检索结果-南通市图书馆

基于tgf-β1/sp-1建立抗干眼的中药高通量筛选体系及其在密蒙花中的应用

时珍国医国药 2023年第5期34卷 1256-1261页

作者：陈立浩时健刘倩宏姚小磊彭清华王会英王贤婧李建超湖南中医药大学湖南长沙410208 中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 邢台医学高等专科学校河北邢台054000 西安市中医医院陕西西安710021

目的建立1种基于tgf-β1/sp-1的抗干眼的中药高通量筛选体系,并旨在筛选出3种左右的密蒙花有效组分,检验该体系的实用性。方法(1)建立并评价筛选体系:首先获取质粒p4GCbox-ZsGreen1DR,将质粒转染大鼠泪腺上皮细胞(LGEC),使用G418筛选后... 详细信息

目的建立1种基于tgf-β1/sp-1的抗干眼的中药高通量筛选体系,并旨在筛选出3种左右的密蒙花有效组分,检验该体系的实用性。方法(1)建立并评价筛选体系:首先获取质粒p4GCbox-ZsGreen1DR,将质粒转染大鼠泪腺上皮细胞(LGEC),使用G418筛选后得到sp-1的反应性报告细胞株LGEC-ZsGreen1DR;经过实验培养后,加入浓度为12.5 ng/ml的tgf-β1,借助荧光显微镜来检测每一个时相点大鼠LGEC中ZsGreen1-DR的表达;把细胞株(LGEC-ZsGreen1DR)冻存30天后,再经过复苏并传代培养30天,之后加入tgf-β1,观测每一个时相点的ZsGreen1-DR表达结果。(2)筛选出密蒙花抗干眼的有效组分:以不同溶剂分离联合大孔树脂分离的方法制备密蒙花中药组分库,建立密蒙花的中药组分库,共含有39种组分;利用24孔板测定荧光平均光密度,继而筛选密蒙花颗粒抗干眼症的有效组分。结果(1)当LGEC-ZsGreen1DR细胞刚刚加入tgf-β1时,只能在荧光显微镜(400×)下观察到少量带有弱荧光的细胞;当在4 h时,显微镜(100×)下就可见细胞所带的绿色荧光,并且能够看到多处发光点;荧光在12 h时达到了最高位,在24h时出现明显跌落。把细胞株(LGEC-ZsGreen1DR)冻存30天,再经复苏并传代培养30天后,也得到了类似结果。(2)筛选出的密蒙花抗干眼的有效组分为:2-2、2-2-3、2-2-4。结论构建的基于tgf-β1/sp-1的高通量的中药筛选体系,具备比较好的实用性与稳定性,可为抗干眼的中药有效组分开发提供了实验基础。

关键词：干眼 tgf-β1/sp-1 密蒙花高通量筛选体系中药有效组分

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：