检索结果-南通市图书馆

眼科研究 2008年第11期26卷 844-844页

作者：王志军解放军总医院眼科北京100853

笔者在参加研究生答辩、审稿和平时阅读文献的过程中注意到,在利用"细胞凋亡"的检查结果评价视网膜细胞损伤的试验中存在一些问题,这些问题集中在tunel方法的应用和阳性结果的质量控制上,从而影响论文质量,有必要再进行商榷。

关键词： tunel方法阳性结果质量控制控制问题细胞损伤检查结果细胞凋亡论文质量

多西他赛对结肠癌LoVo细胞增殖的抑制作用

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复旦学报（医学版） 2005年第2期32卷 182-184页

作者：关文明范钰郭学良林庚金钱立平李华河南省漯河市第二人民医院内科漯河462000 复旦大学附属华山医院消化科上海200040 复旦大学上海医学院病理学教研室上海200032

目的　探讨多西他赛治疗结肠癌的作用机制。方法　采用不同浓度的多西他赛处理结肠癌LoVo细胞后 ,应用四唑蓝比色试验检测细胞增殖 ,采用端粒重复扩增 -微孔板杂交法检测端粒酶活性 ,分别用琼脂糖凝胶电泳和tunel方法检测细胞凋亡 ,采... 详细信息

目的　探讨多西他赛治疗结肠癌的作用机制。方法　采用不同浓度的多西他赛处理结肠癌LoVo细胞后 ,应用四唑蓝比色试验检测细胞增殖 ,采用端粒重复扩增 -微孔板杂交法检测端粒酶活性 ,分别用琼脂糖凝胶电泳和tunel方法检测细胞凋亡 ,采用流式细胞仪测细胞周期。结果　多西他赛对结肠癌LoVo细胞增殖具有较强的抑制作用。多西他赛能够抑制端粒酶活性 ,可诱导结肠癌细胞凋亡 ,均呈浓度和时间依赖性。结论多西他赛抑制结肠癌细胞恶性增殖与抑制端粒酶活性、诱导凋亡及细胞周期阻滞有关。

关键词： LoVo细胞增殖抑制作用结肠癌多西他赛端粒酶活性 tunel方法琼脂糖凝胶电泳微孔板杂交法细胞恶性增殖细胞周期阻滞四唑蓝比色流式细胞仪癌细胞凋亡时间依赖性作用机制不同浓度诱导凋亡多烯检测

生存素基因表达与脑胶质瘤恶性增殖及凋亡关系的研究

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中华外科杂志 2005年第13期43卷 885-888页

作者：甄海宁章翔胡佩臻付洛安杨彤涛马福成王西玲梁景文第四军医大学西京医院全军神经外科研究所第四军医大学基础部病理学教研室唐都医院全军骨科中心

目的探讨凋亡蛋白抑制因子生存素(Survivin)基因在脑胶质瘤中的表达水平以及在脑胶质瘤恶性增殖和抗细胞凋亡中的作用。方法选择83例脑胶质瘤标本,采用免疫组化链霉卵白素生物素复合物(SABC)方法检测Survivin和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋... 详细信息

目的探讨凋亡蛋白抑制因子生存素(Survivin)基因在脑胶质瘤中的表达水平以及在脑胶质瘤恶性增殖和抗细胞凋亡中的作用。方法选择83例脑胶质瘤标本,采用免疫组化链霉卵白素生物素复合物(SABC)方法检测Survivin和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达,分别计算Survivin免疫反应评分(IRS)和增殖指数(PI);采用tunel方法检测脑胶质瘤凋亡细胞,计算凋亡指数(AI)。结果脑胶质瘤SurvivinIRS、PI及AI分别为3.8±3.9、(28.4±19.5)%和(1.0±0.8)%,三者均随脑胶质瘤病理级别的增高而升高(P均0.05),但AI与SurvivinIRS呈显著负相关(r=-0.307,P<0.01)。结论Survivin在脑胶质瘤中高表达,并在脑胶质瘤恶性增殖和抗细胞凋亡过程中发挥重要作用。

关键词：脑胶质瘤恶性增殖生存素 Survivin 增殖细胞核抗原(PCNA) 基因表达凋亡蛋白抑制因子 tunel方法抗细胞凋亡卵白素生物素 IRS 方法选择免疫组化增殖指数免疫反应凋亡细胞凋亡指数病理级别复合物 AI PI 正相关

血红素加氧酶-1抗急性血管排斥反应的作用研究

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上海医学 2005年第8期28卷 643-646页

作者：孙健乐钟文伟邵洁李云珠俞善昌夏振炜上海第二医科大学附属瑞金医院儿科 200025

目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)在异种心脏移植急性血管排斥反应中的作用。方法建立豚鼠到SD大鼠异位心脏移植模型,选用血红素分别诱导供体和受体,上调HO-1基因表达;眼睛毒蛇因子(CVF)、环孢素A抑制超急性排斥反应。采用免疫组织化学方... 详细信息

目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)在异种心脏移植急性血管排斥反应中的作用。方法建立豚鼠到SD大鼠异位心脏移植模型,选用血红素分别诱导供体和受体,上调HO-1基因表达;眼睛毒蛇因子(CVF)、环孢素A抑制超急性排斥反应。采用免疫组织化学方法检测心脏组织中HO-1的表达;流式细胞仪检测受体血清异种抗体Ig M的变化;免疫荧光方法观察异种抗体Ig M在血管内膜的沉积情况;tunel方法检测心脏组织细胞凋亡情况。结果HO-1表达上调后,能明显延长移植心脏的存活时间,抑制异种抗体表达,减少心肌细胞的凋亡。结论HO-1在异种心脏移植中具有抗急性血管排斥反应的作用,对移植器官起保护作用。

关键词：血红素加氧酶-1 异种移植凋亡急性血管排斥反应异种心脏移植免疫组织化学方法超急性排斥反应 tunel方法抗体IgM HO-1

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镉诱导OK细胞凋亡

卫生毒理学杂志 2001年第3期15卷 160-162页

作者：朱靳良沈汉明王俊南上海医科大学公共卫生学院预防医学教研室 200032 新加坡国立大学社区职业和家庭医学系

镉在人体的半衰期长达20～30年,长期职业或环境接触可导致镉在人体组织的大量蓄积.镉在肾脏的蓄积,会影响肾近曲小管的功能,表现为低分子量蛋白质、氨基酸、钙、葡萄糖、尿酸、磷酸盐和酶等从尿中大量排出,以及肾近曲小管的酸化[1,2].... 详细信息

镉在人体的半衰期长达20～30年,长期职业或环境接触可导致镉在人体组织的大量蓄积.镉在肾脏的蓄积,会影响肾近曲小管的功能,表现为低分子量蛋白质、氨基酸、钙、葡萄糖、尿酸、磷酸盐和酶等从尿中大量排出,以及肾近曲小管的酸化[1,2].这些损害已被大量研究所证实,同时开始从分子生物水平得到一定认识,镉致细胞凋亡就是其中一个方面.有研究表明镉在体外实验中可致人T细胞(T cellline)[3]、猪肾细胞(LLC-PK1 cells)[4]、转化人肾细胞(293cells)[5]发生凋亡,少量整体实验如大鼠肾近曲小管细胞发生凋亡[6].有些体外实验显示很低剂量的镉(10～20μmol/L)即可诱导细胞凋亡[4,5].凋亡是一种生理性的细胞死亡方式,具有特殊的生化和形态特征,许多哺乳动物细胞会发生凋亡[7].尽管凋亡可表现出很多特征性的细胞改变,如核固缩、DNA断片、特殊基因表达等,但是至今没有一项技术足以明确说明凋亡[8].末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记方法(TdT-mediated dUTP Nick-END Labelling,tunel)是一种凋亡检测方法,简单、精确、快速、无放射性,可在原位单个细胞水平或对细胞悬液进行检测.在该检测系统中,对凋亡细胞DNA断片用荧光标记,然后用荧光显微镜或流式细胞仪(flow cytometry)进行检测[8～10].本次实验使用tunel方法、DNA凝胶电泳和细胞形态改变来检测镉诱导的OK细胞(一种建立好的具有肾近曲小管特征的肾上皮细胞株)凋亡,以帮助进一步认识凋亡以及镉导致的肾近曲小管功能障碍.

关键词：镉凋亡 tunel方法 OK细胞 DNA琼脂糖凝胶电泳

新城疫病毒对体外培养人膀胱癌EJ细胞凋亡作用机制研究

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陕西医学杂志 2005年第5期34卷 521-524页

作者：唐省三马亚珍湖北省孝感学院生物系孝感432000

目的探讨新城疫病毒(NDV)对体外肿瘤细胞的抑制作用机制。方法以人膀胱癌EJ细胞株为靶细胞,观察NDV对人膀胱癌EJ细胞的作用。结果NDV病毒能作用于体外培养膀胱癌细胞,光镜下细胞的贴壁率和生存率显著下降,电镜下可见到凋亡典型形态结构,... 详细信息

目的探讨新城疫病毒(NDV)对体外肿瘤细胞的抑制作用机制。方法以人膀胱癌EJ细胞株为靶细胞,观察NDV对人膀胱癌EJ细胞的作用。结果NDV病毒能作用于体外培养膀胱癌细胞,光镜下细胞的贴壁率和生存率显著下降,电镜下可见到凋亡典型形态结构,tunel方法检测膀胱癌细胞有大量凋亡,新城疫病毒作用膀胱癌细胞24h凋亡细胞阳性指数(AI)为9.9%,48h凋亡细胞阳性指数(AI)为17.8%。免疫组化检测膀胱癌细胞有p53、bax、Fas、Fas-L及细胞因子TGFβ1表达增加而原癌基因bcl-2的表达降低从而诱导膀胱癌细胞凋亡。结论NDV病毒是一种有效抗肿瘤细胞的病毒,在体外具有明显的抑制肿瘤细胞作用。

关键词：新城疫病毒人膀胱癌体外培养机制研究凋亡作用原癌基因bcl-2 膀胱癌细胞 tunel方法体外肿瘤细胞免疫组化检测凋亡细胞 EJ细胞株癌细胞凋亡抗肿瘤细胞 NDV 作用机制形态结构病毒作用表达降低细胞因子细胞作用

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耳蜗半薄切片细胞凋亡检测

中华耳科学杂志 2005年第2期3卷 126-127页

作者：郭维杨仕明胡吟燕杨伟炎解放军总医耳鼻咽喉科研究所北京100853

目的尝试在耳蜗半薄切片上用tunel方法检测耳蜗组织的细胞凋亡。方法基因敲除Smad5小鼠耳蜗,分别作常规石蜡切片和环氧树脂包埋的半薄切片,用tunel方法检测耳蜗组织的细胞凋亡。结果在半薄切片上Smad5基因敲除小鼠,耳蜗内有大量的凋亡... 详细信息

目的尝试在耳蜗半薄切片上用tunel方法检测耳蜗组织的细胞凋亡。方法基因敲除Smad5小鼠耳蜗,分别作常规石蜡切片和环氧树脂包埋的半薄切片,用tunel方法检测耳蜗组织的细胞凋亡。结果在半薄切片上Smad5基因敲除小鼠,耳蜗内有大量的凋亡细胞产生,主要集中在螺旋神经节细胞、血管纹上的细胞,以及基底膜上的间皮细胞等,而且能够更清楚的显示凋亡的毛细胞。而在石蜡切片上只在螺旋神经节细胞、血管纹上的细胞,以及基底膜上的间皮细胞检出凋亡细胞,但是毛细胞没有凋亡细胞的检出。结论用tunel方法检测耳蜗组织的细胞凋亡半薄切片明显好于石蜡切片。

关键词：半薄切片凋亡检测 tunel方法螺旋神经节细胞 Smad5 细胞凋亡耳蜗组织环氧树脂包埋常规石蜡切片基因敲除小鼠凋亡细胞间皮细胞血管纹毛细胞膜上基底检出

FasL基因转染诱导类风湿关节炎患者滑膜细胞凋亡的实验研究

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中华风湿病学杂志 2005年第4期9卷 225-229,i002页

作者：林翊萍于清宏刘民培解放军第202医院风湿免疫科沈阳110003 沈阳军区总医院医学实验科

目的通过构建FasL重组质粒并转染原代培养的类风湿关节炎(RA)患者滑膜细胞,研究FasL基因对体外培养的RA滑膜细胞的凋亡诱导作用,寻找针对R A关节腔内基因治疗的有效靶基因。方法采用反转录-聚合酶链反应(R T-PCR)方法扩增FasL cD NA全... 详细信息

目的通过构建FasL重组质粒并转染原代培养的类风湿关节炎(RA)患者滑膜细胞,研究FasL基因对体外培养的RA滑膜细胞的凋亡诱导作用,寻找针对R A关节腔内基因治疗的有效靶基因。方法采用反转录-聚合酶链反应(R T-PCR)方法扩增FasL cD NA全长片段,经Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切,将FasL基因导入真核表达载体pcDN A3.1-neo;体外原代培养RA患者及正常人的滑膜细胞;脂质体包裹真核表达质粒pcD NA3.1-FasL及空质粒pcDN A3.1-neo,分别转染处于指数生长期的RA患者及正常人的滑膜细胞;经G418筛选,采用形态学、tunel法及AnnexinⅤ/碘化丙啶(PI)染色等方法检测各组滑膜细胞的凋亡情况。结果FasL基因原核及真核重组质粒载体顺利构建,基因序列检测结果与国外报道完全一致;RA患者及正常人的滑膜细胞原代培养、传代顺利完成;RA患者滑膜细胞转染FasL重组质粒(rhFasL)15h后,光镜下可见大量细胞体积缩小、扭曲、变形,胞核中出现颗粒样物质,少数细胞脱落底壁,G418筛选2周后仅有1￣2个/低倍视野细胞存活,且生长相对静止;RA患者滑膜细胞在转染空质粒及正常人滑膜细胞在转染pcDNA3.1-FasL及空质粒后仅有少数细胞变形、反光度下降,很少脱离底壁,G418筛选2￣4周后细胞再次生长并形成克隆;经tunel方法检测可见大量转染rhFasL的RA滑膜细胞的?

关键词：基因转染滑膜细胞凋亡关节炎患者实验研究反转录-聚合酶链反应 Annexin FasL基因 tunel方法流式细胞仪检测 RA患者类风湿关节炎凋亡诱导作用真核表达载体真核表达质粒体外原代培养 tunel法细胞原代培养重组质粒

苏拉明抑制Lewis肺癌增殖和转移的实验研究

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世界肿瘤杂志 2005年第1期4卷 27-29页

作者：陈真胡永伟上海市杨浦区山东医院病理科，上海200438

目的研究苏拉明抑制Lewis肺癌细胞增殖和转移的机制。方法24只荷瘤小鼠，分为两组，分别在荷瘤小鼠腹腔内注射生理盐水(对照组)或苏拉明，每天15mg／kg(苏拉明组)。持续2wk后测量肿瘤体积，通过免疫组化二步法检测血管内皮细胞的八因... 详细信息

目的研究苏拉明抑制Lewis肺癌细胞增殖和转移的机制。方法24只荷瘤小鼠，分为两组，分别在荷瘤小鼠腹腔内注射生理盐水(对照组)或苏拉明，每天15mg／kg(苏拉明组)。持续2wk后测量肿瘤体积，通过免疫组化二步法检测血管内皮细胞的八因子抗原，标示微血管后计算微血管密度(MVD)，以tunel方法检测凋亡指数(AI)。结果治疗2wk后对照组、苏拉明组的瘤体积分别为(3820±593)mm^3、(427±61)mm^3。(P<0．05)，苏拉明的抑瘤率为88．8％；MVD分别为(9．9±1．6)个／HP、(1．5±0．5)个／HP(P<0．05)；肺转移数分别为(8．0±1.4)个、(1．3±2．0)个、(P<0．05)：A1分别为(0．2±0.4)％、(6．0±0．89)％(P<0．05)。对照组小鼠平均生存期为(32．00±1．13)d；苏拉明治疗组的平均生存期为(35．17±1．25)d，较对照组延长(P<0．05)。结论苏拉明通过抑制血管生成引起肿瘤细胞的凋亡，具有很强的抑制肿瘤增殖和转移的作用。

关键词：苏拉明 Lewis肺癌实验研究微血管密度(MVD) 免疫组化二步法 tunel方法平均生存期肺癌细胞增殖血管内皮细胞抑制血管生成荷瘤小鼠腹腔内注射对照组生理盐水肿瘤体积凋亡指数肿瘤细胞肿瘤增殖八因子抑瘤率

维普期刊数据库评论

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采用tunel检测人精子凋亡及其初步应用

江苏医药 2008年第1期34卷 91-91页

作者：王雪松张才田胡雪玲崔毓桂南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心南京市中医院检验科

在不育、职业性毒物接触和吸烟男性均发现精子凋亡增多。目前，国外报道的精子凋亡检测方法主要有精子染色体结构检查（SCSA）、TdT介导缺口末端原位标记法（tunel）、吖啶橙染色（AOT）、彗星实验等。我们应用二氨基联苯胺（DAB）显色T... 详细信息

在不育、职业性毒物接触和吸烟男性均发现精子凋亡增多。目前，国外报道的精子凋亡检测方法主要有精子染色体结构检查（SCSA）、TdT介导缺口末端原位标记法（tunel）、吖啶橙染色（AOT）、彗星实验等。我们应用二氨基联苯胺（DAB）显色tunel方法检测精子凋亡，探讨其在精子凋亡临床和基础研究中的应用。

关键词： tunel检测人精子凋亡 tunel方法二氨基联苯胺染色体结构原位标记法 TdT介导吖啶橙染色