检索结果-南通市图书馆

温州医学院学报 2014年第3期44卷 161-165页

作者：陈潇周浩周希蔡洁洁陈灵芝郑高暑黄伟剑张怀勤温州医科大学附属第一医院心内科浙江温州325015 温州市中心医院检验科浙江温州325000

目的 :探讨松弛素(RLX)对tgf-β诱导的内皮细胞间质化现象的影响。方法:采用体外分离的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为体外细胞模型,通过tgf-β10 ng/mL诱导内皮细胞间质化,100 ng/mL和200 ng/mL RLX分别预处理,再与tgf-β联合培养48 h... 详细信息

目的 :探讨松弛素(RLX)对tgf-β诱导的内皮细胞间质化现象的影响。方法:采用体外分离的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为体外细胞模型,通过tgf-β10 ng/mL诱导内皮细胞间质化,100 ng/mL和200 ng/mL RLX分别预处理,再与tgf-β联合培养48 h。光镜下观察细胞形态学改变,CCK-8实验和transwell实验检测细胞增殖和迁移能力,免疫荧光单双染技术观察vimentin和CD31的表达变化,蛋白免疫印迹技术观察各实验组vimentin、CD31、ve-cadherin和α-SMA的蛋白表达。结果:阴性对照组内皮细胞呈铺路石样生长,tgf-β诱导组细胞形态向梭形转化,呈扩散迁移趋势。与阴性对照组相比,tgf-β诱导组细胞增殖、迁移能力明显增强;而RLX可抑制tgf-β诱导的增殖和迁移。免疫荧光单染结果显示,与阴性对照组相比,tgf-β诱导组内皮细胞特异性蛋白CD31表达下调而间质细胞标志性蛋白vimentin明显上升;与tgf-β组相比,RLX联合tgf-β处理组CD31表达上调而vimentin表达下调。免疫荧光双染结果显示,阴性对照组以内皮性质的细胞为主,仅存在少量的CD31和vimentin双阳性细胞;tgf-β诱导组双阳性细胞明显增多;与tgf-β组相比,RLX联合tgf-β处理组间质效应的双阳性细胞下调,而内皮效应的双阳性细胞增多。蛋白免疫印迹结果显示,与阴性对照组相比,tgf-β诱导组内皮细胞特异性蛋白CD31(0.36±0.076 vs 0.88±0.086)和ve-cadherin(0.54±0.046 vs 1.09±0.13)表达下调而间质细胞标志性蛋白vimentin(0.72±0.102 vs 0.21±0.081)和α-SMA(0.88±0.084 vs 0.24±0.046)明显上升(ptgf-β组相比,RLX联合tgf-β处理组CD31(0.67±0.09、0.59±0.12 vs 0.36±0.076)和ve-cadherin(0.85±0.09、0.72±0.064 vs 0.54±0.046)表达上调,而vimentin(0.56±0.011、0.48±0.06 vs 0.72±0.102)和α-SMA(0.65±0.081、0.54±0.032 vs 0.88±0.084)表达下降(ptgf-β诱导的内皮细胞向间质化细胞转化。

关键词：松弛素内皮细胞间质化 tgf—p 心肌纤维化

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