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tnf相关凋亡诱导配体基因治疗小鼠肝细胞肿瘤

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中国肿瘤生物治疗杂志 2005年第1期12卷 23-27页

作者：杨燕冯作化张慧李东张桂梅华中科技大学同济医学院附属同济医院实验设备中心武汉430030 华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系武汉430030

目的:探讨经化疗药物作用后的H22细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性,观察TRAIL、纤黏连蛋白及内皮抑素的真核表达质粒pTRAIL,pCH510,pES联合化疗抑制小鼠肿瘤生长的作用。方法:pTRAIL转染BHK细胞后,加入分别经MMC,ADM,5-FU处理的H22细胞,MTT... 详细信息

目的:探讨经化疗药物作用后的H22细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性,观察TRAIL、纤黏连蛋白及内皮抑素的真核表达质粒pTRAIL,pCH510,pES联合化疗抑制小鼠肿瘤生长的作用。方法:pTRAIL转染BHK细胞后,加入分别经MMC,ADM,5-FU处理的H22细胞,MTT法检测pTRAIL对H22细胞的生长抑制作用,流式细胞仪分析H22细胞凋亡。在小鼠种植瘤体内注射MMC与pTRAIL,pCH510,pES,观察其对肿瘤生长的抑制作用。结果:pTRAIL能抑制H22生长并诱导细胞凋亡,与MMC,ADM及5-FU联合,H22的凋亡百分数分别为28.1%(P0.05)。体内,MMC+pTRAIL+pES+pCH510联合能有效抑制肝细胞肿瘤生长,肿瘤生成率为37.5%。结论:MMC或ADM作用后的残存H22肿瘤细胞对pTRAIL敏感,MMC+pTRAIL+pES+pCH510具有协同抑瘤效应,能将小鼠肝细胞肿瘤抑制在组织学水平。

关键词： tnf相关凋亡诱导配体 ADM MMC 5-FU 肝细胞肿瘤

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实用医学杂志 2005年第17期21卷 1908-1910页

作者：谢松业丁星赵超巫协宁上海交通大学附属第一人民医院暨上海市第一人民医院 200080

目的:观察肾同种移植排斥患者血清可溶性TRAIL(sTRAIL)、stnfR-I、stnfR-II、sFas、sFasL的水平变化与临床意义。方法:采用酶联免疫双抗体夹心法测定。结果:受试组(n=29)与健康对照组(n=29)比较sTRAIL、stnfR-I、stnfR-II、sFas差异有... 详细信息

目的:观察肾同种移植排斥患者血清可溶性TRAIL(sTRAIL)、stnfR-I、stnfR-II、sFas、sFasL的水平变化与临床意义。方法:采用酶联免疫双抗体夹心法测定。结果:受试组(n=29)与健康对照组(n=29)比较sTRAIL、stnfR-I、stnfR-II、sFas差异有显著性(P0.05)。结论:肾同种移植排斥患者血清sTRAIL、stnfR-I、stnfR-II、sFas水平比对照组显著升高,提示血清这些细胞因子的含量变化在肾同种移植排斥病理过程中起着重要作用。

关键词：肾移植 tnf相关凋亡诱导配体同种移植排斥血清可溶性水平变化临床意义细胞因子患者 stnfR-Ⅰ stnfR-Ⅱ

肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体与放化疗联用对喉癌细胞的协同杀伤效应及机制

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2009年第7期44卷 565-570页

作者：张明周梁复旦大学附属眼耳鼻咽喉科医院耳鼻咽喉科上海200031

目的探讨人喉癌Hep-2细胞对肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体（tumor necrosis factor—related apoptosis—inducing ligand，TRAIL）诱导凋亡的敏感性，TRAIL与顺铂、紫杉醇、放射线联合应用对Hep-2细胞的杀伤效应及其调控机制。方法采... 详细信息

目的探讨人喉癌Hep-2细胞对肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体（tumor necrosis factor—related apoptosis—inducing ligand，TRAIL）诱导凋亡的敏感性，TRAIL与顺铂、紫杉醇、放射线联合应用对Hep-2细胞的杀伤效应及其调控机制。方法采用活细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）法检测TRAIL、顺铂、紫杉醇对Hep-2细胞的生长抑制率以及caspase-8、caspase-9抑制剂对其作用的影响；流式细胞仪检测Hep-2细胞凋亡率及TRAIL受体表达量；蛋白质印迹法检测联合用药后caspase-8、caspase-9、caspase-3及TRAIL受体表达变化。结果TRAIL对Hep-2细胞的24h半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration，IC50）为596．92μg／L；顺铂、紫杉醇、放射线分别与TRAIL联合应用时Hep-2细胞凋亡率显著高于单药应用（P值均〈0．05）；caspase-9抑制剂Z—LETD—FMK使TRAIL、顺铂、紫杉醇对Hep-2细胞的生长抑制率显著下降（P值均〈O：05）；联合用药组caspase-8、caspase-9表达量显著升高，TRAIL死亡受体（DR4，DR5）表达量显著上调（P值均〈0．05）。结论人喉癌Hep-2细胞对TRAIL诱导的细胞凋亡不敏感，TRAIL通过内源性途径诱导Hep-2细胞凋亡；TRAIL死亡受体的表达上调可能增强了Hep-2细胞对TRAIL的敏感性，可能是联合用药对Hep-2细胞发挥协同效应的重要机制。

关键词：喉肿瘤癌,鳞状细胞 tnf相关凋亡诱导配体细胞凋亡药物协同作用辐射增敏药

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在寻常型银屑病皮肤中的表达

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中国药理学通报 2009年第10期25卷 1338-1340页

作者：杨积顺吴建华朱全刚刘继勇胡晋红第二军医大学长海医院药学部上海200433 第二军医大学长海医院皮肤科上海200433

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体[tumornecrosis factor(tnf)-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL]在寻常型银屑病和健康人皮肤组织中的表达差异。方法采用免疫组织化学和Real-Time PCR方法从蛋白水平和mRNA水平上考察TRAI... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体[tumornecrosis factor(tnf)-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL]在寻常型银屑病和健康人皮肤组织中的表达差异。方法采用免疫组织化学和Real-Time PCR方法从蛋白水平和mRNA水平上考察TRAIL的表达变化。结果银屑病皮损中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的表达低于健康人皮肤。结论TRAIL水平的降低可能与银屑病的发生发展有关。

关键词： tnf相关凋亡诱导配体银屑病皮肤皮损组织炎症凋亡

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2011年第10期46卷 854-858页

作者：李仕晟唐青来王树辉陈月红刘家佳王爽杨新明中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉头颈外科长沙410011

目的观察联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor related apoptosis—inducing ligand，TRAIL）和阻断P13-K—Akt信号通路，对鼻咽癌细胞株CNE-2的影响，并探索其可能的机制。方法用TRAIL和P13-K特异性抑制剂LY29400... 详细信息

目的观察联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor related apoptosis—inducing ligand，TRAIL）和阻断P13-K—Akt信号通路，对鼻咽癌细胞株CNE-2的影响，并探索其可能的机制。方法用TRAIL和P13-K特异性抑制剂LY294002单独和联合处理鼻咽癌细胞株CNE-2，采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞存活率，流式细胞仪进行细胞凋亡率的分析，Western blot检测相关蛋白表达及Caspase活化程度。用TRAIL和LY294002单独和联合处理人良性成纤维细胞株MRC-5，检测细胞存活率。结果TRAIL质量浓度〉1ng／ml时，联合处理组CNE-2细胞存活率大于TRAIL单独处理组存活率（P值均〈0．05）；当TRAIL质量浓度为10ng／ml和100ng／ml，联合处理组细胞凋亡率明显大于TRAIL单独处理组细胞凋亡率（t值为7．167和7．206，P值均〈0．05）；与TRAIL单独处理组相比，联合处理组出现明显的Caspase-8、Caspase-3、Caspase-9活化增多。两组对比Akt、p-Akt、Bcl-2表达无明显改变；在MRC-5中，对照组、TRAIL单独处理组和联合处理组细胞存活率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论联合TRAIL和阻断PI3-K—Akt信号通路对抑制鼻咽癌细胞株CNE-2生长，诱导细胞凋亡具有协同作用，其可能机制是诱导线粒体依赖途径。

关键词： tnf相关凋亡诱导配体色酮类吗啉类 1-磷脂酰肌醇3-激酶细胞凋亡鼻咽肿瘤

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中华医学杂志 2009年第12期89卷 841-845页

作者：孙伟姜政向廷秀陶小红黄爱龙王丕龙第三军医大学西南医院感染病研究所重庆400038 重庆医科大学附属第一医院消化科重庆医科大学肝炎研究所

目的探讨hAG（K1～3）联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因在体内对裸鼠胃癌皮下移植瘤的生长抑制作用。方法通过亚克隆法构建重组质粒pBud—hAG及pBud—hAG-TRAIL，将人胃癌细胞SGC-7901注射裸鼠皮下形成移植瘤，并将移植... 详细信息

目的探讨hAG（K1～3）联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因在体内对裸鼠胃癌皮下移植瘤的生长抑制作用。方法通过亚克隆法构建重组质粒pBud—hAG及pBud—hAG-TRAIL，将人胃癌细胞SGC-7901注射裸鼠皮下形成移植瘤，并将移植瘤小鼠随机分为实验组和对照组。实验组包括pBud—hAG组和pBud—hAG—TRAIL组，各5只；对照组包括空质粒（pBud）组和生理盐水组，各5只。然后分别将2种重组质粒分次多点注入实验组移植瘤体内，并与对照组比较，通过检测移植瘤的体积和肿瘤微血管密度（MVD）研究其对肿瘤生长抑制情况及对肿瘤血管密度的影响。结果pBud—hAG组和pBud—hAG-TRAIL组移植瘤的MVD分别是（4．6±1．2）个／高倍视野（HP）和（4．8±0．9）个/HP（P〉0．05），而pBud组和生理盐水组分别是（17．4±2．4）个／HP和（18．2±2．7）个／HP，实验组和对照组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。pBud—hAG组和pBud-hAG-TRAIL组的sTRAIL和hAGmRNA及蛋白表达均为阳性，其移植瘤体积分别是（1．862±0．017）cm^3和（1．325±0．012）cm^3（P〈0．05），而pBud组和生理盐水组分别是（3．637±0．032）cm^3和（3．521±0．028）cm^3，实验组与对照组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论hAG（KI-3）通过抑制血管内皮细胞的生长而抑制肿瘤血管的生成，而TRAIL则通过诱导肿瘤细胞凋亡，从而抑制肿瘤细胞生长，因此hAG（K1—3）联合TRAIL具有更强的抗肿瘤作用。

关键词：血管抑制素类 tnf相关凋亡诱导配体胃肿瘤基因疗法

MTS染色法测定重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的生物学活性

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中国生物制品学杂志 2011年第1期24卷 99-101页

作者：陈红霞于玉根张慧娟黄立勤深圳新鹏生物工程有限公司广东深圳518057

目的建立稳定可靠的重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Recombinant human tnf-related apoptosis-induc-ing ligand,rhTRAIL)生物学活性检测方法——MTS染色法。方法采用人非小细胞肺癌细胞(NCI-H460)凋亡-MTS染色法对3批rhTRAIL... 详细信息

目的建立稳定可靠的重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Recombinant human tnf-related apoptosis-induc-ing ligand,rhTRAIL)生物学活性检测方法——MTS染色法。方法采用人非小细胞肺癌细胞(NCI-H460)凋亡-MTS染色法对3批rhTRAIL供试品进行检测,采用四参数回归法计算供试品效价;并对该方法的专属性、精密性和准确性进行验证。结果 3批供试品(20071101、20071102、20071103)的效价分别为7.3×104、8.1×104和9.3×104 U/ml,相关系数(R2)分别为0.998、0.996和0.998。rhTRAIL抗体能完全阻断rhTRAIL与NCI-H460细胞间的应答反应。该方法专属性较好,不同检测板间、不同加样位置、不同工作日间和不同试验人员间检测结果的平均变异系数分别为12%、26%、24%和7%,平均加样回收率为114%。结论 MTS染色法测定rhTRAIL的生物学活性具有较高的准确性和可信度,适用于rhTRAIL生物学活性的常规检测。

关键词： tnf相关凋亡诱导配体生物学活性 MTS

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中华检验医学杂志 2015年第8期38卷 522-527页

作者：周成杨红玲曾芳玲江敏吴娟广州医科大学研究生院 510182 广州市妇女儿童医疗中心临床检验部广州市妇女儿童医疗中心产科

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）与妊娠期高血压疾病（HDCP）的关联性；评估孕20周前TRAIL对HDCP发生的预测效率。方法采用巢式病例对照研究，收集2011年4月至2013年7月在广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心产检和... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）与妊娠期高血压疾病（HDCP）的关联性；评估孕20周前TRAIL对HDCP发生的预测效率。方法采用巢式病例对照研究，收集2011年4月至2013年7月在广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心产检和分娩的孕妇3000例。外周血血浆采自妊娠8～20周，病例追踪至分娩后。入选HDCP孕妇73例、正常妊娠孕妇126名。采用蛋白抗体芯片技术检测20例HDCP孕妇和年龄孕周相匹配的20名正常孕妇的507个血浆蛋白的表达，应用DAVID软件和GO数据库对差异蛋白进行功能注释和富集分析。采用酶联免疫法检测53例HDCP孕妇和年龄孕周相匹配的106名正常孕妇的血浆TRAIL水平，结合62个临床高危因素调查数据，通过多因素Logistic回归分析，ROC曲线评价孕20周前TRAIL与HDCP发生的关联性和临床预测效率。结果从507个血浆蛋白中筛选出HDCP发病前表达差异蛋白23个。对表达显著下调的TRAIL进一步定量检测验证，表明孕20周前HDCP组TRAIL水平（45．7±13．1）pg／ml低于正常妊娠组（51．2±14．7）pg／ml，t=2．334，P=0．021。对该159例孕妇的多因素回归分析显示最后进入Logistic模型的3个因素分别为1贫血（OR=4．87，95％C1：1．05—24．26）、孕前BMI（OR=1．72，95％CI：1．35～2．19）和TRAIL（OR=0．96，95％CI：0．92—0．99）。Logistic模型的预测正确率为81．8％，AUC为0．81（95％CI：0．73—0．87，P〈0．05）。HDCP孕妇组中TRAIL下调的独立预测意义：ROC曲线下面积0．59（95％CI：0．51～0．67，P〈0．05）。结论孕20周前HDCP组孕妇血浆中23个蛋白表达存在差异，证明HDCP是一组具有不同生物学改变的异质性疾病；TRAIL与HDCP发生具有关联性；孕20周前应用TRAIL联合传统高风险因素（贫血和孕前体重指数）预测HDCP发生有较高的临床应用价值。

关键词：高血压妊娠性受体 tnf相关凋亡诱导配体蛋白质阵列分析

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中华消化杂志 2019年第11期39卷 759-764页

作者：郑淑姿黄开宇吴昊蔡静叶方鹏蒋益温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童消化科325000 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院消化内科325000 温州市中心医院消化内科 325000 瑞安市人民医院消化内科浙江省温州市325200

目的在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因敲除(TRAIL-/-)小鼠中诱导实验性结肠炎模型,分析肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)缺乏对小鼠结肠炎症和肠道菌群组分的影响。方法选取C57BL/6品系的TRAIL-/-小鼠和野生型小鼠各24只,分为TRA... 详细信息

目的在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因敲除(TRAIL-/-)小鼠中诱导实验性结肠炎模型,分析肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)缺乏对小鼠结肠炎症和肠道菌群组分的影响。方法选取C57BL/6品系的TRAIL-/-小鼠和野生型小鼠各24只,分为TRAIL-/-对照组(8只)和TRAIL-/-结肠炎组(16只),以及野生型对照组(8只)和野生型结肠炎组(16只)。两组结肠炎小鼠均连续7 d口服3.5%葡聚糖硫酸钠饮用水,诱导实验性结肠炎模型,从临床表现和组织病理学方面评估结肠炎严重程度。收集小鼠结肠组织标本,采用高通量16S rDNA测序技术检测结肠菌群组分,再应用USEARCH软件和R语言软件分析TRAIL-/-对照组、TRAIL-/-结肠炎组、野生型对照组和野生型结肠炎组小鼠结肠菌群组分的差异。组间比较采用独立样本t检验和秩和检验。结果造模开始后,野生型结肠炎组小鼠和TRAIL-/-结肠炎组小鼠的结肠炎疾病活动指数(DAI)都随时间推移逐渐增高,TRAIL-/-结肠炎组小鼠比野生型结肠炎组小鼠更早出现体质量下降、腹泻和便血。在造模后第7天,TRAIL-/-结肠炎组小鼠体质量下降(28.98±2.84)%,野生型结肠炎组小鼠体质量下降(17.87±3.70)%,两组间比较差异有统计学意义(t=9.53,P诱导的结肠炎,并引起小鼠结肠菌群的α多样性增高。

关键词： tnf相关凋亡诱导配体肠道菌群实验性结肠炎小鼠,基因敲除