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紫甘蓝提取物对X线照射后舌癌细胞双向作用的实验研究

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现代肿瘤医学 2021年第20期29卷 3538-3544页

作者：冯希霞李彩荣迈宇鹤穆宏北京中医药大学东方医院口腔科北京100078

目的:探讨紫甘蓝提取物(purple cabbage extract,PCE)对X线照射后舌癌细胞的双向作用。方法:将对数生长期的人舌鳞状细胞癌tca8113细胞及人正常口腔黏膜HOK细胞分为tca8113细胞对照组(tca CON)、tca8113细胞10μmol/L PCE组(tca PCE-10... 详细信息

目的:探讨紫甘蓝提取物(purple cabbage extract,PCE)对X线照射后舌癌细胞的双向作用。方法:将对数生长期的人舌鳞状细胞癌tca8113细胞及人正常口腔黏膜HOK细胞分为tca8113细胞对照组(tca CON)、tca8113细胞10μmol/L PCE组(tca PCE-10μmol/L)、tca8113细胞50μmol/L PCE组(tca PCE-50μmol/L)、tca8113细胞照射组(tca IR)、tca8113细胞照射加10μmol/L PCE组(tca IR+PCE-10μmol/L)、tca8113细胞照射加50μmol/L PCE组(tca IR+PCE-50μmol/L)及HOK细胞对照组(HOK CON)、HOK细胞10μmol/L PCE组(HOK PCE-10μmol/L)、HOK细胞50μmol/L PCE组(HOK PCE-50μmol/L)、HOK细胞照射组(HOK IR)、HOK细胞照射加10μmol/L PCE组(HOK IR+PCE-10μmol/L)、HOK细胞照射加50μmol/L PCE组(HOK IR+PCE-50μmol/L)。MTT实验检测加入不同浓度PCE对舌癌细胞tca8113及正常口腔黏膜HOK细胞增殖的影响;流式细胞术检测6 MeV X线直线加速器照射后(6 Gy)PCE对tca8113及HOK细胞凋亡的影响;qRT-PCR实验检测在加入不同浓度PCE作用下对照射后Caspase 3及Caspase 9表达的影响。结果:MTT结果显示,PCE可明显抑制tca8113细胞的增殖,其增殖抑制率随药物浓度的增加而升高,PCE对正常口腔黏膜HOK细胞增殖无明显的抑制率。流式细胞术结果显示,对于tca8113细胞,PCE显著提高了照射后tca8113细胞凋亡率(Ptca8113细胞,照射给药组(加10μmol/L PCE组、加50μmol/L PCE组)Caspase 3及Caspase 9的表达较单纯照射组明显上调(Ptca8113细胞起到放射增敏的作用,对正常口腔黏膜细胞起到放射防护作用,即PCE对X线照射后舌癌细胞起到双向作用。

关键词：紫甘蓝提取物舌癌 tca8113 细胞凋亡双向作用

MDP通过上调口腔癌细胞COX-2/PGE2表达促进其趋化和增殖(英文)

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中国现代医学杂志 2011年第9期21卷 1073-1078页

作者：余术宜王锋杨宏宇黄洪章汪海燕唐璟马平平中山大学光华口腔医学院广东广州510060 北京大学深圳医院口腔颌面外科广东深圳518036

目的研究细菌细胞壁成分MDP对口腔癌细胞tca8113 COX-2/PGE2表达的影响。方法 RT-PCR检测NOD2、COX-2在tca8113细胞的表达;不同浓度MDP刺激tca8113细胞后,采用RT-qPCR、MTT、ELISA及趋化实验分别检测其对COX-2/PGE2表达、细胞增殖和细... 详细信息

目的研究细菌细胞壁成分MDP对口腔癌细胞tca8113 COX-2/PGE2表达的影响。方法 RT-PCR检测NOD2、COX-2在tca8113细胞的表达;不同浓度MDP刺激tca8113细胞后,采用RT-qPCR、MTT、ELISA及趋化实验分别检测其对COX-2/PGE2表达、细胞增殖和细胞趋化的影响。结果①tca8113细胞表达NOD2、COX-2 mRNA;MDP促进COX-2 mRNA表达;②与对照组比较,MDP刺激tca8113后PGE2分泌、细胞增殖、趋化显著增加(P<0.05);与MDP组比较,MDP+NS-398组PGE2分泌、细胞增殖、趋化显著降低(P<0.05);与NS-398组比较,MDP+NS-398组细胞增殖仍然显著增强(P<0.05)。结论 MDP促进肿瘤细胞趋化和增殖,上调口腔癌细胞COX-2/PGE2表达是其作用机制之一。

关键词： MDP NOD2 COX-2 PGE2 tca8113

P75神经营养因子受体在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

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上海口腔医学 2011年第4期20卷 405-408页

作者：吴修胤佟冬冬张风河山东大学口腔医学院口腔颌面外科山东省口腔生物医学重点实验室山东济南250012

目的:研究口腔鳞状细胞癌中p75神经营养因子受体(p75NTR)的表达,探讨p75NTR作为预测口腔鳞状细胞癌预后指标及将其作为肿瘤干细胞标志物的可能性。方法:采用SP免疫化学方法,对舌鳞状细胞癌细胞系tca8113及43例手术切除口腔鳞状细胞癌标... 详细信息

目的:研究口腔鳞状细胞癌中p75神经营养因子受体(p75NTR)的表达,探讨p75NTR作为预测口腔鳞状细胞癌预后指标及将其作为肿瘤干细胞标志物的可能性。方法:采用SP免疫化学方法,对舌鳞状细胞癌细胞系tca8113及43例手术切除口腔鳞状细胞癌标本进行p75NTR表达的检测,另外选取5例癌旁组织及8例正常组织作为对照。应用SPSS16.0软件包,采用行×列表资料的χ2检验进行统计学分析。结果:p75NTR在tca8113细胞膜中阳性表达。43例口腔鳞状细胞癌组织中,p75NTR阳性表达33例,在癌旁组织及正常对照组中没有表达。p75NTR均定位于细胞膜上,于癌巢中分散分布,且常有聚集性分布趋势。p75NTR表达与临床分期(P<0.05)及有无淋巴结转移(P<0.05)相关。结论:p75NTR的表达可以作为预测口腔鳞状细胞癌预后的指标,但还不能将其单独作为肿瘤干细胞的标志物,其在肿瘤发生、发展中的作用及机制仍需进一步研究。

关键词：口腔鳞状细胞癌 tca8113 肿瘤干细胞 p75NTR

Isolation and Identification of Putative Oral Cancer Stem Cells

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口腔医学研究 2011年第5期27卷 389-392,396页

作者：张敏汤晓飞 Beijing Institute of Dental Research Capital Medical UniversitySchool of Stomatology

目的:分离鉴定口腔鳞癌细胞系tca8113中的肿瘤干细胞。方法:利用有限稀释的方法分离tca8113细胞系中的肿瘤干细胞。通过MTT法、流式细胞技术、细胞免疫荧光、克隆形成率分析、细胞迁移能力检测和裸鼠皮下成瘤实验确定分离得到的肿瘤干... 详细信息

目的:分离鉴定口腔鳞癌细胞系tca8113中的肿瘤干细胞。方法:利用有限稀释的方法分离tca8113细胞系中的肿瘤干细胞。通过MTT法、流式细胞技术、细胞免疫荧光、克隆形成率分析、细胞迁移能力检测和裸鼠皮下成瘤实验确定分离得到的肿瘤干细胞的生物学特点。结果:分离得到的紧密型克隆肿瘤细胞表现为异倍体样细胞周期,大部分细胞处于G0/G1期,增殖能力、克隆形成率和体外迁移能力都明显高于未分离的肿瘤细胞。紧密型克隆肿瘤细胞肿瘤干细胞标记物ABCG2表达也高于未分离的肿瘤细胞,并且具有更强的裸鼠皮下成瘤能力。结论:我们分离得到的紧密型克隆细胞具有较强的细胞增殖和自我更新能力,可能就是口腔鳞癌细胞系tca8113中的肿瘤干细胞。

关键词：紧密型克隆肿瘤干细胞 tca8113 鉴定

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血管内皮生长因子在口腔鳞状细胞癌中的表达

实用口腔医学杂志 2008年第3期24卷 445-447页

作者：王雷高文信马宁吉林大学口腔医院 130041

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肿瘤的发生中起着重要作用。本研究采用免疫组化方法检测了VEGF在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中的表达,并且采用RT-PCR方法检测人舌癌细胞系Tc... 详细信息

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在肿瘤的发生中起着重要作用。本研究采用免疫组化方法检测了VEGF在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中的表达,并且采用RT-PCR方法检测人舌癌细胞系tca8113中VEGFmRNA的表达,探讨VEGF在口腔鳞癌生长中的作用。1材料和方法1.1标本来源收集我院外科住院患者资料,经临床及病理诊断为OSCC30例。另取10例正常颊、舌组织为对照组。[第一段]

关键词：血管内皮生长因子口腔鳞状细胞癌 VEGFmRNA carcinoma tca8113 免疫组化方法人舌癌细胞系 PCR方法

N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺的合成及其抗肿瘤作用的研究

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时珍国医国药 2010年第9期21卷 2162-2164页

作者：秦箐高明星莫德欢王闻楚林华邝晓聪广西医科大学药学院广西南宁530021 广西医科大学基础医学院广西南宁530021

目的首次合成未见报道的N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺,探讨其体内外抗肿瘤活性。方法①以芥酸和双(2-氯乙基)胺盐酸盐为原料、吡啶为催化剂合成N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺,分离纯化后核磁共振谱确证结构;②用N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺作用于... 详细信息

目的首次合成未见报道的N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺,探讨其体内外抗肿瘤活性。方法①以芥酸和双(2-氯乙基)胺盐酸盐为原料、吡啶为催化剂合成N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺,分离纯化后核磁共振谱确证结构;②用N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺作用于tca8113,用倒置显微镜镜下观察其对tca8113细胞的生长状况的影响,PI染色经流式细胞术分析其杀伤效应;③S180小鼠动物肿瘤模型观察N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺对肿瘤的体内抑制作用。结果合成出了N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺并确证了其结构;N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺于体外0.15～10.0μg/ml的浓度范围对tca8113有较强的杀伤效应,杀伤率均超过30%,但与浓度递增无明显的正相关,在100.0μg/ml以上的浓度反而杀伤效果不佳;体内抑制S180的生长,剂量为5mg/kg时,抑制作用最好,生命延长率为38.20%,体重平均增长速率为2.45%。结论采用微型合成法能够快速、方便地合成出N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺;N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺在在体内外具有明显的抗肿瘤活性。

关键词：芥酸 N,N-二(2-氯乙基)芥酸酰胺 tca8113 S180 抗肿瘤作用

利用T7噬菌体展示技术构建人舌鳞癌细胞多肽文库

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重庆医科大学学报 2010年第11期35卷 1687-1689页

作者：王景涛季平邓诚伍明毅刘凯孙守娟邹波重庆医科大学附属口腔医院口腔颌面外科重庆400015

目的:本研究拟构建人舌鳞癌细胞株tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,为进一步筛选和鉴定与舌鳞癌相关的蛋白或多肽打下基础。方法:人舌癌细胞株tca8113,QiaGen法提取细胞mRNA,逆转录合成双链cDNA后与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩... 详细信息

目的:本研究拟构建人舌鳞癌细胞株tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,为进一步筛选和鉴定与舌鳞癌相关的蛋白或多肽打下基础。方法:人舌癌细胞株tca8113,QiaGen法提取细胞mRNA,逆转录合成双链cDNA后与T7Select 10-3载体连接,体外包装并扩增得到T7噬菌体展示多肽文库。结果:构建了人舌鳞癌细胞株tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,原始文库重组滴度为鳞癌1.7×106 pfu,扩增后滴度为3×1010 pfu/mL。随机从文库中抽取10个克隆PCR扩增插入片断,电泳结果显示构建的文库中均有插入片段,文库插入率高达100%。所构建的文库插入片断大小在(0.4～1.0)kbp之间。结论:成功构建了人舌癌细胞株tca8113的T7噬菌体展示多肽文库,为下一步筛选和鉴定与舌癌相关的蛋白或多肽奠定了基础。

关键词：噬菌体展示多肽库人舌鳞癌 tca8113

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高级脂肪酸类似物的合成及抗肿瘤作用研究

高级脂肪酸类似物的合成及抗肿瘤作用研究

作者：王闻楚广西医科大学

学位级别：硕士

目的:对高级脂肪酸进行结构修饰和改造,合成高级脂肪酸类似物;通过体外抗肿瘤实验,筛选出具有抗肿瘤活性化合物;将已筛选出的体外抗肿瘤活性明显化合物进行合成条件优化设计,以便于获得足够量的化合物用于体内抗肿瘤活性研究;将筛选出... 详细信息

目的:对高级脂肪酸进行结构修饰和改造,合成高级脂肪酸类似物;通过体外抗肿瘤实验,筛选出具有抗肿瘤活性化合物;将已筛选出的体外抗肿瘤活性明显化合物进行合成条件优化设计,以便于获得足够量的化合物用于体内抗肿瘤活性研究;将筛选出的活性化合物进行体内抗肿瘤作用研究。方法:1.本实验以山嵛酸、芥酸、花生酸、花生烯酸为原料设计合成高级脂肪酸类似物,将其依次酰化合成8个全新化合物,并用1H-NMR、13C-NMR进行结构鉴定。2.体外抗肿瘤活性筛选:选择人肝癌BEL-7404细胞,观察新化合物对肿瘤细胞的抑制情况,筛选出活性化合物;MTT法检测化合物UFA301对tca8113/ADM耐药株的毒性,确定其无毒浓度;MTT法检测化合物UFA301对tca8113/ADM耐药株的逆转效应。3.选用正交设计法,对化合物UFA301合成条件做初步优化设计。4.对化合物UFA301小鼠进行急性毒性试验,以确定其安全给药范围。5.筛选出的化合物体内抗肿瘤作用研究:建立S180昆明种小鼠腹水肿瘤模型,考察给药组的生命延长率,研究化合物体内抗肿瘤作用。结果:1.对高级脂肪酸进行结构修饰和改造,合成了8个化合物并进行结构鉴定。2.体外实验筛选得化合物UFA301,UFA306在400μg/mL以上对BEL-7404细胞有明显抑制作用,低于400μg/mL抑制作用不明显,并且MTT法检测化合物UFA301对tca8113/ADM耐药株的无明显细胞毒性,但是MTT法检测可得化合物UFA301对tca8113/ADM耐药细胞株的逆转效应明显,化合物UFA301对tca/ADM耐0.1μg/ml(P57)细胞的逆转倍数(RF)为3.67,相对逆转效应为73.12%,阳性对照(VRP)RF为4.47,相对逆转效应为78.04%。3.对化合物UFA301的合成路线优化后产率在85.0%以上,可满足后期试验需要。4.急毒试验证明化合物UFA301用量在100 mg /kg以上对昆明小鼠毒性较低。5.进一步体内实验证明,UFA301能延长S180型腹水瘤小鼠的生存时间,但是与空白对照组相比无明显统计学差异。结论:共合成8个全新化合物,并筛选得有明显的体外肿瘤细胞活性抑制作用UFA301,UFA306,化合物UFA301对tca8113的耐药细胞株有明显的耐药逆转作用。而且体内实验显示,UFA301毒性较低,并且有延长S180型腹水肿瘤小鼠的存活时间的趋势。

关键词：高级脂肪酸板蓝根组酸 BEL-7404 tca8113 抗肿瘤 S180

芦荟大黄素在体外诱导人舌癌及肺癌肿瘤细胞凋亡的初步研究

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芦荟大黄素在体外诱导人舌癌及肺癌肿瘤细胞凋亡的初步研究

作者：史朋昆明医学院

学位级别：硕士

目的探讨芦荟大黄素在体外对人舌癌细胞株tca8113及肺癌细胞株YTMLC肿瘤细胞的生长抑制作用及诱导凋亡的作用,并初步探讨其机理,为进一步明确芦荟的药理作用及扩展芦荟的临床应用提供实验依据。方法将不同浓度的芦荟大黄素作用... 详细信息

目的探讨芦荟大黄素在体外对人舌癌细胞株tca8113及肺癌细胞株YTMLC肿瘤细胞的生长抑制作用及诱导凋亡的作用,并初步探讨其机理,为进一步明确芦荟的药理作用及扩展芦荟的临床应用提供实验依据。方法将不同浓度的芦荟大黄素作用于舌癌和肺癌肿瘤细胞,应用MTT法观察药物对细胞的生长抑制作用;应用免疫荧光、DNA Ladder、流式细胞仪及透射电镜检测细胞凋亡;应用Western blot方法检测细胞凋亡过程中caspase 3及PARP蛋白的表达变化情况。结果 1.芦荟大黄素对舌癌tca8113和肺癌YTMLC肿瘤细胞均具有生长抑制作用,且该抑制作用具有浓度—时间—效应关系,在芦荟大黄素浓度为10μg/ml时抑制作用最为显著;2.芦荟大黄素可诱导肺癌细胞YTMLC发生凋亡;而运用本实验的检测方法未检测到芦荟大黄素对舌癌细胞tca8113产生凋亡诱导作用;3.芦荟大黄素诱导肺癌肿瘤细胞发生凋亡过程中有caspase 3的激活及其对下游底物PARP裂解的分子事件发生。结论芦荟大黄素在体外可以对人舌癌细胞株tca8113和肺癌细胞株YTMLC肿瘤细胞产生生长抑制作用。芦荟大黄素对肺癌细胞YTMLC的抑制作用是通过诱导肿瘤细胞的凋亡实现的,且凋亡的诱导作用与caspase家族蛋白酶表达变化有关,其中caspase 3的激活及其对下游底物PARP的裂解可能发挥了重要的作用。而芦荟大黄素对舌癌细胞tca8113的抑制作用可能是通过其他的途径实现的。结果提示芦荟大黄素可能是一种潜在的舌癌和肺癌的化学预防药物。

关键词：芦荟大黄素舌癌细胞株 tca8113 肺癌细胞株 YTMLC 细胞凋亡