检索结果-南通市图书馆

2种定量PCR法与探针杂交法在检测重组白介素1受体拮抗剂中宿主DNA残留量的比较

药物分析杂志 2014年第1期34卷 140-145页

作者：李京敬郜尽韩伟上海交通大学药学院上海200240 交晨生物医药技术(上海)有限公司上海201210

目的：建立Taqman探针技术的定量PCR方法，对大肠杆菌***/BL21菌株生产的重组白介素1受体拮抗剂（rhIL^-1ra）中的残留宿主DNA进行了定量分析，并与SYBR Green法和地高辛探针杂交法进行比较。方法：以BioRad Chromo 4荧光定量PCR仪为平... 详细信息

目的：建立Taqman探针技术的定量PCR方法，对大肠杆菌***/BL21菌株生产的重组白介素1受体拮抗剂（rhIL^-1ra）中的残留宿主DNA进行了定量分析，并与SYBR Green法和地高辛探针杂交法进行比较。方法：以BioRad Chromo 4荧光定量PCR仪为平台，选择大肠杆菌23S核糖体RNA基因为靶基因，设计引物和Taqman探针，以纯化的宿主基因组DNA为标准品，对供试品中残留DNA进行定量。同时在重复性，精密度，检测限等方面与SYBR Green方法和地高辛探针杂交法进行比较。结果：本实验建立的Taqman探针法检测限为0.01 ng·mL^-1，在0.01～1000 ng·mL^-1区间同样具有良好的线性（r=0.997），回收率89.7%～136.0%。测定4批次供试品中残留DNA浓度为0.052、0.092、0.096、0.025 ng·mL^-1。结论：Taqman探针法与SYBR Green法检测灵敏度均达到0.01 ng·mL^-1，在重复性与精密度方面效果一致，且均优于探针杂交方法。

关键词：大肠杆菌定量PCR 宿主残留DNA 重组白介素1受体拮抗剂质量控制 taqmen探针

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：