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基于PI3K/AKT/mTOR通路探究化合物tdb调节乳腺癌MDA-MB-231细胞生长及机制研究

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基于PI3K/AKT/mTOR通路探究化合物TDB调节乳腺癌MDA-MB-231细胞生...

作者：黄亚楠海南医学院

学位级别：硕士

目的:本论文旨在探索化合物5-{[7-(金刚烷胺-1-基)-6-(2-甲氧乙氧基甲氧基)]-萘-2-基}-苯并[d]噁唑-2-胺(以下简称tdb)诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡和抑制其增殖作用及与PI3K/AKT/m TOR信号通路相关的抗凋亡机制,为tdb应用于临床抗... 详细信息

目的:本论文旨在探索化合物5-{[7-(金刚烷胺-1-基)-6-(2-甲氧乙氧基甲氧基)]-萘-2-基}-苯并[d]噁唑-2-胺(以下简称tdb)诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡和抑制其增殖作用及与PI3K/AKT/m TOR信号通路相关的抗凋亡机制,为tdb应用于临床抗乳腺癌治疗奠定理论基础。方法:1.考察tdb对MDA-MB-231细胞活力的影响:体外培养MDA-MB-231细胞,取对数生长期MDA-MB-231细胞,分别用不同浓度tdb(0、15、20、30、40、50μM)处理细胞,CCK-8法检测tdb在不同时间(24、48和72 h)对细胞活力的影响;2.考察tdb对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响:体外培养MDA-MB-231细胞,给予不同浓度的tdb进行干预,分组设计为:阴性对照(NC)组、tdb(15、25和35μM)组和阳性对照(LY294002)组,从以下几个方面进行考察:(1)细胞集落形成实验检测化合物tdb抑制对细胞集落的形成影响;(2)细胞划痕实验检测化合物tdb对细胞愈合的抑制情况;(3)流式细胞术检测化合物tdb对细胞凋亡的诱导;(4)Real-Time PCR检测化合物tdb对PI3K、AKT和m TOR的基因调控情况;(5)免疫荧光检测化合物tdb对PI3K、AKT、m TOR、Bcl-2和Bax等指标的荧光强度影响;(6)蛋白免疫印迹法(WB)检测tdb对PI3K、AKT、m TOR、p-PI3K、p-AKT、p-m TOR、Bcl-2和Bax蛋白的调节。3.考察tdb和PI3K/AKT/m TOR激活剂(YS-49)联用对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响:体外培养MDA-MB-231细胞,给予不同的药物进行干预,实验分组为:NC组、YS-49组、tdb(35μM)组、“tdb+YS-49”联用组;考察方法同上2.(1)、(2)、(3)、(4)、(5)和(6)。结果:1.不同浓度的tdb对MDA-MB-231细胞的活力均有明显抑制作用。tdb作用MDA-MB-231细胞24h后的IC为:24.2μM。***对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响结果:tdb不同浓度处理细胞后显示:(1)细胞集落数量比NC组均显著减小;(2)细胞划痕12 h和24 h的愈合率比NC组均显著减小;(3)细胞凋亡率比NC组显著增大;(4)细胞基因(PI3K、AKT和m TOR)表达水平比NC组显著降低。(5)除m TOR的荧光强度和NC组无明显差异外,PI3K、AKT、Bcl-2和Bax的荧光强度比NC组显著降低。(6)除了p-m TOR蛋白表达水平和NC组无显著性差异外,PI3K、AKT、m TOR、p-PI3K、p-AKT、Bcl-2和Bax蛋白表达水平比NC组显著降低。***和YS-49联用对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响结果:(1)与(YS-49+tdb)组相比,YS-49组的细胞集落数量显著增加,tdb组的细胞集落显著减少;(2)与(YS-49+tdb)组相比,YS-49组的细胞划痕愈合率显著增加,tdb组的细胞划痕愈合率显著减少;(3)与YS-49组相比,(YS-49+tdb)组的细胞凋亡率显著增加,tdb组的细胞凋亡率和(YS-49+tdb)组无显著性差异;(4)与(YS-49+tdb)组相比,YS-49组的基因(PI3K、AKT和m TOR)表达水平显著增高,tdb组基因表达水平显著降低;(5)与(YS-49+tdb)组相比,tdb组PI3K、AKT、m TOR、Bcl-2和Bax蛋白荧光强度明显降低,YS-49组明显升高;(6)与(YS-49+tdb)组相比,YS-49组YS-49组PI3K、m TOR、p-PI3K、p-AKT和p-m TOR蛋白表达水平显著降低,tdb组PI3K和Bax蛋白表达水平显著降低,AKT、m TOR、p-PI3K、p-AKT、p-m TOR和Bax蛋白表达水平均无显著性差异。结论:***对MDA-MB-231细胞的增殖有显著抑制作用;tdb可以诱导MDA-MB-231细胞发生凋亡。***可以下调PI3K、AKT和m TOR等基因的表达,且抑制了PI3K、AKT、m TOR、p-PI3K、p-AKT、p-m TOR、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平,tdb可能通过抑制PI3K/AKT/m TOR通路,诱导MDA-MB-231细胞凋亡和抑制该细胞系增殖。

关键词： MDA-MB-231细胞苯并噁唑类衍生物 tdb PI3K/AKT/mTOR 凋亡增殖

tdb、硫糖铝治疗消化性溃疡60例疗效观察

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铁道医学 1987年第2期 116-117页

作者：姜钰峰沙荣周文琳戴学军南京医学院第二附属医院

我院应用三钾双枸橼酸络合铋(Tri—Potassium dicitrato-bismuthate;tdb或称De—No1)和硫糖铝(Sucralfate)治疗消化性溃疡共60例,现将其疗效观察分析报告如下:临床资料1.病例选择:本组病例经检查明确诊断为消化性溃疡的患者,随机分成两... 详细信息

我院应用三钾双枸橼酸络合铋(Tri—Potassium dicitrato-bismuthate;tdb或称De—No1)和硫糖铝(Sucralfate)治疗消化性溃疡共60例,现将其疗效观察分析报告如下:临床资料1.病例选择:本组病例经检查明确诊断为消化性溃疡的患者,随机分成两个治疗组,应用tdb及硫糖铝治疗各30例。

关键词：硫糖铝消化性溃疡消化道溃疡胃肠病 tdb 疗效观察

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日本建立隧道数据库(tdb)

铁道科技动态 1988年第1期 26-27页

作者：郭树棠

在隧道工程,土木工程的领域中,虽然利用数值计算进行设计的方法已有很大的发展,但需要参考与应用以往的施工、设计经验的情况还是很多的。过去,在收集、整理、管理资料方面,由于人力、财力等种种原因,使得资料不完整甚至会丢失。因此,... 详细信息

在隧道工程,土木工程的领域中,虽然利用数值计算进行设计的方法已有很大的发展,但需要参考与应用以往的施工、设计经验的情况还是很多的。过去,在收集、整理、管理资料方面,由于人力、财力等种种原因,使得资料不完整甚至会丢失。因此,日本东京第一工程局情报中心,建立了隧道数据库(Tunnel Data Bank(简称tdb)供日本铁路使用。

关键词： tdb 净空数据库数据库系统日本

三钾二枸椽酸铋(tdb)加服小诺霉素治疗慢性活动性胃炎疗效观察

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临床医学 1992年第1期12卷 26-28页

作者：徐安国徐济民上海第二医科大学第九人民医院上海200011

自1983年Warren和Marchall发现幽门螺旋菌(Helicobacter Pylori,简称HP)并证实其与慢性活动性胃炎密切相关以来,在本病治疗学上有了新的突玻。目前公认的最佳治疗方案是使用tdb同时加服一定剂量和疗程的抗生素。本文报道25例应用tdb加... 详细信息

自1983年Warren和Marchall发现幽门螺旋菌(Helicobacter Pylori,简称HP)并证实其与慢性活动性胃炎密切相关以来,在本病治疗学上有了新的突玻。目前公认的最佳治疗方案是使用tdb同时加服一定剂量和疗程的抗生素。本文报道25例应用tdb加服新型氨基糖甙类抗生素硫酸小诺霉素治疗HP阳性慢性活动性胃炎,旨在探讨两者联合治疗对HP的清除、临床和病理疗效。对象和方法本组分联合治疗组和单纯tdb治疗两组,每组各25例,两组年龄、性别、病变基本相似。

关键词： tdb 硫酸小诺霉素胃炎慢性

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tdb冲剂治疗胃溃疡近期疗效观察

重庆医学 1986年第5期 47-47页

作者：高思齐李宗明唐承薇皮新生朱治本雷自强周蓓重庆医科大学临床药理研究室重庆医科大学附属第一医院内科

三钾二枸橼酸铋剂（Tripotassium dicitrato-bismuthate简称tdb）治疗消化性胃溃疡，促使近期愈合，有良好的疗效。国内尚未见采用tdb冲剂的疗效报道。我院于1984年10月—1985年8月采用tdb冲剂治疗活动期胃溃疡患者，和安慰剂进行双盲... 详细信息

三钾二枸橼酸铋剂（Tripotassium dicitrato-bismuthate简称tdb）治疗消化性胃溃疡，促使近期愈合，有良好的疗效。国内尚未见采用tdb冲剂的疗效报道。我院于1984年10月—1985年8月采用tdb冲剂治疗活动期胃溃疡患者，和安慰剂进行双盲对比，观察近期疗效。现将结果报道于下：

关键词：冲剂剂型安慰剂空白剂胃溃疡消化性溃疡溃疡面积 tdb 近期疗效

TAI,TDT的性质及其与tdb的相互关系

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天文文献情报 1990年第3期3卷 51-51页

作者：程宗颐

应用甲氰咪胍或三钾二橼络合铋(tdb)治疗十二指肠溃疡的比较

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四川医学 1982年第2期 108-108页

作者：杨苏

本文介绍75例十二指肠溃疡患者在甲氰咪胍或 tdb 治疗后,应用双盲随机试验,对其治愈率及复发率进行比较。甲氰咪胍组37例,tdb 组38例,两组就年龄、性别、病程、胃肠道出血症状,烟酒嗜好,过去服用 tdb或甲氰咪胍情况及疾病的严重程度等... 详细信息

本文介绍75例十二指肠溃疡患者在甲氰咪胍或 tdb 治疗后,应用双盲随机试验,对其治愈率及复发率进行比较。甲氰咪胍组37例,tdb 组38例,两组就年龄、性别、病程、胃肠道出血症状,烟酒嗜好,过去服用 tdb或甲氰咪胍情况及疾病的严重程度等方面均相类似。治疗1或2个月后,两种药物的治愈率基本相同,甲氰咪胍组分

关键词： tdb 复发率十二指肠溃疡消化性溃疡烟酒嗜好

“tdb－Ⅰ型IC卡予付费电表系统”项目通过鉴定

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武汉纺织大学学报 1995年第2期 24-24页

“ＴＤＢ－Ⅰ型ＩＣ卡予付费电表系统”项目通过鉴定由我院徐进明老师及课题组承担的“ＴＤＢ－Ⅰ型ＩＣ卡予付费电表系统”项目于１９９５年６月２９日通过了由湖北省教育委员会组织的专家鉴定。到会专家一致认为：１、该项目提供的技... 详细信息

“ＴＤＢ－Ⅰ型ＩＣ卡予付费电表系统”项目通过鉴定由我院徐进明老师及课题组承担的“ＴＤＢ－Ⅰ型ＩＣ卡予付费电表系统”项目于１９９５年６月２９日通过了由湖北省教育委员会组织的专家鉴定。到会专家一致认为：１、该项目提供的技术资料齐全，数据真实准确；２、本系...

关键词：电表电度表 tdb IC

二枸椽酸络铋酸三钾(tdb)片或甲氰咪胍在十二指肠溃疡治疗中的作用

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国外医药.合成药.生化药.制剂分册 1985年第1期 60-60页

作者：李桂生

本文对40例经内窥镜证实的十二指肠溃疡(分为2组,每组20例),分别应用二枸檬酸络铋酸三钾(tdb)片或甲氰咪胍治疗6周,以比较其疗效,并观察疗程中两组病例胃液pH及菌群改变。tdb片用量为每次1片,每日4次。甲氰咪胍为200毫克,每日3次或400... 详细信息

本文对40例经内窥镜证实的十二指肠溃疡(分为2组,每组20例),分别应用二枸檬酸络铋酸三钾(tdb)片或甲氰咪胍治疗6周,以比较其疗效,并观察疗程中两组病例胃液pH及菌群改变。tdb片用量为每次1片,每日4次。甲氰咪胍为200毫克,每日3次或400毫克,每晚1次。治疗均于确诊后两周内开始。治疗前后作内窥镜检查,并测定血清铋及尿铋水平等。结果:tdb治疗组16例(80％)溃疡愈合;而甲氰咪胍组17例(85％)溃疡愈合,二组无明显差异。tdb组有11例发现口部色素增加,6例有轻度腹泻、头痛等症状。甲氰

关键词： tdb 甲氰咪胍溃疡愈合菌群改变轻度腹泻观察疗程枸椽酸内窥镜检查口部硝酸盐还原