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Cloning,Expressing,and Hemolysis of tdh,trh and tlh Genes of Vibrio parahaemolyticus

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Journal of Ocean University of China 2011年第3期10卷 275-279页

作者： ZHAO Yonggang TANG Xiaoqian ZHAN Wenbin Key Laboratory of Mariculture Ministry of Education Ocean University of China Qingdao 266003 P. R. China China Animal Health and Epidemiology Center Qingdao 266032 P. R. China

Vibrio parahaemolyticus (VP) is one of the pathogenic vibrios endangering net-cage cultured Pseudosciaena crocea,Fennerpenaeus chinensis, and shellfish in coastal areas of China. Several types of hemolysins produced by Vp have been characterized as major virulence *** are thermostable direct hemolysin (TDH),TDH-related hemolysin (trh) and thermolabile hemolysin (TLH). In this study, we cloned tdh, trh, and tlh genes from the genome DNA of VP by polymerase chain reaction (PCR).We ligated the three genes into prokaryotic expression vector pET-28a (+),and transformed the recombinant plasmids into Es-cherichia coli BL21 (DE3). The expression of recombinant proteins was induced by isopropyl-β-D-thiogalacto-pyranoside (IPTG). The recombinant proteins were expressed in a form of inclusion bodies and thus purified with Ni-NTA affinity chromatography. Western blotting results showed that recombinant proteins,TDH, trh and TLH, could be recognized by rabbit anti-VP serum. The three purified proteins were renatured by gradient *** renatured proteins exhibited hemolytic activity except for TLH in the presence of phosphatidylcholine. These results not only are helpful for better understanding these genes' functions under a single factor level, but also provide evidence for VP vaccine engineering.

关键词：副溶血性弧菌基因克隆 TDH trh H基因重组蛋白中国沿海地区基因组DNA

EFFECTS OF MICROINJECTION OF trh AND MORPHINE INTO UNILATERAL SEPTAL NEULEUS ON PAIN THRESHOLD AND ELECTROACUPUNCTURE ANALGESIA IN RATS

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针刺研究 1989年第Z1期 185-186页

作者： Tu Zongping Zhang Zidong Zhu Zixiang Department of Physiology, Tongji Medical University

This article was to study how trh receptors in the septal nuclei work inthe analgesic effect and EA analgesia.58 S.D rats were implanted with stainless steel guide tubes into the bilat- eral septal nuclei to provide microinjection, injecting speed 1μl/ 2min. "Zusanli"and "Sanyinjiao" were stimulated bilaterally for ten min, EA parameters were2--15Hz, 2v electric pulses. Using radiant heat teil flick method at 5minintervals for 50min, pain threshold (tail flick latency, TFL) was measured asnociceptive index. The results were as follows:

关键词： trh EA EFFECTS OF MICROINJECTION OF trh AND MORPHINE INTO UNILATERAL SEPTAL NEULEUS ON PAIN THRESHOLD AND ELECTROACUPUNCTURE ANALGESIA IN RATS TFL RATS

大鼠下丘脑微量注射trh对心功能的作用及其机制

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中国应用生理学杂志 2006年第3期22卷 317-321页

作者：徐畅安书成慈蕾陕西师范大学生命科学学院陕西西安710062

目的:探讨下丘脑促甲状腺激素释放激素(trh)对心功能活动的调节作用及其作用机制。方法:在SD大鼠下丘脑促垂体区埋管,微量注射trh或预先注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME及M型乙酰胆碱受体阻断剂阿托品,记录给药前后左心室内压峰值(LVSP)... 详细信息

目的:探讨下丘脑促甲状腺激素释放激素(trh)对心功能活动的调节作用及其作用机制。方法:在SD大鼠下丘脑促垂体区埋管,微量注射trh或预先注射一氧化氮合酶抑制剂L-NAME及M型乙酰胆碱受体阻断剂阿托品,记录给药前后左心室内压峰值(LVSP)、心率(HR)、室内压瞬时上升速率峰值(dp/dtmax)和瞬时下降速率峰值(-dp/dtmax)。结果:①与对照组相比,下丘脑促垂体区注射trh可引起LVSP、HR、dp/dtmax及-dp/dtmax显著升高(Ptrh引起的正向调节效应。③单独注射阿托品引起LVSP及dp/dtmax的显著升高(Ptrh加快心率和提高-dp/dtmax的效应。结论:①下丘脑trh对心脏有正性变时、变力作用。②下丘脑内源性NO能降低LVSP,但对HR、dp/dtmax及-dp/dtmax无明显影响,trh的作用是经NO依赖通路的。③下丘脑内源性胆碱能递质对心脏有正性变时但负性变力的作用,下丘脑trh调节心功能可能部分通过胆碱能M受体通路。

关键词：下丘脑心功能 trh NO 阿托品

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trh在神经精神疾病和休克中的应用

中华内分泌代谢杂志 1990年第2期6卷 105-107页

作者：王国良上海长征医院脑外科

促甲状腺激素释放激素(trh)能有效地促进垂体前叶TSH的释放。临床上常用trh兴奋试验来诊断和评价下丘脑-垂体-甲状腺轴的功能状况。近十几年来,随着放射免疫测定和免疫组织化学技术的发展,人们发现trh不仅存在于下丘脑中,而且还广泛分... 详细信息

促甲状腺激素释放激素(trh)能有效地促进垂体前叶TSH的释放。临床上常用trh兴奋试验来诊断和评价下丘脑-垂体-甲状腺轴的功能状况。近十几年来,随着放射免疫测定和免疫组织化学技术的发展,人们发现trh不仅存在于下丘脑中,而且还广泛分布于下丘脑以外的中枢神经系统中。大量实验研究表明,trh除其内分泌作用外,还具有广泛的中枢活性效应。有关trh的分布特点及其生理作用已有详细的描述。本文就trh在神经精神疾病和休克中的应用研究进展作一综述。

关键词： trh 神经疾病精神疾病休克

阻断缰核对伏核注射trh抑制丘脑束旁核痛放电的影响

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同济医科大学学报 1991年第6期20卷 378-381页

作者：乜治国刘祚延李本农张自东同济医科大学基础医学部生理学教研室

用细胞外记录神经元单位放电和核团微量注射法,观察了阻断缰核对伏核注射促甲状腺素释放激素(trh)抑制大鼠丘脑束旁核痛兴奋性神经元(PEN)痛放电的影响。结果表明,向缰核分别预先注射2％利多卡因(0.5μl)、氟哌啶醇(2.5μg/μl)均可明... 详细信息

用细胞外记录神经元单位放电和核团微量注射法,观察了阻断缰核对伏核注射促甲状腺素释放激素(trh)抑制大鼠丘脑束旁核痛兴奋性神经元(PEN)痛放电的影响。结果表明,向缰核分别预先注射2％利多卡因(0.5μl)、氟哌啶醇(2.5μg/μl)均可明显减弱伏核注射trh对束旁核PEN痛放电的抑制作用。而在缰核内分别预先注射纳洛酮(5μg/μl)、阿托品(10μg/μl)则不影响伏核注射trh抑制束旁核PEN痛放电的作用。以上结果提示,缰核是伏核下行性抑制的一个中继站,trh在伏核的抗伤害性感受作用可能下行通过缰核内的多巴胺能神经元完成。

关键词：伏核缰核痛兴奋神经元 trh

trh与补中益气汤合用对应激小鼠NK活性及内分泌的影响

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中国中西医结合杂志 1994年第2期14卷 104-105页

作者：汤斌吴敏毓皖南医学院免疫研究室广东医学院微生物教研室

本研究促甲状腺激素释放激素（ＴＲＨ）与补中益气汤合用对手术应激小鼠脾脏自然杀伤（ＮＫ）细胞活性及下丘脑—垂体—甲状腺轴激素的影响。小鼠预先应用ＴＲＨ（０．２μｇ／只·ｄ，腹腔注射）和补中益气汤（０．２ｇ／·ｄ，灌服）... 详细信息

本研究促甲状腺激素释放激素（ＴＲＨ）与补中益气汤合用对手术应激小鼠脾脏自然杀伤（ＮＫ）细胞活性及下丘脑—垂体—甲状腺轴激素的影响。小鼠预先应用ＴＲＨ（０．２μｇ／只·ｄ，腹腔注射）和补中益气汤（０．２ｇ／·ｄ，灌服）共３天，末次用药后１ｈ行截肢术，术后２４ｈ取标本检测。发现两药联用，能使下丘脑—垂体—甲状腺轴激素趋于正常水平，并拮抗手术应激对小鼠脾细胞ＮＫ活性的抑制作用，显示出协同效应。

关键词：手术应激补中益气汤 trh NK 小鼠

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trh治疗实验性脊髓损伤的研究进展

中国药理学通报 1990年第4期6卷 221-223页

作者：何凤慈第三军医大学野战外科研究所重庆630042

近年来,人们逐渐重视脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)继发性间接损伤的研究,而这种继发性损伤又与体内某些内源性因子,包括自由基、儿茶酚胺、花生四烯酸代谢产物、钙和阿片样物质等的释放有关,因而为SCI的实验治疗开拓了更为广泛的... 详细信息

近年来,人们逐渐重视脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)继发性间接损伤的研究,而这种继发性损伤又与体内某些内源性因子,包括自由基、儿茶酚胺、花生四烯酸代谢产物、钙和阿片样物质等的释放有关,因而为SCI的实验治疗开拓了更为广泛的研究内容。促甲状腺激素释放激素(Thyrotropin-releasi-ng Hormone,trh)是一种内源性的神经三肽。

关键词：脊髓损伤 trh

大鼠单侧隔核内微量注入trh或吗啡对痛阈及电针镇痛的影响

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针刺研究 1990年第1期15卷 6-12页

作者：涂宗苹张自东朱梓香同济医科大学基础医学部生理教研室

我组曾报道脑室注入促甲状腺素释放激素(trh)能对抗电针镇痛,其作用机理不清。隔核与脑室紧密相邻又是前脑边缘系统的重要结构,与其他边缘系统和脑区都有着密切的联系,它具有多种生理功能。

关键词：隔核 trh 吗啡电针止痛痛阈

trh、IL-1β对大鼠垂体GH_3细胞游离钙影响的体外研究

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中华内分泌代谢杂志 1993年第1期9卷 38-39页

作者：王晓东中国人民解放军总医院内分泌科 100853

作者使用Fura-2作为Ca^(++)指示剂,观察了促甲状腺激素释放激素(trh)和白细胞介素-1β(IL—1β)对体外培养的大鼠GH_3垂体细胞内Ca^(++)([Ca^(++)]i)水平的影响。结果显示10^(-7)～10^(-9)mol/L浓度trh促进[Ca^(++)]i动员,其程度呈trh剂量依赖性。单用0.01～10U/ml IL—1β未增加工[Ca^(++)]i水平。用0.1U/ml IL—1β与待测细胞温育1和3分钟后,加入trh,[Ca^(++)]i释放则受明显抑制;而trh与IL—1β同时使用,抑制作用则明显减弱。本研究证实[Ca^(++)]i对trh在垂体细胞内的作用起重要信息传递作用,一定剂量IL—1β可能通过抑制trh诱导的[Ca^(++)]i释放影响垂体功能。

关键词：白细胞介素-1 垂体游离钙 trh