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临床麻醉学杂志 2012年第5期28卷 501-503页

作者：濮健峰邵东华杭黎华束薇薇魏云伟葛家希江苏大学附属人民医院麻醉科镇江市212002

目的观察大鼠脑缺血-再灌注后缺血半暗带内t细胞死亡偶联基因8(tDAG8)的表达。方法体重250～280g的SD成年雄性大鼠36只,随机均分为正常组(C组)、假手术组(S组)和脑缺血-再灌注组(IR组)。采用大鼠大脑中动脉内线栓阻断法(MCAO)模型。IR... 详细信息

目的观察大鼠脑缺血-再灌注后缺血半暗带内t细胞死亡偶联基因8(tDAG8)的表达。方法体重250～280g的SD成年雄性大鼠36只,随机均分为正常组(C组)、假手术组(S组)和脑缺血-再灌注组(IR组)。采用大鼠大脑中动脉内线栓阻断法(MCAO)模型。IR组大鼠缺血2h后再灌注24h。再灌注结束后对大鼠进行神经行为学评分并检测大鼠脑缺血半暗带内的tD-AG8mRNA及tDAG8蛋白表达。结果 IR组脑缺血半暗带内tDAG8mRNA及tDAG8蛋白表达明显高于C组和S组(PtDAG8可能参与了大鼠脑缺血-再灌注损伤过程。

关键词： t细胞死亡偶联基因8 脑缺血-再灌注损伤大鼠

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低氧性肺动脉高压中HMGB-1对tDAG8表达的影响及机制研究

低氧性肺动脉高压中HMGB-1对TDAG8表达的影响及机制研究

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作者：王宏燕内蒙古医科大学

学位级别：硕士

目的:利用慢病毒干扰技术研究低氧性肺动脉高压(HPH)模型小鼠中HMGB-1对tDAG8表达的影响及炎症反应的调控作用,并阐明其相关信号通路。方法:18只SD小鼠随机分正常组(NC组)、低氧组(HPH组)、HMGB-1基因干扰组(HPH+HMGB-1组),HPH组常压低... 详细信息

目的:利用慢病毒干扰技术研究低氧性肺动脉高压(HPH)模型小鼠中HMGB-1对tDAG8表达的影响及炎症反应的调控作用,并阐明其相关信号通路。方法:18只SD小鼠随机分正常组(NC组)、低氧组(HPH组)、HMGB-1基因干扰组(HPH+HMGB-1组),HPH组常压低氧法建立低氧肺动脉高压小鼠模型,HPH+HMGB-1组分别在低氧造模d10、d20向小鼠尾静脉HMGB-1特异性shRNA慢病毒实现基因干扰,持续28天造模成功后,留取血液及组织标本。器官水平评估模型建立情况及慢病毒干扰效果:(1)评估右心肥厚指数及病理切片评估肺动脉血管重塑情况;(2)活体荧光示踪法及组织冰冻切片验证小鼠尾静脉HMGB-1特异性shRNA慢病毒注入实验小鼠体内情况。细胞水平:检测慢病毒介导shRNA干扰HMGB-1在小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7的表达效果。基因水平:(1)Rt-PCR检测模型小鼠肺组织中HMGB-1mRNA表达;(2)Western-blot检测HMGB-1、tDAG8蛋白表达及ERK磷酸化水平。分子水平:ELISA检测肺泡灌洗液中HMGB-1、tLR4、NF-KB、IL-6、IL-1β、HIF-1的表达及cAMP累积量表达水平。方差分析检验组间差异,Pearson分析法分析相关性。结果:1、低氧性肺动脉高压小鼠模型建立成功:(1)28d后小鼠的平均体重:HPH组较NC组明显下降,P=0.0001;HPH+HMGB-1组较NC组下降,P=0.001;HPH+HMGB-1组较HPH组下降,P=0.01;右心肥厚指数(RVHI)在三组间均具有统计学意义,PtLR4、NF-KB、IL-1b、IL-6在HPH组较NC组高表达,P基因及蛋白水平呈正相关,PtLR4、NF-KB、IL-1β、IL-6呈正相关,表明HPH中HMGB-1表达增高,炎症因子IL-1β、IL-6表达上调,tLR4/NF-kB信号通路激活。3、尾静脉注射HMGB-1特异性shRNA慢病毒,显著抑制了肺组织中HMGB-1的mRNA和蛋白表达,炎症因子下调,减轻炎症反应:(1)巨噬细胞RAW264.7中验证HMGB-1 shRNA慢病毒干扰效果:PCR检测转染HMGB-1shRNA慢病毒后,HMGB-1 mRNA表达明显减低,P基因及蛋白水平成正相关,PtLR4、NF-KB、IL-1b、IL-6在HPH+HMGB-1组较HPH组低表达,Pt=6.53,P=0.0001);HPH组较HPH+HMGB-1组明显升高(t=3.77,P=0.001)。直线相关性分析提示HIF-1与HMGB-1表达呈正相关。5、HPH中HIF-1表达升高,导致微酸环境,tDAG8/cAMP表达激活:(1)小鼠肺组织中tDAG8蛋白表达水平在HPH组较NC组中高表达,Pt=8.54,P=0.0001),具有统计学意义。Pearson相关性分析提示tDAG8与cAMP呈正相关性;HIF-1与tDAG8、cAMP表达呈正相关。6、HMGB-1介导的HPH炎症反应中,HIF-1表达升高,乳酸堆积,形成酸性环境,tDAG8/cAMP通路激活,预测HPH中HMGB-1能正反馈调节tDAG8的表达:HPH组较NC组tDAG8及cAMP高表达,PtDAG8及cAMP低表达,P<0.05,有统计学意义。

关键词：低氧性肺动脉高压高迁移蛋白-1 t细胞死亡偶联基因8 炎症反应

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质子敏感性OGR1亚家族及其研究进展

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国际病理科学与临床杂志 2007年第4期27卷 354-357页

作者：张海强严奉祥衡阳市南华大学药物药理研究所湖南衡阳421001

卵巢癌G蛋白偶联受体1（OGR1）亚家族是新近发现的一类对质子敏感的G蛋白偶联受体,它包括诱导细胞停滞于G2/M期的G蛋白偶联受体G2A（G2accumulation）、t细胞死亡偶联基因8（t-cell death-associatedgene8,tDAG8）、G蛋白偶联受体4（G p... 详细信息

卵巢癌G蛋白偶联受体1（OGR1）亚家族是新近发现的一类对质子敏感的G蛋白偶联受体,它包括诱导细胞停滞于G2/M期的G蛋白偶联受体G2A（G2accumulation）、t细胞死亡偶联基因8（t-cell death-associatedgene8,tDAG8）、G蛋白偶联受体4（G protein-coupled receptor4,GPR4）及OGR1,它们相互之间具有40%~50%的序列同源性。一些脂质分子目前被认为是该类受体的配体,并且该类受体还能通过组氨酸残基感知胞外质子或pH值的变化。该亚家族可通过几种异源三聚体G蛋白包括Gs,Gi,Gq及G12/13介导细胞内多种信号通路,与肿瘤的发生、细胞骨架重组、免疫系统和血管系统功能等生理病理过程有关。

关键词：质子 G蛋白偶联受体G2A t细胞死亡偶联基因8 G蛋白偶联受体4 卵巢癌G蛋白偶联受体1

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