检索结果-南通市图书馆

timp-4 mRNA在小鼠子宫中的表达和激素调节

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

新疆师范大学学报（自然科学版） 2008年第1期27卷 97-99,106页

作者：卜淑敏汪建红首都体育学院北京100088 新疆师范大学生命科学与化学学院新疆乌鲁木齐830054

为研究timp-4 mRNA在子宫中的变化规律,采用半定量RT-PCR方法,观察了timp-4 mRNA在出生后小鼠子宫不同发育期、动情周期、妊娠早期以及假孕早期子宫中的表达和激素调节。结果发现,timp-4 mRNA在出生后不同发育期的小鼠子宫中、动情周期... 详细信息

为研究timp-4 mRNA在子宫中的变化规律,采用半定量RT-PCR方法,观察了timp-4 mRNA在出生后小鼠子宫不同发育期、动情周期、妊娠早期以及假孕早期子宫中的表达和激素调节。结果发现,timp-4 mRNA在出生后不同发育期的小鼠子宫中、动情周期的任何时期、妊娠第1天以及假孕第1天的子宫中都不表达,但在妊娠和假孕第2天、第3天、第4天的子宫中都表达。以上结果提示,timp-4 mRNA在妊娠小鼠子宫中的表达可能不依赖存活胚胎的激活,而可能受母体妊娠分泌物的上调。

关键词： timp-4 小鼠子宫表达和调节

IL-1及TGF-β对膝骨关节炎软骨细胞timp-4表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

临床医学工程 2019年第4期26卷 468-470页

作者：黄子奇高大伟宋伟毅黄伟彦彭杰威林晓航李娜吴宇峰中山市中医院骨三科广东中山528400

目的研究在白细胞介素1 (IL-1)及转化生长因子β(TGF-β)影响下,人膝关节软骨细胞中的金属蛋白酶组织抑制因子4 (timp-4)蛋白表达水平的变化,从分子水平上研究骨性关节炎(OA)的调控机制,为临床治疗提供理论依据。方法软骨细胞经原代培... 详细信息

目的研究在白细胞介素1 (IL-1)及转化生长因子β(TGF-β)影响下,人膝关节软骨细胞中的金属蛋白酶组织抑制因子4 (timp-4)蛋白表达水平的变化,从分子水平上研究骨性关节炎(OA)的调控机制,为临床治疗提供理论依据。方法软骨细胞经原代培养、纯化和传代后,除对照组外,分别与IL-1及TGF-β共培养实施细胞因子干预,最后经免疫印迹试验测量timp-4蛋白表达水平,各组数据釆用单因素方差分析(ANOVA),以正常软骨对照组均值为参考基数(1.00)。结果在没有细胞因子干预的情况下,软骨细胞均不同程度地表达timp-4蛋白, OA患者的软骨细胞表达水平更高,差异有统计学意义(P timp-4蛋白表达量均呈现统计学差异(P 45±0.05)比IL-1 (1.18±0.01)干预效果更明显。结论人原发性膝关节骨性关节炎的软骨细胞中timp-4的表达增加,而且可由细胞因子IL-1及TGF-β进行诱导。

关键词： timp-4 白细胞介素1 转化生长因子β 骨性关节炎

基质金属蛋白酶抑制因子4在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

基质金属蛋白酶抑制因子4在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞增殖、...

作者：董维平第四军医大学

学位级别：硕士

研究背景:膀胱癌发病率居泌尿系恶性肿瘤的首位,系泌尿系统常见的恶性病变。在全身恶性肿瘤中,其中男性膀胱癌发病率位居第七位,女性发病率排在第十位以后。膀胱癌具有多中心、易复发、易侵袭、易耐药等肿瘤生物学特点,10%0%的NMIBC进展... 详细信息

研究背景:膀胱癌发病率居泌尿系恶性肿瘤的首位,系泌尿系统常见的恶性病变。在全身恶性肿瘤中,其中男性膀胱癌发病率位居第七位,女性发病率排在第十位以后。膀胱癌具有多中心、易复发、易侵袭、易耐药等肿瘤生物学特点,10%0%的NMIBC进展为MIBC,高级别的NMIBC更容易进展,近75%的高级别NMIBC,诊断后10年内出现肿瘤复发、进展或导致死亡。目前尚无有效手段和技术准确评估肿瘤预后。近年来发现的基质金属蛋白酶抑制因子-4(Tissue inhibitor of metalloproteinase,timp-4)具有抑制肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移的能力。timp-4是基质金属蛋白酶抑制因子timps家族成员中的一种,是基质金属蛋白酶MMPs的天然抑制剂。timp-4在多种恶性肿瘤组织及细胞中低表达,如子宫内膜癌、肝细胞癌、乳腺癌、结肠癌、前列腺癌,肺癌、脑胶质瘤等。且现有研究表明该基因具有调控细胞增殖、凋亡和肿瘤血管的形成等生物学行为的功能,在多种肿瘤细胞中上调timp-4的表达可有效抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移。但到目前为止尚无timp-4关于膀胱癌的相关报道。目的:1.明确膀胱癌组织及癌旁正常组织中timp-4蛋白表达水平,统计分析表达水平有无差异,初步探讨timp-4与膀胱癌组织学分级之间的关系。2.通过构建timp-4过表达质粒,探讨过表达timp-4后对膀胱癌T24细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法:1.膀胱癌组织及癌旁正常组织中timp-4蛋白表达水平检测采用免疫组织化学染色法对152例膀胱尿路上皮癌(BUCC)患者手术标本进行SP染色,BUCC组织标本作为实验组,癌旁正常膀胱组织作为对照组。在显微镜下观察组织切片染色情况,运用半定量法分析膀胱癌组织及癌旁正常膀胱组织中timp-4蛋白的表达情况,并进一步分析其表达与膀胱癌组织学分级之间的关系。***-4对膀胱癌T24细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响研究将实验中转染P-CMV4-timp-4质粒、P-CMV4空质粒及未转染T24细胞分别定义为实验组、对照组及空白组。收集三组细胞并提取蛋白与RNA后通过Western-blot和qRT-PCR技术检测三组细胞timp-4蛋白和信使RNA(Messenger RNA,mRNA)的表达情况,鉴定上调timp-4的效果。并进一步通过MTT实验和平板克隆形成实验检测并比较上调timp-4表达后T24细胞的增殖能力变化;Transwell实验和划痕实验检测上调timp-4表达后T24细胞的侵袭和迁移能力变化。结果:1.膀胱癌组织及癌旁正常膀胱组织中timp-4蛋白的表达水平运用SP法检测发现:BUCC组织timp-4蛋白染色阳性比率为26.97%,癌旁正常膀胱组织timp-4蛋白染色阳性比率为84.21%,经χ检验Ptimp-4蛋白染色阳性比分别为38.71%和18.89%,经χ检验P4对膀胱癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响通过质粒转染后收集不同组细胞蛋白及RNA,利用Western-blot检测,结果显示实验组T24/timp-4细胞的timp-4蛋白表达量比对照组及空白组增高。qRT-PCR检测结果显示:实验组timp-4 mRNA相对表达量比对照组及空白组增高。膀胱癌细胞增殖、侵袭和迁移检测结果提示:经分析实验组T24/timp-4细胞系、对照组和空白组细胞增殖生长曲线得知T24/timp-4细胞增殖能力弱于对照组及空白组(P4细胞的迁移能力较对照组、空白组均明显减弱(P4/timp-4细胞穿透小室数为(6.67±2.11)少于对照组(15.43±4.22)及空白组(13.23±3.23)(Ptimp-4蛋白在BUCC组织及癌旁正常膀胱组织中均表达,前者比后者表达量降低。在BUCC组织中timp-4的表达水平与膀胱癌组织学分级相关,高级别组较低级组明显减少。通过转染P-CMV4-timp-4质粒能有效上调T24细胞中timp-4的表达,进一步MTT、平板克隆、划痕及Transwell实验结果提示上调timp-4表达后T24细胞的增殖能力及迁移侵袭能力均减弱。

关键词： timp-4 膀胱尿路上皮癌增殖侵袭迁移

骨保护素基因治疗抑制类风湿关节炎软骨破坏的实验研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

骨保护素基因治疗抑制类风湿关节炎软骨破坏的实验研究

作者：封志云浙江大学

学位级别：硕士

前言类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis, RA)是一种病因未明,以反复发作的慢性小关节炎为主的疾病,其特征为关节滑膜增生以及关节软骨与软骨下骨的破坏。导致患者关节畸形、功能丧失以致生活能力下降的主要因素是软骨和骨的破坏。目前... 详细信息

前言类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis, RA)是一种病因未明,以反复发作的慢性小关节炎为主的疾病,其特征为关节滑膜增生以及关节软骨与软骨下骨的破坏。导致患者关节畸形、功能丧失以致生活能力下降的主要因素是软骨和骨的破坏。目前尚无有效抑制该进程的方法。在骨关节炎动物模型中观察到,骨保护素(Osteoproegein, OPG)可以有效抑制软骨和软骨下骨的破坏。在佐剂诱导关节炎动物模型(Adjuvant-induced arthritis, AIA)中也发现,经OPG治疗的大鼠膝关节软骨组织得到近乎完全保护。但是有报道指出胶原诱导的关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)相对于AIA,其关节破坏更明显,更加接近于RA软骨的破坏。所以OPG对RA关节炎软骨的作用尚需进一步研究。而且,OPG抑制关节炎软骨破坏的病理机制尚未明了。软骨基质主要由纤维状的胶原蛋白网络和聚集的蛋白聚糖组成。软骨细胞是唯一的细胞成分,负责调节软骨的代谢。正常情况下,软骨细胞产生软骨基质。分泌多种因子,并在局部达到平衡,以调节软骨的新陈代谢和软骨基质的平衡。简言之,分解代谢因子,如基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-1、3,9.13或解聚素和金属蛋白酶与血小板反应蛋白基序(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs, ADAMTS)-4,5可降解软骨的基质,而timp-1、2、3、4, IGF-I, TGF-β, BMP-2, bFGF等可以促进软骨基质合成,从而抑制MMPs等的作用,进而达到平衡,以保持软骨的自我更新。超负荷的压力或者炎症因子如IL-1, TNF-a等刺激可能打破软骨代谢的平衡,从而导致软骨基质降解和破坏。研究显示RA患者软骨破坏的主要原因是增生的滑膜和炎症细胞的侵蚀,但是至今并无能同时抑制滑膜炎症和软骨破坏的药物。从软骨破坏的内在机制,如软骨细胞凋亡和蛋白多糖丢失着手进一步探索,可能具有重大的临床意义。Kim等人发现,在RA患者关节软骨细胞较非RA患者软骨细胞的凋亡率显著增加。并且凋亡因子caspase3的表达在RA患者及动物模型的软骨中均明显增加。此外,通过番红O染色评估发现在CIA模型动物中蛋白聚糖丢失更为显著。表层的蛋白聚糖丢失通常是关节软骨破坏的第一步,在蛋白聚糖的降解中,ADAMTS-4,-5是主要的降解酶。本课题首次对OPG影响软骨细胞生长和功能进行系统的研究,体外细胞实验与动物体内实验相结合,在分子生物学,细胞学和病理组织学水平探索OPG对软骨细胞的影响,并初步探讨OPG抑制RA软骨破坏的机制：1)体外验证OPG对软骨细胞的增殖能力的影响;2)探索OPG影响软骨细胞的细胞内信号通路;3)探讨OPG对软骨细胞分泌细胞因子能力的影响;4)构建携带OPG基因的腺病毒,构建RA关节炎模型CIA;5)评价OPG基因治疗CIA大鼠后的关节软骨破坏;6)探讨软骨细胞凋亡在CIA软骨破坏中的作用以及OPG基因治疗对软骨细胞凋亡的影响;7)评价OPG基因治疗后ADAMTS-5的分泌水平的改变。第一部分骨保护素对体外软骨细胞增殖及分泌功能的影响目的体外研究骨保护素(osteoprotegerin, OPG)对软骨细胞增殖能力和分泌功能的影响。方法从1周龄SD大鼠的膝关节中,采用胶原酶消化法获取原代软骨细胞。甲苯胺蓝染色鉴定软骨细胞。本实验应用第一代软骨细胞。细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8, CCK-8)检测5,10,20,25,50,100,200ng/ml浓度OPG对软骨细胞增殖能力的影响。以MEK抑制剂U0126, ERK抑制剂PD098059, P38MAPK抑制剂SB203580预处理30分钟,再加入OPG刺激,进行CCK-8试验,用以探索OPG对软骨细胞通路的影响。MAPK家族中的三条信号通路关键蛋白ERK, P38MAPK和JNK由蛋白质免疫印迹法(western-blotting)检测刺激后磷酸化水平。定量PCR和western-blotting测定OPG刺激后软骨细胞分泌的细胞因子和组成成分表达量的变化。结果OPG在5-50ng/ml浓度能促进软骨细胞增殖,最佳效应浓度为10ng/ml。 U0126,PD098095可以显著抑制OPG诱导的软骨细胞增殖。OPG刺激后15分钟,软骨细胞内MEK和ERK蛋白的磷酸化分别增强至0分钟时的4.12倍和3.50倍,而P38MAPK和JNK的蛋白磷酸化则无明显变化。OPG显著下调软骨细胞ADAMTS-5分

关键词：骨保护素软骨细胞增殖 MEK/ERK ADAMTS-5 timp-4 OPG 软骨破坏胶原诱导的关节炎细胞凋亡 ADAMTS-5 基因治疗早期治疗

基质金属蛋白酶-26及其组织抑制剂-4在小鼠胚胎中的表达

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Developmental and Reproductive Biology 2001年第B10期10卷 88-88页

作者：张键李素敏田永强曹宇静段恩奎中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点开放实验室中国北京100080