTFs仅见DAPI蓝染的细胞核,无E-cadherin表达的红色荧光.Western blot法检测结果显示,空白对照组HTFs中E-cadherin蛋白无表达,而CTGF处理组HTFs中E-cadherin蛋白的相对表达量为0.63±0.08.结论间叶组织来源的成纤维细胞本身不表达E-cadherin,在CTGF的刺激下成纤维细胞能够表达E-cadherin,CTGF促进HTFs的间质-上皮转分化.

关键词：人成纤维细胞 tenon囊结缔组织生长因子转分化青光眼/手术滤过泡瘢痕化

抗青光眼术后滤过泡瘢痕化组织人tenon囊成纤维细胞的生长特性

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中华实验眼科杂志 2014年第4期32卷 308-312页

作者：李中秋张孝生卢弘首都医科大学附属北京朝阳医院眼科北京100025

背景抗青光眼滤过术后瘢痕组织中的主要细胞成分是人tenon囊成纤维细胞（HTFs）,探讨滤过泡瘢痕组织中HTFs的生长特性可为抗青光眼滤过术后预防瘢痕形成的研究提供实验基础. 目的研究抗青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化组织中HTFs的体外生... 详细信息

背景抗青光眼滤过术后瘢痕组织中的主要细胞成分是人tenon囊成纤维细胞（HTFs）,探讨滤过泡瘢痕组织中HTFs的生长特性可为抗青光眼滤过术后预防瘢痕形成的研究提供实验基础. 目的研究抗青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化组织中HTFs的体外生长特性. 方法收集因抗青光眼小梁切除术后滤过泡瘢痕化行二次手术的患者8例8眼的tenon囊组织（4 mm＆#215;5 mm）,同期以同样的取材方法收集行斜视矫正术患者8例8眼的正常tenon囊组织.采用组织块贴壁法将tenon囊组织进行原代培养,用鼠抗人波形蛋白细胞免疫荧光法鉴定培养的HTFs,并用巢式PCR法检测培养的HTFs中是否受到支原体的污染.分别于第0、4、7、11、14天以发光法细胞活力检测HTFs,并绘制各组细胞的生长曲线,计算细胞群体倍增时间（PDT）.比较瘢痕组和正常组HTFs形态学和PDT的差异;将瘢痕组第5代与第15代HTFs的形态及PDT进行比较,评价细胞传代生长特性的稳定性. 结果 HTFs原代培养1～2周达到融合,呈长梭形,形态符合HTFs,传代细胞4～6 d达到融合.瘢痕组与正常组HTFs的生长特性相近,对鼠抗人波形蛋白抗体呈阳性反应,PCR检测未见支原体反应条带.瘢痕组和正常组HTFs的PDT分别为（20.54±3.51）h和（18.86±2.91）h,差异无统计学意义（t=0.634,P=0.561）.细胞培养后第4、7、11和14天,瘢痕组HTFs的细胞数与正常组比较差异均无统计学意义（t=2.663,P=0.081;t=0.194,P=0.863;t=3.338,P=0.053;t=0.627,P=0.565）,2个组的HTFs随培养时间的延长显示出一致的增生曲线.瘢痕组第5代和第15代细胞PDT分别为（20.54±3.51）h及（22.84±4.15）h,差异无统计学意义（t=0.733,P=0.505）;第5代与第15代间细胞生长曲线可见其增生能力均稳定,两代间HTFs在各时间点的细胞数差异均无统计学意义（t=1.528,P=0.235;t=0.269,P=0.786;t=1.954,P=0.139;t=0.730,P=0.506）.结论抗青光眼术后滤过泡瘢痕化患者的HTFs体外培养生长状态良好,增生能力稳定,是进行青光眼术后滤过区抗纤维化研究的良好靶细胞.

关键词：人成纤维细胞细胞学 tenon囊细胞学青光眼细胞培养细胞增生

后tenon囊下注射曲安奈德治疗白内障手术后黄斑囊样水肿的短期疗效观察

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中华眼底病杂志 2020年第8期36卷 616-619页

作者：黄颖孙祖华李英姿刘晓玲林冰温州医科大学附属眼视光医院眼底内科 325027

目的观察后tenon囊下注射曲安奈德(TA)治疗白内障手术后黄斑囊样水肿(CME)的短期临床疗效。方法回顾性临床研究。2013年10月1日至2018年10月1日于温州医科大学附属眼视光医院检查确诊的白内障手术后CME患者21例21只眼纳入研究。所有患... 详细信息

目的观察后tenon囊下注射曲安奈德(TA)治疗白内障手术后黄斑囊样水肿(CME)的短期临床疗效。方法回顾性临床研究。2013年10月1日至2018年10月1日于温州医科大学附属眼视光医院检查确诊的白内障手术后CME患者21例21只眼纳入研究。所有患眼均行BCVA、眼压、频域OCT检查。采用标准对数视力表行BCVA检查,记录时换算为logMAR视力。采用频域OCT仪测量黄斑中心凹视网膜厚度(CRT)。21例21只眼中,男性9例9只眼,女性12例12只眼;平均年龄(66.38±10.88)岁。其平均logMAR BCVA 0.46±0.23;平均CRT(519.90±131.59)μm;平均眼压(11.01±3.97)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)。所有患眼均接受后tenon囊下注射100 mg/ml的TA悬浮液0.4 ml(含TA 40 mg)的单次治疗。治疗后平均随访时间(32.86±20.2)d。对比观察患眼治疗前及治疗后1个月的BCVA、CRT、眼压变化,并行配对t检验。结果治疗后1个月,患眼平均logMAR BCVA、CRT、眼压分别为0.29±0.22、(307.71±35.82)μm、(14.19±6.30)mmHg;与治疗前比较,差异均有统计学意义(t=5.252、8.166、4.128,P=0.000、0.000、0.001)。21只眼中,黄斑区视网膜层间囊腔完全消退13只眼(61.90%);视网膜层间仍可见囊腔8只眼(38.1%)。出现眼压>21 mmHg者3只眼,给予降眼压药物治疗后恢复正常。结论后tenon囊下注射TA治疗白内障手术后CME短期内可降低CRT,提高视力。

关键词： tenon囊曲安奈德黄斑水肿/药物疗法超声乳化白内障吸除术

特异性转化生长因子-β_2 shRNA对人眼tenon囊成纤维细胞的抑制作用

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眼科研究 2010年第12期28卷 1150-1153页

作者：骆玮孙璐李静敏大连医科大学附属二院眼科 116027

目的观察转化生长因子-β2(TGF-β2)特异性短发夹RNA(shRNA)对人眼tenon囊成纤维细胞(TCFs)TGF-β2表达的影响及对人TCFs增生的抑制作用。方法根据小干扰RNA(siRNA)的设计原则,针对TGF-β2基因序列特征构建特异性shRNA载体,转染培养的人... 详细信息

目的观察转化生长因子-β2(TGF-β2)特异性短发夹RNA(shRNA)对人眼tenon囊成纤维细胞(TCFs)TGF-β2表达的影响及对人TCFs增生的抑制作用。方法根据小干扰RNA(siRNA)的设计原则,针对TGF-β2基因序列特征构建特异性shRNA载体,转染培养的人TCFs。MTT比色法检测细胞的增生情况;ELISA法检测shRNA对TGF-β2蛋白表达的抑制作用。结果 TGF-β2shRNA转染组的细胞增生及TGF-β2蛋白的表达均受到抑制。转染24、48、72h后MTT比色法检测显示,TGF-β2shRNA转染组培养的tenon囊的成纤维细胞的增生值分别为0.5426±0.05、0.5210±0.03、0.4055±0.04,明显低于阴性对照组的0.5655±0.03、0.5378±0.03、0.5268±0.04,3个组和各时间点的总体差异均有统计学意义(F组=54.691,P=0.000;Ftime=66.888,P=0.000)。ELISA法检测显示,TGF-β2shRNA转染组TGF-β2蛋白的表达水平下降,24、48、72hTGF-β2蛋白的表达量分别为(543.58±25.32)、(400.26±30.74)、(202.72±23.24)ng/L,明显低于阴性对照组的(659.78±20.95)、(547.45±24.65)、(442.87±17.43)ng/L及空白组的(721.75±30.19)、(756.61±30.19)、(787.60±18.37)ng/L,3个组和各时间点的总体差异均有统计学意义(F组=163.082,P=0.000;F时间=31.498,P=0.000)。结论 TGF-β2特异性shRNA能显著抑制人TCFsTGF-β2的表达,载体介导的TGF-β2特异性shRNA对眼前节术后的抗瘢痕化治疗具有潜在的可能性。

关键词： RNA干扰技术 tenon囊成纤维细胞转化生长因子-β2

探讨自体tenon囊在青光眼巩膜瓣变薄滤过泡渗漏修补中的应用研究

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中华眼科杂志 2019年第7期55卷 536-540页

作者：吕明原潘晓晶孙伟蓝婕谢立信山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东省眼科研究所山东省眼科学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地青岛眼科医院 266071

目的探讨应用自体tenon组织修补滤过泡渗漏的手术效果.方法回顾性系列病例研究.收集2010年1月至2018年8月山东省眼科研究所青岛眼科医院收治的16例(16只眼)青光眼小梁切除术后滤过泡渗漏患者的临床及随访资料,所有患者均行自体tenon组... 详细信息

目的探讨应用自体tenon组织修补滤过泡渗漏的手术效果.方法回顾性系列病例研究.收集2010年1月至2018年8月山东省眼科研究所青岛眼科医院收治的16例(16只眼)青光眼小梁切除术后滤过泡渗漏患者的临床及随访资料,所有患者均行自体tenon组织填塞巩膜瓣下并缝合固定联合结膜瓣前徙修补术(附手术视频).在眶下神经联合睫状神经节阻滞麻醉下剪开滤过泡边缘球结膜剥离囊样变性滤过泡,钝性分离上方球结膜瓣,暴露巩膜瓣并按原巩膜板层重新剥离,取原巩膜瓣相应大小的健康tenon组织备用,10-0尼龙线固定缝合巩膜瓣,将备用的tenon组织填塞于巩膜瓣下,缝合固定,形成前房,探查眼压和滤过,将上方球结膜瓣对位缝合于角巩膜缘.评估指标主要包括术前术后眼压、视力、术后并发症等.计量资料比较主要采取配对t检验.结果16例(16只眼)患者中,男性11例,女性5例;年龄46~80岁,中位数57岁.术后随访时间2.0~96.0个月,中位数10.0个月.眼压由术前(9.7±1.2)mmHg(6.0~15.0mmHg)(1mmHg=0.133kPa)上升至术后3个月的(15.5±2.7)mmHg(10.0~20.0mmHg),差异有统计学意义(t=2.63,P=0.02),末次随访用药或不用药眼压正常.术后3个月最佳矫正视力(最小分辨角对数视力)为0.32±0.08,较术前的0.59±0.25有明显改善(t=3.04,P=0.02);末次随访最佳矫正视力为0.24±0.06,较术后3个月最佳矫正视力差异无统计学意义(t=0.81,P=0.42).3只眼发生一过性浅前房,其中2只眼合并脉络膜脱离,经药物治疗1周内恢复,无其他严重并发症.结论应用自体tenon组织联合结膜瓣前徙术修补滤过泡渗漏简单易行、安全有效.

关键词：滤过泡渗漏巩膜瓣下修补术 tenon囊青光眼自体最佳矫正视力缝合固定

兔眼球后tenon囊下灌注Bevacizumab的眼内通透性研究

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国际眼科杂志 2015年第9期15卷 1525-1528页

作者：邬一楠周宏健吴国海易全勇中国浙江省宁波市眼科医院白内障青光眼科 315040 中国浙江省宁波市眼科医院白内障科 315040 中国浙江省宁波市眼科医院眼眶整形科 315040 中国浙江省宁波市眼科医院眼底病科 315040

目的:比较兔眼球后tenon囊下灌注和玻璃体腔注射bevacizumab后玻璃体和血清中的浓度,并观察bevacizumab视网膜荧光显影,探讨bevacizumab球后tenon囊下灌注的眼内通透性和眼外给药途径的可行性。方法:实验用健康成年新西兰兔20只,随机分... 详细信息

目的:比较兔眼球后tenon囊下灌注和玻璃体腔注射bevacizumab后玻璃体和血清中的浓度,并观察bevacizumab视网膜荧光显影,探讨bevacizumab球后tenon囊下灌注的眼内通透性和眼外给药途径的可行性。方法:实验用健康成年新西兰兔20只,随机分为A组和B组,A组均单眼接受单次玻璃体腔注射1.25mg bevacizumab(1.25mg/0.05m L),B组均单眼单次tenon囊下灌注5mg bevacizumab(5mg/0.2m L)。1、3d后抽取玻璃体和血液,使用双抗体夹心Elisa检测玻璃体和血清中bevacizumab药物浓度,比较两组中玻璃体和血清内bevacizumab浓度差异,并通过激光共聚焦观察视网膜免疫荧光。结果:给药1d后,A组和B组玻璃体腔内bevacizumab药物浓度分别为254.40±13.65、1.60±0.32μg/m L。A组和B组血清内bevacizumab药物浓度分别为0.55±0.15、0.63±0.05μg/m L,两组血清bevacizumab浓度比较差异无统计学意义(t=1.168,P=0.277)。给药3d后,A组和B组玻璃体腔内bevacizumab药物浓度分别为236.80±8.70、1.40±0.23μg/m L,A组和B组血清内bevacizumab药物浓度分别为0.66±0.17、0.64±0.14μg/m L,两组血清内bevacizumab浓度比较差异无统计学意义(t=0.207,P=0.841),两种给药方式视网膜各层荧光分布均能明显显现。结论:给药1、3d后玻璃体腔注药组在玻璃体腔内bevacizumab药物浓度要明显高于tenon囊下灌注组,玻璃体腔内注射是较为有效的给药途径,而球后tenon囊下灌注也能使bevacizumab进入玻璃体腔而且达到完全抑制VEGF活动所需的浓度(>500ng/m L),并能至少持续3d以上,两种给药方法在血清中均能检测到较高浓度的bevacizumab,且两者浓度差异无统计学意义(P>0.05),两种给药方式视网膜各层荧光分布均能明显显现,提示两种给药方式药物均能作用于视网膜各层。

关键词： Bevacizumab 兔眼玻璃体腔 tenon囊注射血