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Technological breakthroughs in generating transgene-free and genetically stable CRISPR-edited plants

aBIOTECH 2020年第1期1卷 88-96页

作者： Yubing He Yunde Zhao National Key Laboratory of Crop Genetic Improvement and National Center of Plant Gene Research(Wuhan) Huazhong Agricultural UniversityWuhan 430070China Section of Cell and Developmental Biology University of California San DiegoLa JollaCA 92093-0116USA

CRISPR/Cas9 gene-editing technologies have been very effective in editing target genes in all major crop plants and offer unprecedented potentials in crop improvement.A major challenge in using CRISPR gene-editing technology for agricultural applications is that the target gene-edited crop plants need to be transgene free to maintain trait stability and to gain regulatory approval for commercial production.In this article,we present various strategies for generating transgene-free and target geneedited crop plants.The CRISPR transgenes can be removed by genetic segregation if the crop plants are reproduced sexually.Marker-assisted tracking and eliminating transgenes greatly decrease the time and labor needed for identifying the ideal transgene-free plants.Transgenes can be programed to undergo self-elimination when CRISPR genes and suicide genes are sequentially activated,greatly accelerating the isolation of transgene-free and target gene-edited plants.Transgene-free plants can also be generated using approaches that are considered non-transgenic such as ribonucleoprotein transfection,transient expression of transgenes without DNA integration,and nano-biotechnology.Here,we discuss the advantages and disadvantages of the various strategies in generating transgene-free plants and provide guidance for adopting the best strategies in editing a crop plant.

关键词： CRISPR Transgene-free Marker-assisted selection tkc Cas9 gene editing

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tkc与硝酸镧、钐配合物的合成与性质

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武汉大学学报（自然科学版） 1991年第3期37卷 125-128页

作者：娄润和邵学俊易良栋王舟浩黄载福武汉大学化学系

1957年Bradshaw等人合成了一系列大环内酯类化合物,并以这类化合物为配体制得了碱金属、碱土金属的配合物。β-二酮冠醚配合物也有研究,发现不仅冠醚环上的醚氧与金属离子配合,环外的羰基也有一定的作用,但含四羰基冠醚配合物尚未见到... 详细信息

1957年Bradshaw等人合成了一系列大环内酯类化合物,并以这类化合物为配体制得了碱金属、碱土金属的配合物。β-二酮冠醚配合物也有研究,发现不仅冠醚环上的醚氧与金属离子配合,环外的羰基也有一定的作用,但含四羰基冠醚配合物尚未见到报导。可以预料,由于羰基增多冠醚与金属离子的配合作用将变得复杂。为此,本文合成了1,4-二氧-9,12-二氮环十六烷-5,8,13,16-四酮(简写为tkc)与硝酸镧、钐的配合物,并进行了元素分析、红外光谱,紫外光谱、核磁共振、溶解性能及摩尔电导和差热分析测试,对配合物的合成条件进行了探索,以研究冠醚环上的氧、氮原子以及环外羰基与RE(Ⅲ)的配合性能。tkc的结构如左。

关键词： tkc 硝酸镧钐配合物

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基于EKC理论的工业制成品出口对环境影响的实证研究

基于EKC理论的工业制成品出口对环境影响的实证研究

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作者：周明哲沈阳工业大学

学位级别：硕士

对外贸易在我国经济中占有极其重要的地位,改革开放近30年来,中国对外贸易规模不断扩大,我国出口贸易实力逐渐增强。随着生活水平的提高,人们对环境质量的要求也逐渐增高,然而环境污染问题却日益严重,在我国尤其是工业品造成的环境污染... 详细信息

对外贸易在我国经济中占有极其重要的地位,改革开放近30年来,中国对外贸易规模不断扩大,我国出口贸易实力逐渐增强。随着生活水平的提高,人们对环境质量的要求也逐渐增高,然而环境污染问题却日益严重,在我国尤其是工业品造成的环境污染问题非常严重,贸易与环境污染之间的矛盾凸显。贸易与环境问题不仅是全球关注的热点,也是人类可持续发展不可忽视的问题之一。本文选取1990年至2008年的工业制成品出口贸易数据以及环境污染数据,把EKC理论应用到国际贸易与环境的研究中,通过建立CUBIC模型,验证我国的EKC曲线的形状,在此基础上把出口贸易变量加入CUBIC模型中,着重分析工业制成品出口贸易依存度对环境的影响,对我国的工业制成品出口贸易对环境污染的影响进行了更深入的研究,在以往EKC曲线研究的基础上进行tkc检验,这是论文研究的创新点,也是对前人研究的突破,最后提出对外贸易与环境协调发展的政策建议。一些发达国家在其经济高速发展的过程中,先忽视环境的重要性,之后又来治理环境,正如环境库兹涅茨(EKC)曲线的形态所反映的一样。中国是否能够吸取和借鉴西方发达国家的教训和经验,提早的预防或者调整目前中国环境的现状,使我国的对外贸易发展的同时,环境得到良性循环与发展,这是我国现阶段贸易与环境问题中需要深入思考的问题,也是值得研究与探讨的课题。

关键词：出口贸易工业制成品 EKC tkc

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抗爆组分分析及电子转移机理研究

抗爆组分分析及电子转移机理研究

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作者：齐丽云曲阜师范大学

学位级别：硕士

使用抗爆添加剂是提高汽油辛烷值经济有效的途径。汽油无铅化发展趋势要求抗爆剂的更新换代。气相色谱-质谱(GS／MS)将色谱的高分离能力和质谱分析仪的成分鉴定能力相结合，从而成为最有效的复杂混合物的分离鉴定手段。为明确抗爆剂组... 详细信息

使用抗爆添加剂是提高汽油辛烷值经济有效的途径。汽油无铅化发展趋势要求抗爆剂的更新换代。气相色谱-质谱(GS／MS)将色谱的高分离能力和质谱分析仪的成分鉴定能力相结合，从而成为最有效的复杂混合物的分离鉴定手段。为明确抗爆剂组分，本文采用GS／MS法剖析抗爆剂的主要成分，并进一步识别其有效组分。二茂铁是一种优良的抗爆剂组分，又适合用于电化学研究，本文应用循环伏安法和交流阻抗法研究了在油品添加剂tkc辅助剂中的电化学性质。结果表明：二茂铁在tkc辅助剂中更加稳定，其电化学反应电阻随着tkc比例的不断增大而增大，作用成效增强。消除汽缸中的过氧化物是减轻爆震的关键，为明确二茂铁的抗爆机理，本文研究了过氧化氢对抗爆组分中二茂铁电子转移过程的影响，提出了反应机理，并进一步对照研究二茂铁在添加剂组分中的电化学性质及其与过氧化氢的相互作用。并由此探讨抗爆剂的抗爆性和组分性质的关系，分析组分的独特作用。研究发现，二茂铁离子可消除过氧化氢，抗爆组分tkc辅助剂对该过程有重要影响。明确抗爆剂组分的性能和作用机理，分析各组分的独特作用和它们间的协同作用，将为组分优选工作与寻找最佳配比提供理论依据，对开发经济有效的抗爆剂具有极为重要的意义。

关键词： tkc 组分剖析循环伏安交流阻抗 H2O2 抗爆组分催化电流

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tkc technology greatly accelerates the isolation of CRISPR-edited and transgene-free rice plants

TKC technology greatly accelerates the isolation of CRISPR-e...

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2018全国植物生物学大会

作者： Yubing He Min Zhu Lihao Wang Junhua Wu Qiaoyan Wang Rongchen Wang Yunde Zhao National Key Laboratory of Crop Genetic Improvement and National Center of Plant Gene Research (Wuhan) Huazhong Agricultural University College of Plant Science & Technology Huazhong Agricultural University College of Life Science and Technology Huazhong Agricultural University Section of Cell and Developmental Biology University of California San Diego

CRISPR gene-editing technology has successfully generated targeted mutations in rice and many other plant species.Assessment of heritability and phenotypic stability of CRISPR-edited plants requires the elimination of the CRISPR construct.Removal of the CRISPR construct after DNA modifications have been completed is a rate-limiting step on using gene editing technology for crop improvement.Here,we developed a tkc(Tansgene Killer CRISPR) strategy that employ two suicide transgenes 35 SCMS2 and REG2-BARNASE expression cassettes to kill all of the CRISPR/Cas9-containing pollen and embryos produced by TO plants,respectively.LAZY1 and D3 were used as two example genes targeted by tkc system.We have clearly demonstrated that the suicide transgenes,BARNASE and CMS2,can be harnessed to eliminate the CRISPR constructs within a single generation without compromising the gene editing efficiency of CRISPR/Cas9.Our tkc technology observably reduced the time and labor needed for isolating transgene-free,CRISPR-edited rice plants.This strategy will be wildly used in other plant species to obtainedited and transgene-free plants.

关键词： gene-editing transgene-free tkc rice

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汽油辛烷值添加剂tkc和汽油抗爆剂MMT实验室小试

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河北化工 2002年第5期25卷 11-12,21页

作者：刘俊红中国石化股份公司沧州分公司河北沧州061000

从改善汽油品质入手 ,主要提高汽油的辛烷值 ,其方法是在汽油中加入添加剂tkc或MMT。通过实验室小试 ,摸索出不同的加剂比例 ,探讨了辛烷值的增加幅度及对油品其它性质的影响。

关键词：汽油辛烷值添加剂 tkc 汽油抗爆剂 MMT 实验室试验

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吐噶喇海峡温、盐、流变化分析

吐噶喇海峡温、盐、流变化分析

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第七届全国水动力学学术会议暨第十九届全国水动力学研讨会

作者：马超吴德星林霄沛中国海洋大学物理海洋实验室中国海洋大学物理海洋实验室中国海洋大学物理海洋实验室

利用验潮站海表高度差反演吐噶喇海峡黑潮的流量,分析了黑潮流量的年内和年际变化。并根据日本气象厅1987-2000年TK断面CTD调查资料,重点分析了该断面温、盐、流的季节变化,发现TK断面流速结构以双核为主,流量的季节变化非常显著, 季节... 详细信息

利用验潮站海表高度差反演吐噶喇海峡黑潮的流量,分析了黑潮流量的年内和年际变化。并根据日本气象厅1987-2000年TK断面CTD调查资料,重点分析了该断面温、盐、流的季节变化,发现TK断面流速结构以双核为主,流量的季节变化非常显著, 季节内变化相对较弱,此外还有准2年和准4年的周期变化,流量大时流轴偏北,流量小时流轴偏南。相应的卫星高度计资料和浮标资料也揭示了上述现象。

关键词：吐噶喇海峡黑潮 TIC断面 tkc

来源： cnki会议评论