检索结果-南通市图书馆

红曲黄色素对LPS诱导的thp-1细胞和RAW264.7细胞炎症的影响

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品与发酵工业 2024年

作者：毛禹清高坤辉刘曾丽陈勉华天津科技大学食品科学与工程学院

为研究红曲黄色素MC、MS和AK的抗炎机理，从红曲菌CP-1固态发酵后得到的红曲米中提取分离出红曲黄色素MC，并使用TLC和HPLC进行纯度分析。构建2 μg/mL的脂多糖诱导人thp-1巨噬细胞和小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症模型，并进行形态学观察，... 详细信息

为研究红曲黄色素MC、MS和AK的抗炎机理，从红曲菌CP-1固态发酵后得到的红曲米中提取分离出红曲黄色素MC，并使用TLC和HPLC进行纯度分析。构建2 μg/mL的脂多糖诱导人thp-1巨噬细胞和小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症模型，并进行形态学观察，利用MTT法测定细胞活力，以MS和AK作为参比，实时荧光定量法和酶联免疫吸附试验测定红曲黄色素MC对脂多糖诱导的thp-1细胞和RAW264.7细胞中IL-6和TNF-α的影响。结果表明，提取出的红曲黄色素MC纯度能达到98%以上，可用于细胞实验。6 μg/mL的MC、MS和AK诱导thp-1细胞24h后，细胞存活率均能达到90％以上，符合实验要求。6 μg/mL的MC、MS和AK处理thp-1细胞和RAW264.7细胞24h后，在转录水平和翻译水平上均显著抑制了IL-6的表达（Pthp-1细胞和RAW264.7细胞中TNF-α的表达量（P细胞TNF-α的分泌（P<0.01）。

关键词：红曲黄色素 thp-1细胞 RAW264.7细胞抗炎作用促炎细胞因子

基于CRISPR/Cas9技术构建IDO1基因敲除的thp-1细胞株及其表型研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

免疫学杂志 2024年第1期40卷 87-95页

作者：李雪银吴传新刘慧玲李丽程莎孙航重庆医科大学附属第二医院感染科重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆医科大学病毒性肝炎研究所401336 重庆医科大学附属第二医院肝胆外科 401336

目的采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的thp-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成... 详细信息

目的采用CRISPR/Cas9技术构建吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)基因敲除的thp-1细胞株,为研究IDO1在巨噬细胞中的作用提供细胞模型。方法设计靶向IDO1基因的3条向导RNA(guide RNA,gRNA),分别构建IDO1-gRNA重组质粒,酶切及测序鉴定后,包装成Lenti-IDO1-gRNA慢病毒。利用Cas9慢病毒感染thp-1细胞获得稳定表达Cas9蛋白的细胞株,再经Lenti-IDO1-gRNA慢病毒感染敲除IDO1基因,有限稀释法获得单克隆细胞株。T7E1酶切检测gRNA打靶效率,PCR产物测序和Western blot鉴定IDO1基因敲除效果。CCK8法检测IDO1基因敲除对thp-1细胞增殖活性的影响,流式细胞术检测对巨噬细胞标志物CD11b、CD68和CD14表达的影响,中性红法检测巨噬细胞吞噬功能。结果成功构建了3种IDO1-gRNA重组质粒,3条gRNA均能有效编辑IDO1基因,以gRNA2编辑效率最高。经PCR产物测序和Western blot验证获得了3株thp-1 IDO1-KO单克隆细胞株,并发现IDO1基因敲除可抑制thp-1细胞增殖,下调thp-1巨噬细胞CD11b、CD68表达,上调CD14表达,增强thp-1巨噬细胞吞噬功能。结论成功构建IDO1基因敲除的thp-1细胞株;IDO1对thp-1细胞增殖活性、分化调节以及thp-1巨噬细胞吞噬功能调节有重要作用,为后续进一步探讨IDO1基因在巨噬细胞中的功能及机制研究奠定基础。

关键词： CRISPR/Cas9 吲哚胺-2,3-双加氧酶1 基因敲除 thp-1细胞巨噬细胞

登革2型病毒在RAW264.7细胞和thp-1细胞中复制能力及免疫激活能力的比较

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

医学理论与实践 2024年第17期37卷 2897-2901页

作者：牟小会吴家红张海龙匡贵榕贵州省安顺市人民医院生殖医学科 561000 贵州医科大学基础医学院病原生物学实验室贵州省安顺市人民医院医学检验科

目的:比较登革2型病毒(DENV2)在RAW264.7细胞和thp-1细胞中的复制能力及DENV2对这两种靶细胞的免疫激活作用。方法:将DENV2病毒液与靶细胞(RAW264.7细胞和thp-1细胞)分别孵育6h、12h、24h,孵育结束后收集细胞,Trizol法提取不同时间的细... 详细信息

目的:比较登革2型病毒(DENV2)在RAW264.7细胞和thp-1细胞中的复制能力及DENV2对这两种靶细胞的免疫激活作用。方法:将DENV2病毒液与靶细胞(RAW264.7细胞和thp-1细胞)分别孵育6h、12h、24h,孵育结束后收集细胞,Trizol法提取不同时间的细胞总RNA,检测RNA纯度和浓度后逆转录为cDNA,使用qRT-PCR检测样本中病毒目的基因DENV2 E及细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-β、ISG15、CCL2的mRNA相对表达量。结果:DENV2感染RAW264.7细胞和thp-1细胞后,DENV2 E基因的表达量均显著上调(P细胞中的相对表达量一致;24h时,DENV2 E基因在RAW264.7细胞中的相对表达量显著高于thp-1细胞。与未感染DENV2组相比,DENV2感染RAW264.7细胞和thp-1细胞6h、12h、24h后,IL-1β、IL-6、TNF-α、ISG15、IFN-β、CCL2基因的相对表达量均显著升高(P细胞中的相对表达量显著高于thp-1细胞。结论:DENV2在RAW264.7细胞中的复制能力强于thp-1细胞的复制能力,且DENV2在RAW264.7细胞中具有更强的免疫激活能力。

关键词： DENV2 RAW264.7细胞 thp-1细胞复制能力免疫激活

thp-1细胞吞噬贝氏柯克斯体后的比较蛋白质组学研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病学报 2006年第7期22卷 609-612,616页

作者：李丽莉王恒樑温博海朱力袁静冯而玲陈梅玲军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物国家重点实验室北京100071 军事医学科学院生物工程研究所病原微生物国家重点实验室北京100071

目的采用比较蛋白质组学方法研究了人类单核细胞thp-1感染贝氏柯克斯体后蛋白质表达谱的差异变化。方法利用双向电泳(2-DE)技术对吞噬了毒力株贝氏柯克斯体的thp-1细胞和未吞噬贝氏柯克斯体的thp-1细胞总蛋白进行分离,两组间差异蛋白点... 详细信息

目的采用比较蛋白质组学方法研究了人类单核细胞thp-1感染贝氏柯克斯体后蛋白质表达谱的差异变化。方法利用双向电泳(2-DE)技术对吞噬了毒力株贝氏柯克斯体的thp-1细胞和未吞噬贝氏柯克斯体的thp-1细胞总蛋白进行分离,两组间差异蛋白点利用基质辅助激光解析/电离串联飞行时间质谱技术进行鉴定。每个蛋白质点的肽指纹图谱均使用Mascot在NCBInr蛋白质数据库中进行检索。结果共分离鉴定到8个与贝氏克柯斯体感染相关的蛋白质。这些蛋白主要位于细胞质中,其功能涉及核酸合成,细胞骨架结构,RNA的代谢和转运,细胞周期调控以及细胞防御等。结论上述发现为研究宿主细胞与贝氏克柯斯体相互作用提供了新线索。

关键词： thp-1细胞贝氏克柯斯体蛋白质组双向电泳差异表达

λ-卡拉胶引发thp-1细胞免疫响应的结构因素及机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国食品学报 2013年第4期13卷 17-22页

作者：毛海花陈海敏王峰徐炜烽严小军宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室浙江宁波315211 宁波医疗中心李惠利医院检验科浙江宁波315040

目的:探讨λ-卡拉胶及其降解物引发thp-1单核/巨噬细胞免疫响应的结构因素及其反应机制。方法:thp-1细胞经PMA诱导分化为巨噬细胞;λ-卡拉胶及其不同分子质量的降解产物刺激thp-1细胞,采用ELISA技术检测TNF-α含量,确定引发免疫响应的λ... 详细信息

目的:探讨λ-卡拉胶及其降解物引发thp-1单核/巨噬细胞免疫响应的结构因素及其反应机制。方法:thp-1细胞经PMA诱导分化为巨噬细胞;λ-卡拉胶及其不同分子质量的降解产物刺激thp-1细胞,采用ELISA技术检测TNF-α含量,确定引发免疫响应的λ-卡拉胶种类;采用CBA技术检测卡拉胶处理后各类免疫因子的表达;用WesternBlot检测由卡拉胶引起的免疫响应的信号通路。结果:分子质量10～40ku的卡拉胶降解产物(λ-10-40k)最易引起thp-1细胞的免疫响应,用10μg/mLλ-10-40k处理24h,可增加TNF-α的分泌量,为空白对照的2.2倍(Pthp-1细胞产生TNF-α,并通过协同效应,增加LPS刺激的TNF-α、IL-1β及IL-6的表达,放大LPS诱导的炎症反应。结论:分子质量范围10～40ku的卡拉胶降解产物易通过TLR4-NF-κB途径及MAPK/ERK途径引发thp-1单核/巨噬细胞免疫响应,并协同增加LPS刺激的炎症反应。

关键词： λ-卡拉胶 thp-1细胞 TNF-α 协同 LPS

NF-κBp50参与IL-4在thp-1细胞中诱导DC-SIGN的表达(英文)

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物化学与生物物理进展 2008年第1期35卷 50-55页

作者：许利军常秀春姚航平吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室杭州310003 福州市传染病医院福州350025 杭州师范大学钱江学院杭州310000

树突状细胞表面特异的胞间黏附分子3捕获非整合素(DC-specific intercellular adhesion molecule-3-grabbing nonintegrin,DC-SIGN)是树突状细胞表面特异的蛋白,在抗原呈递过程中起关键作用.这种特异性的表达和DC-SIGN的调节机制有关.... 详细信息

树突状细胞表面特异的胞间黏附分子3捕获非整合素(DC-specific intercellular adhesion molecule-3-grabbing nonintegrin,DC-SIGN)是树突状细胞表面特异的蛋白,在抗原呈递过程中起关键作用.这种特异性的表达和DC-SIGN的调节机制有关.到目前为止,DC-SIGN表达调控的机制还不是很清楚.IL-4是诱导DC-SIGN表达的最重要的细胞因子之一,而NF-κB是调控细胞信号转导的一个重要调控因子,两者都和DC-SIGN的表达调节相关.研究了IL-4和NF-κB对DC-SIGN启动子活性、对DC-SIGN表达的影响以及IL-4和NF-κB之间相互作用的关系.发现:DC-SIGN启动子中NF-κB位点缺失可以使DC-SIGN启动子活性下降大约50%,NF-κBp50可以促进DC-SIGN在thp-1细胞的表达,IL-在thp-1细胞诱导DC-SIGN表达的同时,也促进了NF-κBp50的表达.这些结果显示,在thp-1细胞中NF-κBp50参与IL-4诱导的DC-SIGN表达.

关键词：核转录因子κBp50 树突状细胞表面特异的胞间黏附分子3捕获非整合素白细胞介素4 thp-1细胞

粒细胞集落刺激因子对thp-1细胞Toll样受体4 mRNA表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复旦学报（医学版） 2004年第4期31卷 351-353页

作者：赵媛张顺财曹中伟周康复旦大学附属中山医院消化内科上海200032

目的　观察不同浓度不同时间下粒细胞集落刺激因子 (G CSF)刺激后 ,thp 1细胞表达Toll样受体 4mRNA以及细胞因子TNF α的变化。方法　实验采用人thp 1细胞 ,以 5 0、5 0 0及 10 0 0ng/mL的G CSF分别刺激 4和 2 4h ,继而以 10ng/mL内毒... 详细信息

目的　观察不同浓度不同时间下粒细胞集落刺激因子 (G CSF)刺激后 ,thp 1细胞表达Toll样受体 4mRNA以及细胞因子TNF α的变化。方法　实验采用人thp 1细胞 ,以 5 0、5 0 0及 10 0 0ng/mL的G CSF分别刺激 4和 2 4h ,继而以 10ng/mL内毒素刺激 4 5min。以RT PCR法分析Toll样受体 4 (TLR4 )mRNA水平 ,ELISA法测定细胞因子TNF α。结果　细胞经G CSF刺激后TLR4基因表达增加 ,细胞分泌TNF α上升 ,且随着G CSF刺激浓度的增加 ,TNF α分泌随之增加。刺激 2 4与 4h比较 ,TNF α分泌也有增加。结论　G CSF可刺激thp 1细胞TLR4mRNA表达及TNF α分泌 ,且其增加程度与G

关键词：粒细胞集落刺激因子 thp-1细胞 Toll样受体4 mRNA 表达

thp-1细胞系白血病干细胞的检测、分选及鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

郑州大学学报（医学版） 2013年第2期48卷 210-213页

作者：王颖超冯磊殷楚云魏永纬马丽娜王春美盛光耀郑州大学第一附属医院儿科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州450052

目的:探讨人急性单核细胞白血病thp-1细胞株中是否存在白血病干细胞(LSCs),并比较该LSCs与非LSCs亚群的生物学特性。方法:应用流式细胞术测定thp-1细胞中LSCs(CD34+CD38-细胞)的比例并分析LSCs与非LSCs的细胞周期。实时荧光定量PCR检测... 详细信息

目的:探讨人急性单核细胞白血病thp-1细胞株中是否存在白血病干细胞(LSCs),并比较该LSCs与非LSCs亚群的生物学特性。方法:应用流式细胞术测定thp-1细胞中LSCs(CD34+CD38-细胞)的比例并分析LSCs与非LSCs的细胞周期。实时荧光定量PCR检测2种细胞中ABCG2、ABCB1耐药基因和Bcl-2、Bax凋亡基因的表达。将分选的LSCs移植到NOD/SCID小鼠,观察其致瘤能力。结果:thp-1细胞中存在CD34+CD38-的LSCs,比例为(0.12±0.06)%。大部分的LSCs处于细胞静止期,G0/G1期比例达(94.03±1.61)%;非LSCs增殖期细胞比例相对较高,S/G2/M期细胞比例为(56.58±1.59)%。实时荧光定量PCR结果显示:LSCs中ABCG2、ABCB1及Bcl-2的表达水平高于非LSCs(t=20.725、22.179、13.707,Pthp-1细胞至少需要1×106才能成瘤。结论:thp-1细胞株中存在LSCs,这群细胞比例低,大部分处于静止期,具有干细胞生物学活性及体内致瘤性,可能与白血病的耐药和复发有关。

关键词： thp-1细胞白血病干细胞 ABC转运体 NOD SCID小鼠

感染布氏杆菌后的thp-1细胞的蛋白质组学研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2006年第4期46卷 629-634页

作者：高永辉任昶应天翼王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室免疫室北京100071 北京朝阳医院北京100043 军事医学科学院生物工程研究所北京100071

在布氏杆菌(Brucella)的感染免疫过程中,单核巨噬细胞的应答起着非常关键的作用,而毒力不同的布氏杆菌引起的宿主反应截然不同。用双向电泳技术对thp-1单核细胞受毒力不同的布氏杆菌株侵袭后的全细胞蛋白谱进行差异比较和分析,共发现了3... 详细信息

在布氏杆菌(Brucella)的感染免疫过程中,单核巨噬细胞的应答起着非常关键的作用,而毒力不同的布氏杆菌引起的宿主反应截然不同。用双向电泳技术对thp-1单核细胞受毒力不同的布氏杆菌株侵袭后的全细胞蛋白谱进行差异比较和分析,共发现了38个差异表达的蛋白质点。这些点经过胶内酶切后进行MALDI-TOF质谱鉴定,每个蛋白质点的肽质量指纹图谱都在人类的蛋白质组数据库中用Mascot进行检索后,发现这些差异表达的蛋白主要集中在结构蛋白,信号传导途径和物质代谢等领域,还有一些功能未知的蛋白。这一结果为研究布氏杆菌的感染与致病机制提供了方向,对深入探讨病原菌-宿主的相互作用模式具有参考价值。

关键词：布氏杆菌 thp-1细胞比较蛋白质组学双向电泳质谱