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Electrophysiology and fluorescence to investigate cation channels and transporters in isolated plant vacuoles

Stress Biology 2022年第1期2卷 172-181页

作者： Antonella Gradogna Armando Carpaneto Institute of Biophysics National Research CouncilVia De Marini 616149 GenoaItaly Department of Earth Environment and Life Sciences(DISTAV)University of GenoaViale Benedetto XV 516132 GenoaItaly

The plant vacuole plays a fundamental role in cell *** successful application of patch-clamp tech-nique on isolated vacuoles allows the determination of the functional characteristics of tonoplast ion channels and *** parallel use of a sensor-based fluorescence approach capable of detecting changes in calcium and proton concentrations opens up new possibilities for *** excised patch,the presence of fura-2 in the vacuolar solution reveals the direct permeation of calcium in plant tpc *** whole-vacuole,the activity of non-electrogenic NHX potassium proton antiporters can be measured by using the proton sensitive dye BCECF loaded in the vacuolar lumen by the patch *** vacuolar NHXs and CLCa(chloride/nitrate antiporter)are inhibited by the phosphoinositide PI(3,5)P2,suggesting a coordinated role of these proteins in salt *** knowledge in the molecular mechanisms of vacuolar ion channels and transporters has the potential to improve our understanding on how plants cope with a rapidly changing environment.

关键词： Patch-clamp Fura-2 BCECF tpc channels Potassium Calcium NHX antiporters Proton

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