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植物保护 2022年第2期48卷 130-138页

作者：徐雪芬李惠霞倪春辉李文豪李焕宇陈垣胡芳弟甘肃农业大学植物保护学院甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室兰州730070 甘肃农业大学农学院兰州730070 兰州大学药学院兰州730030

为明确甘肃省党参根腐病病原菌种类、优势种及病原菌种群在不同区域的分布差异,采用组织分离法对甘肃省陇西、渭源、临洮、岷县和宕昌等5个党参主产县的病样进行分离纯化和柯赫氏法则验证,通过rDNA-ITS、tef-1α序列聚类分析鉴定不同区... 详细信息

为明确甘肃省党参根腐病病原菌种类、优势种及病原菌种群在不同区域的分布差异,采用组织分离法对甘肃省陇西、渭源、临洮、岷县和宕昌等5个党参主产县的病样进行分离纯化和柯赫氏法则验证,通过rDNA-ITS、tef-1α序列聚类分析鉴定不同区域病原菌种类及分离频率。结果发现,引起甘肃省党参根腐病的病原菌主要为镰孢属Fusarium真菌,分离频率为72.66%,包括尖镰孢F.oxysporum、锐顶镰孢F.acuminatum、茄镰孢F.solani、木贼镰孢F.equiseti和燕麦镰孢F.avenaceum等9个种,其中尖镰孢和锐顶镰孢为优势种,分离频率分别为41.80%和16.41%。5个主产县党参根腐病病原种类及其分离频率各不相同,但优势属均为镰孢属,优势种均为尖镰孢。其中渭源县分离的病原菌种类最多,分离到镰孢属的6个种;其次为岷县,分离到镰孢属的5个种;临洮县分离的病原菌种类最少。部分镰孢菌在甘肃省党参产区为首次发现。

关键词：党参党参根腐病 rDNA-ITS tef-1α 地域性差异

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甘肃省武威市荷兰豆根腐病病原菌种类的鉴定

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甘肃农业大学学报 2023年第2期58卷 109-115页

作者：张敏刘永刚李惠霞石明明韩变 Boakye Thomas Afriyie 乔万强魏雪娟甘肃农业大学植物保护学院甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室甘肃兰州730070 甘肃省农业科学院植物保护研究所甘肃省无公害农药工程实验室甘肃兰州730070

【目的】明确武威市荷兰豆根腐病病原菌的种类,可为该病害的及时有效防治提供理论依据。【方法】采集荷兰豆根腐病株并分离和纯化病原菌,通过形态学特征结合ITS-rDNA与tef-1α基因序列分析鉴定种类,并按照柯赫氏法则测定其致病性。【结... 详细信息

【目的】明确武威市荷兰豆根腐病病原菌的种类,可为该病害的及时有效防治提供理论依据。【方法】采集荷兰豆根腐病株并分离和纯化病原菌,通过形态学特征结合ITS-rDNA与tef-1α基因序列分析鉴定种类,并按照柯赫氏法则测定其致病性。【结果】分离得到16株Fusarium spp.,其中3株为燕麦镰孢菌Fusarium avenaceum,分离频率为18.75%;13株为茄镰孢菌F.solani,分离频率为81.25%,后者为优势种类。荷兰豆致病性试验症状表现与田间的基本一致,接种7 d后发病率为100%,病情指数为16.5~38.0,其中燕麦镰孢菌W14-1病情指数最高,为38.0;茄镰孢菌W8病情指数最低,为16.5。【结论】茄镰孢菌和燕麦镰孢菌是引起甘肃省武威市荷兰豆根腐病的病原,茄镰孢为优势病原。

关键词：形态学特征 rDNA-ITS tef-1α 茄镰孢菌燕麦镰孢菌

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贵州玉米穗腐病致病镰刀菌的种群结构及产毒基因型研究

贵州玉米穗腐病致病镰刀菌的种群结构及产毒基因型研究

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作者：尚国富贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:镰刀菌是一种重要的植物病原真菌和产霉菌毒素真菌,由于其可造成农作物产量和品质的下降,给各国造成了巨大的损失。玉米作为我国主要的粮饲兼用的作物及重要的工业原料,种植面积大,在国民经济和农业生产上的作用日益突出。贵州属... 详细信息

目的:镰刀菌是一种重要的植物病原真菌和产霉菌毒素真菌,由于其可造成农作物产量和品质的下降,给各国造成了巨大的损失。玉米作为我国主要的粮饲兼用的作物及重要的工业原料,种植面积大,在国民经济和农业生产上的作用日益突出。贵州属于西南山地玉米种植区,玉米分布广泛。因此,本研究旨在系统调查贵州省玉米籽粒中镰刀菌的侵染情况,分离致病镰刀菌并分析其种群结构及产毒基因型,为深入研究该地区镰刀菌的防控策略以及致病和产毒机制提供依据。方法:采集贵州省76个县的穗腐玉米样品175份,利用可用于检测镰刀菌的Fv SG7-AP融合蛋白对样品进行ELISA检测,并运用组织分离法从镰刀菌侵染样品中分离、纯化镰刀菌。随后,提取镰刀菌的DNA,采用引物对EF1T/EF2T和ITS4/ITS5分别对其翻译延伸因子（translation elongation factor 1α,tef-1α）区域以及核糖体内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）进行PCR扩增和测序,并利用MEGA-X-10.0.5软件构建基于tef-1α的系统发育树。针对首次从穗腐玉米样品中分离到的F.miscanthi菌种进行形态鉴定,并扩增其RPB2、mt SSU r DNA和β-tubulin基因片段进行分子鉴定,同时进行致病性检测。最后,利用产毒基因特异性引物对镰刀菌进行毒素化学型检测,并通过液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）进行验证。结果:本研究发现:（1）有163份样品受不同程度的镰刀菌侵染,侵染率高达93.14%,检测出镰刀菌侵染的玉米样品分布在贵州省的73个县。运用组织分离法对病原真菌分离后通过形态学初步鉴定,共分离出139份疑似镰刀菌菌株。进一步分子鉴定显示,共分离得到123株镰刀菌,涵盖贵州省60个县,分离率达82.19%。本研究共检出16种镰刀菌,其中南方镰刀菌F.meridionale为优势种,其次是轮枝镰刀菌F.verticillioides和F.fujikuroi。同时,这些镰刀菌属于6类镰刀菌复合种,其中F.sambucinum复合种（FSAMSC）和F.fujikuroi复合种（FFSC）占87.8%。（2）首次从穗腐玉米样品中分离到5株F.miscanthi,经致病性测试确认F.miscanthi能侵染玉米导致穗腐病。（3）从69株（56.1%）镰刀菌分离株中扩增出毒素合成相关基因（NIV、ZEN、DON、FBs）,检测到NIV、NIV+ZEN、DON+ZEN、FBs关键合成基因菌株数分别为3、35、7、24,表明这些镰刀菌具有潜在的产毒素能力,其中,F.meridionale的产毒基因型主要是NIV,其次是ZEN;FBs关键合成基因主要检出于F.verticillioides,DON关键合成基因全检出于F.graminearum复合种（FGSC）,具有产生NIV和ZEN潜力的镰刀菌主要分布在贵州省西部和北部,而具有产生FBs潜力的镰刀菌主要集中在贵州省东南部。结论:贵州玉米穗腐病致病镰刀菌分布广泛、种群丰富,优势致病菌为F.meridionale,其次是F.verticillioides和F.fujikuroi,并首次发现F.miscanthi能侵染玉米引起穗腐。同时,贵州省玉米穗腐病致病镰刀菌的产毒基因型表现出明显差异,具有产毒潜力的镰刀菌存在区域分布规律。因此,加强对镰刀菌及其产毒情况的调查和监控,以及在玉米耕种、收获及贮藏期间采取有效的防治措施对于保障人畜健康非常重要。

关键词：镰刀菌真菌侵染 tef-1α ITS序列遗传特性产毒基因型

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两种瓜类镰刀菌的多重PCR检测

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华北农学报 2014年第B12期29卷 44-47页

作者：严蕾艳张宴瑜马凯慧宋慧王毓洪宁波市农业科学研究院宁波市瓜菜育种重点实验室浙江宁波315040 浙江农林大学农业与食品科学学院浙江临安311300

为了更快更准确地在病菌潜伏期或发病初期鉴定出尖孢镰刀菌引起的瓜类枯萎病和茄病镰刀菌引起的瓜类根腐病这2种病害,根据尖孢镰刀菌和茄病镰刀菌的翻译延长因子tef1-α序列设计了3条种特异性引物。引物对FO-F和Fu-R可以从尖孢镰刀菌中... 详细信息

为了更快更准确地在病菌潜伏期或发病初期鉴定出尖孢镰刀菌引起的瓜类枯萎病和茄病镰刀菌引起的瓜类根腐病这2种病害,根据尖孢镰刀菌和茄病镰刀菌的翻译延长因子tef1-α序列设计了3条种特异性引物。引物对FO-F和Fu-R可以从尖孢镰刀菌中扩增到1条228 bp的片段,引物对FS-F和Fu-R可以从茄病镰刀菌中扩增到1条347 bp片段,并且3条引物FO-F、FS-F和Fu-R可以同时在1个PCR反应中扩增到2个片段,而这2对引物都不能从其他病原真菌中扩增到任何条带。结果表明,该多重PCR检测方法可以同时鉴定样品中的2种镰刀菌。

关键词：尖孢镰刀菌茄病镰刀菌多重PCR检测葫芦科作物 tef-1α

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