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消癌解毒方加入LPS及CD284对人肝癌细胞SMMC-7721的tlrs/NF-κB信号转导通路影响

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中华中医药杂志 2012年第11期27卷 2818-2822页

作者：李栋程海波王明艳李黎吴勉华南京中医药大学南京210046

目的:深入研究中医药抗恶性肿瘤单一信号通路及多靶点联合治疗的机制。方法:经细胞培养、倒置显微镜观察细胞凋亡形态法、MTT法及流式细胞仪检测消癌解毒方及在此基础上加入激动剂脂多糖(LPS)及TLR4阻断剂(CD284)对人肝癌细胞SMMC-7721... 详细信息

目的:深入研究中医药抗恶性肿瘤单一信号通路及多靶点联合治疗的机制。方法:经细胞培养、倒置显微镜观察细胞凋亡形态法、MTT法及流式细胞仪检测消癌解毒方及在此基础上加入激动剂脂多糖(LPS)及TLR4阻断剂(CD284)对人肝癌细胞SMMC-7721的tlrs/NF-κB信号转导通路的影响。结果:消癌解毒方具有良好的抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖的作用,空白、低、中、高各浓度含药血清组加入LPS后,人肝癌细胞抑制率与凋亡率均较相应浓度含药血清组下降,其中高浓度含药血清剂量组及加入CD284后对人肝癌细胞增殖的抑制作用最明显。结论:消癌解毒方的抗肿瘤机制可能是含药血清与CD284能协同作用于人肝癌细胞SMMC-7721的tlrs/NF-κB信号转导通路,抑制核转录因子NF-κB的异常持续活化,促进肿瘤细胞凋亡。

关键词：消癌解毒方脂多糖 CD284 tlrs NF-κB SMMC-7721

感染金黄色葡萄球菌小尾寒羊外周血白细胞和乳腺组织中tlrs基因的表达

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甘肃农业大学学报 2018年第5期53卷 8-14页

作者：陈佳佳张小丽马小军唐然贺佳慧李娇阳张禹甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 甘肃省草食动物生物技术重点实验室甘肃兰州730070

【目的】Toll样受体是一种调节天然免疫反应的I型跨膜蛋白受体,研究拟通过检测tlrs在金黄色葡萄球菌引起的羊乳房炎发病过程中的表达情况,为进一步探索tlrs在绵羊乳房炎的作用机理奠定基础.【方法】以泌乳期的小尾寒羊为实验动物,运用... 详细信息

【目的】Toll样受体是一种调节天然免疫反应的I型跨膜蛋白受体,研究拟通过检测tlrs在金黄色葡萄球菌引起的羊乳房炎发病过程中的表达情况,为进一步探索tlrs在绵羊乳房炎的作用机理奠定基础.【方法】以泌乳期的小尾寒羊为实验动物,运用实时荧光定量PCR方法检测TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5基因在小尾寒羊外周血白细胞和乳腺组织中mRNA水平的相对表达量.【结果】TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5在对照组和感染组的小尾寒羊外周血白细胞和乳腺组织中均可表达.TLR5在感染组的表达量低于对照组.在小尾寒羊外周血白细胞中,TLR2在12h的表达量较感染后的其他时间段高,并且12h的表达量较对照组显著升高;TLR1和TLR3的表达量与对照组相比显著降低;TLR4在感染后的表达量低于对照组.在小尾寒羊乳腺组织中,TLR2在感染36h的表达量较对照组显著增高,在72h降到最低,但其表达量仍高于对照组;TLR3在感染后36h和48h的表达量均低于对照组.TLR4除24h的表达量显著升高外,其余时间段均低于对照组.TLR1的表达量各时段无差异.【结论】tlrs参与了感染羊乳房炎早期的病理过程.

关键词：小尾寒羊金黄色葡萄球菌 tlrs 实时荧光定量PCR

黄芩苷对实验性结肠炎小鼠tlrs/MyD88通路的作用研究

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天然产物研究与开发 2014年第6期26卷 952-956页

作者：邹颖迟宏罡欧阳霖芮石敏蔡碧茉伍俏璐戴世学冯锦山赵兵郑学宝东医学院第二临床医学院中医学教研室广东医学院中美肿瘤研究所广东医学院药学院东莞523808 南方医科大学南方医院急诊科广州510515

本文研究黄芩苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎小鼠模型的疗效,并从tlrs/MyD88通路探讨其作用机制。C57BL/6小鼠24只,分为空白对照组、模型组和黄芩苷组,用3.5%DSS诱导结肠炎模型,黄芩苷(30 mg/kg)干预7天,记录小鼠的疾病活动指数(DAI... 详细信息

本文研究黄芩苷对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的结肠炎小鼠模型的疗效,并从tlrs/MyD88通路探讨其作用机制。C57BL/6小鼠24只,分为空白对照组、模型组和黄芩苷组,用3.5%DSS诱导结肠炎模型,黄芩苷(30 mg/kg)干预7天,记录小鼠的疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察病理改变并评分,检测结肠髓过氧化物酶(MPO)活性,ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-6浓度,Real-time PCR法检测TLR2、TLR4和MyD88 mRNA表达水平。结果显示黄芩苷能有效抑制结肠炎小鼠DAI评分、结肠组织病理学评分和MPO活性,降低IL-6和TNF-α表达,降低TLR2、TLR4和MyD88 mRNA的表达。表明黄芩苷能有效缓解DSS诱导的结肠炎小鼠模型的症状,降低炎症反应,其作用机制可能是与tlrs/MyD88通路相关。

关键词：黄芩苷炎症性肠病 tlrs MyD88通路

Toll-样受体在调节T-和B-淋巴细胞功能中的作用

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科学通报 2008年第7期53卷 747-753页

作者：张宗梁中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所上海200031

尽管病原体能通过它们本身的方式入侵机体的许多部分,然而宿主对病原体的感应器——Toll-样受体(Toll-like receptors,tlrs)也能以广泛的、显著的方式在免疫细胞表达,以防御和应对病原体的入侵.目前的研究表明,tlrs不仅在天然免疫系统... 详细信息

尽管病原体能通过它们本身的方式入侵机体的许多部分,然而宿主对病原体的感应器——Toll-样受体(Toll-like receptors,tlrs)也能以广泛的、显著的方式在免疫细胞表达,以防御和应对病原体的入侵.目前的研究表明,tlrs不仅在天然免疫系统的效应细胞表达,以介导即刻的抗病原体反应,并且也在适应性免疫系统的T-,B-淋巴细胞表达,提示tlrs直接调节了适应性免疫反应.鉴于tlrs多种效应研究的快速进展,本文将论及tlrs的一些主要性质及它们对T-,B-淋巴细胞的直接作用,并对最近的发现和潜在的治疗应用进行了讨论.总之,不断增多的证据支持这样一种概念,即TLR的激活不仅属于天然免疫,而且也属于包括直接调节T-,B-淋巴细胞功能在内的适应性免疫.

关键词： tlrs T-细胞 B-细胞潜在的治疗应用

Natrue Reriews Immunology2001～2010年“度亮”点(二)

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第5期28卷 473-473,477,483,491,496,499页

作者：张宇丝金伯泉

正值Nature Reviews Immunology创刊10周年之际,该杂志编辑部邀请了该刊2001-2010年间每年引用率最高综述的作者,对其撰写的综述进行回顾性评论,在此作一简介,以飨读者。 2001 Toll样受体：十年的兴奋（Ruslan Medzhitov）Toll样受体（T... 详细信息

正值Nature Reviews Immunology创刊10周年之际,该杂志编辑部邀请了该刊2001-2010年间每年引用率最高综述的作者,对其撰写的综述进行回顾性评论,在此作一简介,以飨读者。 2001 Toll样受体：十年的兴奋（Ruslan Medzhitov）Toll样受体（tlrs）的发现为人们认识固有免疫系统生物学提供了新的视角,为Janeway提出的模式识别理论提供了理论和实验依据。tlrs通过感知绝大多数微生物的活性成分，成为炎症反应最强的诱导剂；同时，TLR配体是诱导DC成熟的强有力的激活物；更为重要的是，tlrs的研究首次清晰地证实了固有免疫系统的模式识别受体可以调节适应性免疫应答的活化。

关键词： Toll样受体模式识别理论 tlrs 模式识别受体系统生物学固有免疫活性成分炎症反应

肺炎链球菌dnaJ基因缺陷对小鼠肺炎感染模型天然免疫应答的影响

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中国生物制品学杂志 2013年第2期26卷 160-165页

作者：崔瑾董杰姜慧周爱娥董姗姗张雪梅尹一兵王虹重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016

目的探讨肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,S.pn)dnaJ基因缺陷对肺炎感染模型小鼠天然免疫应答的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为空白对照组、D39感染组和△dnaJ感染组,分别经鼻腔滴注30μl无菌PBS、30μl含2×107cfu的S.pn D39和△d... 详细信息

目的探讨肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,S.pn)dnaJ基因缺陷对肺炎感染模型小鼠天然免疫应答的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为空白对照组、D39感染组和△dnaJ感染组,分别经鼻腔滴注30μl无菌PBS、30μl含2×107cfu的S.pn D39和△dnaJ(dnaJ基因缺陷株)菌液,复制小鼠肺炎感染模型。于感染后6、12、24、36和48 h处死小鼠,取肺组织,匀浆后分离上清,ELISA检测促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IFNγ的表达水平,HE染色观察感染12 h的小鼠肺组织炎症反应变化;将小鼠巨噬细胞株RAW264.7体外感染S.pn D39和△dnaJ,细菌与细胞的比例为100∶1,感染1、2、3 h后分离细胞培养上清液,ELISA检测TNF-α和IL-6的表达水平。实时定量PCR和Western blot分别检测感染12 h的小鼠肺组织中模式识别受体tlrs基因mRNA的转录水平和炎症相关信号p38MAPK的磷酸化水平。结果与D39感染组相比,△dnaJ感染组小鼠肺组织炎症反应强度下降,TNF-α、IL-6和IL-1β等促炎因子水平达峰时间延迟,且峰值降低,RAW264.7细胞感染3 h分泌TNF-α和IL-6显著减少(P<0.01或P<0.05);小鼠肺组织Tlr2和Tlr13基因mRNA转录水平显著降低(P<0.05),p38MAPK的磷酸化水平也明显下降。结论肺炎链球菌dnaJ基因缺陷可下调肺炎感染模型小鼠的炎症反应、促炎因子分泌及胞内信号分子的激活,也可影响小鼠感染后肺组织中Trl2和Tlr13基因mRNA的表达,为进一步研究机体对肺炎链球菌DnaJ蛋白的天然免疫应答分子机制奠定了基础。

关键词：肺炎链球菌 DnaJ 促炎因子 tlrs p38MAPK

Bifidobacteria Upregulate Expression of Toll-Like Receptor Negative Regulators Counteracting Enterotoxigenic <i>Escherichia coli</i>Mediated Inflammation in Bovine Intestinal Epitheliocytes

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Open Journal of Veterinary Medicine 2013年第2期3卷 143-155页

作者： Kozue Murata Julio Villena Yohsuke Tomosada Risa Hara Eriko Chiba Tomoyuki Shimazu Hisashi Aso Yoshihito Suda Noriyuki Iwabuchi Jin-Zhong Xiao Tadao Saito Haruki Kitazawa Food and Feed Immunology Group Laboratory of Animal Products Chemistry Graduate School of Agricultural Science Tohoku University Sendai Japan

We previously established a bovine intestinal epithelial cell line (BIE cells) and showed that BIE cells are useful in vitro model system for the study of interactions between pathogenic and beneficial microorganisms and bovine intestinal epithelial cells (IECs). In the present study, we aimed to select potential immunomodulatory bifidobacteria that may be used to beneficially modulate the inflammatory response in bovine IECs. We also aimed to gain insight into the molecular mechanisms involved in the anti-inflammatory effect of bifidobacteria by evaluating the role of Toll-like receptor (TLR)-2 and TLR negative regulators in the regulation of proinflammatory cytokines production and MAPK, NF-κB and PI3K pathways activation in BIE cells. Five bifidobacteria strains were evaluated in this study and according to their capacity to modulate the inflammatory response of BIE cells. Despite the unique effect of each strain, four common points were found when comparing the effect of the high and moderate anti-inflammatory strains: 1) Upregulation of TLR negative regulators and the intensity of that upregulation was related to the different immunomodulatory capacity of each bifidobacteria strain;2) The balance between MAPK activation and MKP-1 upregulation affected the anti-inflammatory effect of bifidobacteria in BIE cells;3) The inhibition of PI3K pathway was related to the anti-inflammatory effect of bifidobacteria;4) The immunoregulatory effect of bifidobacteria in BIE cells is partially dependent on TLR2. This study shows that BIE cells can be used for the selection of immunoregulatory bifidobacteria and for studying the mechanisms involved in the protective activity of immunobiotics against TLR4-induced inflammatory damage. In addition, we have demonstrated that the anti-inflammatory effect of bifidobacteria was achieved by a complex interaction of multiple tlrs negative regulators as well as the inhibition/activation of multiple signaling pathways.

关键词： Bovine Intestinal Epithelial Cells Bifidobacteria ETEC tlrs Negative Regulators

NODs蛋白及其与tlrs相互调控在机体抗病原真菌感染中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2012年第3期32卷 281-285页

作者：饶振华谢小梅江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004

宿主的模式识别受体（paaemrecognitionrecep—tors，PRRs）主要包括Toll样受体（tlrs）和核苷酸结合寡聚化结构域（NODs）两大类受体，其中tlrs是胞膜模式识别受体，NODs是近年来新发现的胞质模式识别受体。目前，已有大量关于tlrs与N... 详细信息

宿主的模式识别受体（paaemrecognitionrecep—tors，PRRs）主要包括Toll样受体（tlrs）和核苷酸结合寡聚化结构域（NODs）两大类受体，其中tlrs是胞膜模式识别受体，NODs是近年来新发现的胞质模式识别受体。目前，已有大量关于tlrs与NODs在细菌感染免疫应答中作用的研究，

关键词： tlrs 真菌感染相互调控模式识别受体 Toll样受体病原体抗白及

围产期奶牛乳房炎与E_2、P_4免疫调节作用及tlrs、NLRs介导天然免疫三者间的关系

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中国兽医学报 2016年第8期36卷 1455-1458,1463页

作者：徐丹丹杨彬王建发孙美涵孙志鹏张义爽李启涛武瑞黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

对奶牛乳房炎现状、围产期奶牛雌激素(E2)和孕酮(P4)变化对机体免疫的调节、Toll样受体(tlrs)和NOD样受体(NLRs)在抗感染作用中的相关研究进行综述,探讨围产期奶牛乳房炎的高发与E2、P4的免疫调节作用及tlrs、NLRs介导的天然免疫三者间... 详细信息

对奶牛乳房炎现状、围产期奶牛雌激素(E2)和孕酮(P4)变化对机体免疫的调节、Toll样受体(tlrs)和NOD样受体(NLRs)在抗感染作用中的相关研究进行综述,探讨围产期奶牛乳房炎的高发与E2、P4的免疫调节作用及tlrs、NLRs介导的天然免疫三者间的关系。

关键词：奶牛乳房炎 E2 P4 NLRs tlrs