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抗微管类、铂类药物对人淋巴瘤细胞系体外敏感性实验及tubb3、ERCC1表达的相关性分析

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西安交通大学学报（医学版） 2012年第5期33卷 539-543,575页

作者：陈昱丞张明智张旭东周超锋陈新峰岳光星杨黎盛誉乔郑州大学第一附属医院肿瘤科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室河南郑州450052

目的探讨4种淋巴瘤细胞系(SNK-6、HUT-78、DoHH2、YTS)对8种抗微管类、铂类药物的敏感性与3型β-微管蛋白基因(tubb3)、切除修复交叉互补基因1(ERCC1)表达水平的关系,为淋巴瘤个体化治疗的靶标检测提供理论依据。方法采用CCK-8实验检测... 详细信息

目的探讨4种淋巴瘤细胞系(SNK-6、HUT-78、DoHH2、YTS)对8种抗微管类、铂类药物的敏感性与3型β-微管蛋白基因(tubb3)、切除修复交叉互补基因1(ERCC1)表达水平的关系,为淋巴瘤个体化治疗的靶标检测提供理论依据。方法采用CCK-8实验检测4种细胞系对多西他赛(TXT)、长春瑞滨(NVB)、长春新碱(VCR)、紫杉醇(TAX)以及洛铂(LB)、顺铂(DDP)、奥沙利铂(OXA)、卡铂(CBP)的体外敏感性;采用半定量PCR(RT-PCR)及实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测tubb3、ERCC1基础表达水平以及长春新碱、卡铂作用后mRNA的表达水平。结果不同细胞系tubb3、ERCC1基础表达水平存在较大变异。相关性分析表明,4种细胞系对长春新碱的敏感性与tubb3表达呈正相关(r=0.598,P=0.039),对卡铂的敏感性与ERCC1表达呈负相关(r=-0.789,P=0.002),对其余药物的敏感性与所检基因表达水平无关(P>0.05)。经长春新碱作用后tubb3表达显著下调(P0.05)。结论 tubb3高水平表达的细胞系对长春新碱相对敏感;ERCC1低水平表达的细胞系对卡铂相对敏感。tubb3、ERCC1的表达可能与淋巴瘤的疗效相关而应用于淋巴瘤个体化治疗的靶标检测。

关键词：淋巴瘤敏感性 tubb3 ERCC1 基因表达铂类药抗微管类药

tubb3的表达对晚期胃癌紫杉类药物化疗疗效和预后的影响

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中国肿瘤临床 2017年第24期44卷 1248-1252页

作者：刘新福尹婵张辉刘腾飞邵阳市中心医院肿瘤科湖南省邵阳市422000 南方医科大学南方医院病理科

目的:检测晚期胃癌组织中β-微管蛋白Ⅲ(classⅢβ-tubulin,tubb3)的表达,分析tubb3的表达与紫杉类药物化疗疗效及患者预后的相关性。方法:选取邵阳市中心医院2008年12月至2011年12月接受含多西他赛或紫杉醇为基础化疗的晚期胃癌患者49... 详细信息

目的:检测晚期胃癌组织中β-微管蛋白Ⅲ(classⅢβ-tubulin,tubb3)的表达,分析tubb3的表达与紫杉类药物化疗疗效及患者预后的相关性。方法:选取邵阳市中心医院2008年12月至2011年12月接受含多西他赛或紫杉醇为基础化疗的晚期胃癌患者49例,免疫组织化学检测胃癌组织中tubb3蛋白的表达水平,分析tubb3的表达与化疗疗效、无进展生存期(progressionfree survival,PFS)和总生存期(overall survival,OS)的关系。结果:49例患者接受含多西他赛或紫杉醇为基础的化疗,有3例患者因组织标本太少被剔除,化疗疗效达完全缓解(complete response,CR)1例、部分缓解(partial response,PR)17例、稳定(stable disease,SD)22例、进展(progression disease,PD)6例,化疗总有效率(CR+PR)为39.13%(18/46),tubb3低表达组有效率为54.17%,tubb3高表达组有效率为22.73%,两者比较差异具有统计学意义(χ2=4.736,P=0.029)。tubb3低表达组患者的中位PFS和OS分别为5.9个月和11.6个月,tubb3高表达组患者的中位PFS和OS分别为3.9个月和7.9个月,tubb3低表达组较高表达组的PFS和OS均延长,差异有统计学意义(PFS:P=0.032;OS:P=0.001)。单因素及多因素分析得出,tubb3均为晚期胃癌的独立预后因素。结论:晚期胃癌组织中tubb3的表达与紫杉类药物化疗疗效及预后具有相关性,低表达组的化疗疗效及生存预后好于高表达组。可为临床上晚期胃癌个体化治疗的制定及判断预后提供参考。

关键词：胃肿瘤 tubb3 化学治疗免疫组织化学

晚期胃癌患者ERCC1 tubb3 TYMS三基因联合检测指导的DCF方案个体化化疗的研究

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中国肿瘤临床 2012年第22期29卷 1787-1791页

作者：骆玉霜格日力沈存芳祁玉娟王莉毛志成青海大学附属医院肿瘤内科西宁市810001 青海大学医学院高原病研究中心

目的:根据ERCC1、tubb3、TYMS基因mRNA表达水平选择Docetaxel、DDP、5-FU组成相应的化疗方案对晚期胃癌进行化疗的疗效、不良反应及生存期评价。方法:前瞻性纳入于本院2009年5月至2012年5月初治的晚期胃癌的患者120例,随机分为二组:研究... 详细信息

目的:根据ERCC1、tubb3、TYMS基因mRNA表达水平选择Docetaxel、DDP、5-FU组成相应的化疗方案对晚期胃癌进行化疗的疗效、不良反应及生存期评价。方法:前瞻性纳入于本院2009年5月至2012年5月初治的晚期胃癌的患者120例,随机分为二组:研究组(60例):采用分支DNA-液相芯片技术定量检测胃癌组织ERCC1、tubb3、TYMS基因mRNA表达水平,并根据检测结果,选择药物Docetaxel、DDP、5-FU组成相应敏感的化疗方案对其进行化疗;对照组(60例):予以DCF方案化疗,观察两组疗效、不良反应,中位疾病进展时间(mTTP)及中位生存时间(mOS)。结果:研究组、对照组化疗有效率分别为55%、50%,差异无统计学意义(P=0.357)。两组mTTP分别为10个月和7个月,差异无统计学意义(P=0.091)。两组mOS为13.7个月和11.6个月,差异有统计学意义(P=0.004)。两组间不良反应相似,但对照组不良反应Ⅲ°～Ⅳ°明显高于研究组,差异有统计学意义(Ptubb3、TYMS基因mRNA表达水平检测结果选择药物Docetaxel、DDP、5-FU组成相应敏感的化疗方案进行化疗,疗效非劣性、不良反应降低,且改善mOS。

关键词：晚期胃癌 ERCC1 tubb3 TYMS 个体化化疗

肾母细胞瘤中ERCC1、tubb3、TOP2A mRNA的表达及临床意义

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西安交通大学学报（医学版） 2016年第5期37卷 689-692页

作者：潘伟康余辉王怀杰郑百俊郭青青郭正团高亚李鹏西安交通大学第二附属医院小儿外科陕西西安710004 西安交通大学医学部陕西西安710061

目的探讨核苷酸切除修复交叉互补基因(excision repair cross complementation 1,ERCC1)、3型β微管蛋白编码基因(ClassⅢβ-tubulin,tubb3)和DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoisomeraseⅡA,TOP2A)mRNA在小儿肾母细胞瘤组织中的表达及临床意义。方法收集18例肾母细胞瘤组织标本及14例癌旁组织标本,通过分支-DNA液相芯片法检测标本中ERCC1、tubb3、TOP2A mRNA的表达水平,并分析上述基因表达与肾母细胞瘤临床病理的关系。结果肾母细胞瘤组织中ERCC1、tubb3和TOP2A高表达率分别为44.4%、50.0%和66.7%,均显著高于癌旁组织的7.1%、7.1%和14.3%,差异有统计学意义(Ptubb3和TOP2A mRNA表达高于癌旁组织,可能参与肾母细胞瘤的发生发展过程。

关键词：肾母细胞瘤 ERCC1 tubb3 TOP2A

食管鳞癌患者ERCC1、TYMS、tubb3的表达特征及其与化疗效果的相关性分析

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基因组学与应用生物学 2016年第11期35卷 2941-2945页

作者：杨立伟韩青松栾艳超李志锋杜华贞河北医科大学第四医院石家庄050011 河北省胸科医院石家庄050011

探讨食管鳞癌患者ERCC1、TYMS、tubb3的表达特征，以及其与化疗效果的相关性。选择2013年8月～2014年8月我科收治的食管癌患者78例，于术后采用液相芯片技术对食管癌组织ERCC1、TYMS、tubb3基因mRNA表达水平进行检测，所有患者均按指南... 详细信息

探讨食管鳞癌患者ERCC1、TYMS、tubb3的表达特征，以及其与化疗效果的相关性。选择2013年8月～2014年8月我科收治的食管癌患者78例，于术后采用液相芯片技术对食管癌组织ERCC1、TYMS、tubb3基因mRNA表达水平进行检测，所有患者均按指南所载方案进行化疗，并统计患者1年复发情况。ERCC1、TYMS、tubb3表达阳性表达率分别为48．7％、70．5％、61．5％，ERCC1表达阳性率与年龄，TNM分期、组织分化程度等因素有关，tubb3表达阳性率与性别有关，发病部位为食管上段的患者TYMS表达阳性率更高，差异均具有统计学差异。TYMS与tubb3呈现出弱相关性，ERCC1表达与TYMS、tubb3与均无相关性。2或3项基因阳性患者1年复发率显著高于0或1项基因阳性患者，分别为29．8％、9．7％。食管鳞癌患者ERCC1、TYMS、tubb3表达具有特定的临床特征，高表达与复发率增加有关。

关键词：食管鳞癌 ERCC1 TYMS tubb3 化疗

tubb3、ERCC1和P-gp在卵巢癌中的表达及其临床意义

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TUBB3、ERCC1和P-gp在卵巢癌中的表达及其临床意义

作者：张静承德医学院

学位级别：硕士

卵巢癌(ovarian cancer,OC)是妇科常见的恶性肿瘤之一，在我国卵巢癌的发病率有上升趋势，居妇科肿瘤的第二位[1]，同时年龄趋于年轻化。卵巢癌发病较隐匿，大多数确诊时已属中晚期，五年生存率虽然逐渐升高，但是至今仍不到50%，可见... 详细信息

卵巢癌(ovarian cancer,OC)是妇科常见的恶性肿瘤之一，在我国卵巢癌的发病率有上升趋势，居妇科肿瘤的第二位[1]，同时年龄趋于年轻化。卵巢癌发病较隐匿，大多数确诊时已属中晚期，五年生存率虽然逐渐升高，但是至今仍不到50%，可见卵巢癌是严重威胁女性健康的重大疾病之一。目前卵巢癌的治疗有手术、化疗及放疗等方法，而化疗在治疗卵巢癌中占有重要的地位。导致化疗失败并引起患者肿瘤复发、进展及死亡的主要原因是肿瘤细胞对化疗药物产生的多药耐药（multidrugresistance，MDR)。由多种基因、多因素和多步骤的复杂过程产生肿瘤耐药，而P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）是多药耐药基因MDR1编码产物，产生多药耐药性的主要原因是P-gp高表达，而P-gp耐药机制是在临床实践中唯一得到证实的，解决此障碍，肿瘤化疗效果将取得突破性进展。治疗卵巢癌标准的化疗方案是紫杉类联合铂类，部分患者对紫杉类及铂类药物不敏感，效果不佳，如果卵巢癌患者对紫杉类、铂类药物敏感性好，有利于提高化疗有效率和延长患者生存期使之受益。因此探寻对铂类和紫杉类化疗敏感性的预测因子对指导临床合理用药非常重要。tubb3（class III beta-tubulin，β-微管蛋白III型)是细胞骨架的重要组成部分，在多种真核细胞和部分原核细胞中存在，能够维持细胞形态结构和参与细胞运动，还在细胞的生长、分裂、凋亡和信息传导中起着重要作用，而紫杉类药物可特异性的与β微管蛋白III结合可阻滞其解聚，阻止有丝分裂的完成，从而引起细胞凋亡达到杀灭肿瘤的作用。有研究表明tubb3与紫杉类等抗微管类化疗药物的耐药密切相关，其高表达可以使紫杉类药物降低对微管蛋白的解聚，从而导致其耐药。核苷酸切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementinggroup1，ERCC1)具有识别DNA损伤和链间切割的功能，是核苷酸剪切修复过程中最关键的一个内切酶，其过表达可使肿瘤细胞停滞在G2/M期，能够迅速修复损伤的DNA，引起对铂类药物耐药。P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）是ATP依赖性跨膜蛋白，不仅可能量依赖性地将药物泵出细胞外，还能阻止化疗药物进入到细胞内从而减少细胞内的药物浓度;此外还可对细胞内的药物分布发生改变，把部分药物都聚集在不能产生自身作用的细胞器中，使药物达不到疗效，从而导致耐药。目的:通过检测tubb3、ERCC1和P-gp在卵巢癌组织及正常卵巢组织中的表达，分析三者分别与卵巢癌患者相关临床病理因素之间的关系;探讨tubb3、ERCC1和P-gp在卵巢癌中表达的相关性，预测卵巢癌患者对药物的敏感性及制定个体化治疗方案提供依据。方法：收集手术切除并经术后病理确诊的卵巢癌组织50例和正常卵巢组织(双附件无病理情况子宫肌瘤患者的手术切除卵巢为正常对照组)25例病理蜡块，将筛选出的50例卵巢癌患者的完整病例资料进行整理，术前均未接受化疗、放疗、生物免疫治疗。用免疫组织化学法Envision两步法检测tubb3、ERCC1、P-gp在卵巢癌组织中的表达，分析其与患者年龄、组织学类型、病理分级、临床分期、肿瘤发生部位之间的关系;应用SPSS17.0统计软件处理数据，计数资料采用2检验，相关性采用Spearman相关分析，均以α=0.05作为检验标准，P＜0.05为差异有统计学意义。结果：免疫组织化学结果***3和ERCC1、P-gp在卵巢癌组织和正常卵巢组织中均有表达，tubb3阳性表达定位于细胞浆，在卵巢癌组织表达阳性率为52.0%（26/50），正常卵巢组织中的阳性率表达为24.0%（6/25），显著高于正常卵巢组织中表达，差异有统计学意义（2=7.038，P=0.008）;ERCC1阳性表达定位于细胞核，在卵巢癌组织中表达阳性率为70.0%（35/50），正常卵巢组织中的阳性率表达为32.0%（8/25），卵巢癌组显著高于正常卵巢组，差异有统计学意义（2=9.420，P=0.002）;P-gp定位于细胞质或细胞膜中，在卵巢癌组织表达阳性率为85.0%（42/50)，正常卵巢组织中的阳性率表达为40.0%（10/25)，卵巢癌组显著高于正常卵巢组，差异有统计学意义（2=15.176，P=0.000）;2.在蛋白质水平上卵巢癌组织中tubb3、ERCC1和P-gp的表达与病理分级及临床分期有关（均P3.在卵巢癌组织中tubb3和ERCC1的表达有相关

关键词：卵巢癌抗微管 DNA 修复 ATP 结合匣式转运子 tubb3 ERCC1 P-gp 药物耐药性预后

tubb3、TS、ERCC1 mRNA表达水平对晚期胃癌化疗疗效和预后的影响

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TUBB3、TS、ERCC1 mRNA表达水平对晚期胃癌化疗疗效和预后的影响

作者：胡华斌中南大学

学位级别：硕士

目的：探讨胃癌组织中tubb3、TS、ERCC1mRNA表达水平对接受DCF方案化疗的晚期胃癌患者化疗疗效和预后的影响。方法：本研究共入组48例晚期胃癌患者,所有患者均接受DCF方案(多西他赛/顺铂/5-氟尿嘧啶)姑息化疗。采用分支DNA液相芯片技... 详细信息

目的：探讨胃癌组织中tubb3、TS、ERCC1mRNA表达水平对接受DCF方案化疗的晚期胃癌患者化疗疗效和预后的影响。方法：本研究共入组48例晚期胃癌患者,所有患者均接受DCF方案(多西他赛/顺铂/5-氟尿嘧啶)姑息化疗。采用分支DNA液相芯片技术对患者胃癌组织中tubb3、TS、ERCC1mRNA表达情况进行检测。结果： 1. tubb3mRNA低表达患者的化疗缓解率要显著高于高表达患者(P=0.011)。而TS和ERCC1表达水平与缓解率无显著性相关。 2. tubb3mRNA低表达患者的中位疾病进展时间(TTP)和中位总生存期(OS)均显著优于高表达患者(P=0.002;P3、TS、ERCC1中有0或1个基因高表达的患者在化疗缓解率、TTP和OS方面均要优于有2或3个基因高表达的患者(P=0.001;Ptubb3高表达是影响OS的独立不良预后因素(HR=2.34,P=0.036)。结论： 1、tubb3mRNA高表达可能与DCF方案耐药相关,tubb3可作为接受以TXT为基础化疗的晚期胃癌患者的疗效和预后预测指标。 2、tubb3、TS和ERCC1mRNA表达的联合检测有助于晚期胃癌患者的个体化治疗。

关键词：晚期胃癌 tubb3 TS ERCC1 药物治疗

tubb3在体外化疗药物敏感试验肝细胞癌标本中的表达及意义

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广东医学 2012年第18期33卷 2750-2753页

作者：郭智兴林佳锐陈智远韦玮郭荣平中山大学肿瘤防治中心、华南肿瘤学国家重点实验室肝胆科广州510060

目的探讨体外药敏试验在肝细胞癌(HCC)个体化化疗的应用以及tubb3在HCC中的表达及意义。方法应用组织培养药敏试验检测100例手术切除HCC组织的化疗药物敏感性,并通过免疫组化法检测100例HCC组织、配对癌旁组织和10例正常肝组织中tubb3... 详细信息

目的探讨体外药敏试验在肝细胞癌(HCC)个体化化疗的应用以及tubb3在HCC中的表达及意义。方法应用组织培养药敏试验检测100例手术切除HCC组织的化疗药物敏感性,并通过免疫组化法检测100例HCC组织、配对癌旁组织和10例正常肝组织中tubb3的表达。结果 HCC组织对化疗药物敏感率由高到低为紫杉醇、伊立替康、丝裂霉素、亚砷酸、卡铂、氟脲苷、表柔比星、奥沙利铂和吉西他滨;tubb3在HCC组织中的表达水平明显高于癌旁组织和正常肝组织,在肿瘤直径>6 cm(P=0.025)、多发肿瘤(P=0.042)和TNMⅢ期(P=0.012)中表达较高,是术后总生存的危险因素(P=0.032);tubb3表达与紫杉醇耐药(r=0.321,P=0.001)和丝裂霉素耐药(r=0.215,P=0.033)呈正相关。结论组织培养药敏试验法可作为HCC患者个体化化疗药物筛选的手段,tubb3可作为化疗药物疗效评价和肿瘤侵袭性的生物标记。

关键词：肝细胞癌组织培养药敏试验 tubb3

tubb3、STMN1与BRCA1的表达水平与胃癌治疗药物的关联性及机制研究

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TUBB3、STMN1与BRCA1的表达水平与胃癌治疗药物的关联性及机制研究

作者：廖巧蚌埠医学院

学位级别：硕士

目的:探讨3型β微管蛋白(Tubulin beta 3,tubb3)、微管不稳定性蛋白(Stathmin1,STMN1)、腺癌癌易感基因(Breast cancer 1,BRCA1)在胃癌和癌旁组织中的表达,分析其与临床病理参数的相关性;探讨参芪扶正注射液(shenqifuzheng injection,S... 详细信息

目的:探讨3型β微管蛋白(Tubulin beta 3,tubb3)、微管不稳定性蛋白(Stathmin1,STMN1)、腺癌癌易感基因(Breast cancer 1,BRCA1)在胃癌和癌旁组织中的表达,分析其与临床病理参数的相关性;探讨参芪扶正注射液(shenqifuzheng injection,SFI)和多西他赛(docetaxel,TXT)对胃癌BGC-823细胞系的影响及作用机制。方法:(1)免疫组织化学Elivision法检测54例胃癌组织和20例的相应癌旁组织中tubb3、STMN1与BRCA1蛋白表达,分析其相关性。(2)CCK8法检测不同浓度SFI(5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml、40mg/ml、80mg/ml)、不同浓度TXT(3.75mg/L、7.5mg/L、15mg/L、30mg/L、60mg/L)及7.5m g/L TXT联合不同浓度SFI(5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml、40mg/ml、80mg/ml)作用不同时间(24h、48h及72h)对BGC-823细胞增殖的影响。(3)不同浓度SFI(5mg/ml、20mg/ml、80mg/ml)、不同浓度TXT(3.75mg/L、15mg/L、60mg/L)及7.5mg/L TXT联合不同浓度SFI(5mg/ml、20mg/ml、80mg/ml)作用于BGC-823细胞48h后,流式细胞仪检测细胞周期的变化。(4)逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测胃癌细胞对照组和加药组中tubb3m RNA、STMN1m RNA、BRCA1m RNA基因的表达。结果:(1)54例胃癌组织和20例相应癌旁组织中BRCA1、STMN1和tubb3蛋白的阳性表达率胃癌组织高于癌旁组织;胃癌中STMN1蛋白与胃癌患者病理的分化程度有关,而BRCA1与tubb3蛋白与胃癌患者的临床病理特征无相关性;其中只有STMN1和tubb3蛋白在胃癌组织中的表达有一定的相关性(r=0.276,P3细胞的增殖,随着药物浓度的升高,作用时间的延长,BGC-823细胞增殖抑制率逐渐增大,与阴性对照组比较有统计学意义(P均0.05)。(3)不同浓度的多西他赛或参芪扶正注射液抑制细胞增殖阻滞细胞于G2/M或S期,与对照组比较均有统计学意义(P均tubb3与STMN1m RNA的表达量均低于对照组,差异有统计学意义(P均0.05)。结论:(1)胃癌中STMN1蛋白提示可能参与胃癌的发生、发展过程;而BRCA1与tubb3蛋白可能只与胃癌的发生有关系。(2)STMN1基因可能成为胃癌的分子标志物,为高危人群的早期筛查、胃癌患者的治疗、随访提供新的实验依据。

关键词：参芪扶正注射液多西他赛 BGC-823细胞系增殖周期 tubb3 STMN1 BRCA1