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中国肿瘤生物治疗杂志 2022年第8期29卷 750-755页

作者：张燕郑梓莹陈文杨钰斌黄种心福建医科大学附属第二医院中西医结合肿瘤科福建泉州362000 福建医科大学附属第二医院病理科福建泉州362000

目的:研究三阴性乳腺癌(tNBC)组织中t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白(tIGIt)和CD155蛋白的表达及其与临床病理参数、生存预后的相关性,探讨两蛋白在tNBC预后中的价值。方法:收集2014年1月至2018年12月福建医科大学附属第二医院通过手... 详细信息

目的:研究三阴性乳腺癌(tNBC)组织中t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白(tIGIt)和CD155蛋白的表达及其与临床病理参数、生存预后的相关性,探讨两蛋白在tNBC预后中的价值。方法:收集2014年1月至2018年12月福建医科大学附属第二医院通过手术切除、术后病理检查确诊为tNBC的64例女性患者的肿瘤组织,采用免疫组化法检测tNBC组织中tIGIt、CD155的表达情况。收集入组患者的临床病理资料并随访其生存预后情况,使用卡方检验或Fisher’s精确检验分析tIGIt、CD155水平与临床病理特征的关系,通过Kaplan-Meier生存曲线、Log-Rank检验及Cox回归分析法分析tIGIt、CD155表达与预后的关系。结果:tNBC中tIGIt和CD155的阳性表达率分别为48.4%(31/64)和79.9%(51/64)。tIGIt和CD155的表达均与肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期相关(均P0.05)。生存分析结果显示,tNBC组织中tIGIt和CD155的表达均与较差的DFS相关(均PtNBC独立预后危险因素;多因素分析显示,tNM分期为tNBC患者的独立预后危险因素(PtIGIt和CD155在tNBC中呈高表达并与不良病理参数及预后有关联。

关键词：三阴性乳腺癌 t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白 CD155 预后

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t细胞上tIGIt抑制大鼠肝移植免疫排斥反应的机制研究

T细胞上TIGIT抑制大鼠肝移植免疫排斥反应的机制研究

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作者：王耀权河南大学

学位级别：硕士

研究背景:肝移植(Liver transplantation,Lt)是治疗终末期肝病的有效手段之一,但免疫排斥反应仍然是限制其长期效果和生存率的主要问题之一。免疫排斥反应可以导致肝脏功能衰竭和移植物失功,严重影响受者的生存质量和生存期。近年来,随... 详细信息

研究背景:肝移植(Liver transplantation,Lt)是治疗终末期肝病的有效手段之一,但免疫排斥反应仍然是限制其长期效果和生存率的主要问题之一。免疫排斥反应可以导致肝脏功能衰竭和移植物失功,严重影响受者的生存质量和生存期。近年来,随着对器官移植免疫排斥反应的不断深入研究,虽然对肝移植免疫排斥反应的机制有了更多的认识。但是,肝移植免疫排斥反应发生和发展以及新型的干预策略仍需进一步探究,以提高肝移植后的成功率和生存率。第一部分大鼠肝移植模型的建立目的:本部分研究旨在建立一种可重复且稳定的大鼠原位肝移植模型(Orthotopic liver transplantation,OLt),以便进一步研究肝移植免疫排斥反应。方法:选用同种异体大鼠,Lewis和挪威棕色大鼠(Brown Norway,BN),以“门脉优先的二袖套法”进行手术,Lewis→BN为排斥组,BN→BN为耐受组。术后观察受体大鼠的生存情况、血清生化指标变化,并通过组织病理学分析,验证移植后模型建立是否成功。结果:对两组移植后大鼠的观察,发现移植后第3天至第5天出现食欲下降、活动减少等表现,耐受组在第7天左右开始逐渐恢复正常,而排斥组则症状加重,同时,血清谷丙转氨酶(Alanine transaminase,ALt)和谷草转氨酶(Aspartate transaminase,ASt)较耐受组明显升高,P免疫排斥反应中CD155-tIGIt基因的高度表达及关键差异基因的分析目的:肝移植术后免疫排斥反应主要是由抗原递呈过程及t淋巴细胞的激活。本部分研究通过对大鼠肝移植后肝脏组织的高通量和单细胞测序结果,分析探讨肝移植免疫排斥反应的基因变化。方法:肝移植术后免疫排斥反应发生约在术后3-5天出现,我们选择了肝移植后第7天大鼠肝脏组织进行高通量和单细胞测序检测,利用基因本体论(Gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)数据库寻找差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)及所参与的信号通路。使用基因集富集分析(Gene set enrichment analysis,GSEA)来鉴定免疫排斥反应的关键通路。同时,利用在线的String数据库构建差异表达基因的蛋白质互作网络(Protein-protein interaction,PPI),筛选出其中的关键基因。然后,通过单细胞测序技术对所筛选的关键基因及通路进行对比分析,定位信号通路中关键基因所在的细胞亚群。结果:1.本研究共在大鼠移植排斥反应肝组织中鉴定出5252个差异基因,其中2962个基因表达上调,2290个基因表达下调。***富集分析结果显示DEGs关于生物过程(Biological process,BP)显著富集了淋巴细胞活化的调节、适应性免疫反应和白细胞细胞间粘附等通路;关于细胞成分(Cellular component,CC)显著富集了质膜外侧、膜筏和膜微区等细胞位置;关于分子功能(Molecular function,MF)显著富集在趋化因子、细胞因子和免疫受体等功能。***分析结果提示DEGs主要富集在细胞因子受体相互作用、趋化因子信号通路和细胞粘附分子等通路。***分析显示细胞因子受体相互作用、PI3K-Akt信号通路和细胞粘附分子是肝移植免疫排斥反应发生过程中的主要途径,通过对比分析认为t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白(t cell immunoglobulin and itim domain,tIGIt)所在的细胞粘附分子通路中关键基因差异性较大。5.根据DEGs对应蛋白之间的功能联系构建PPI网络,结合富集分析结果共筛选出了 5 个关键基因,GZMB、CXCL2、CX3CL1、CCR1 和 CCL19。6.单细胞测序结果提示,将非实质细胞分群发现单核巨噬细胞为最大群体,t细胞为第三位,随后把t细胞分为6群,其中treg在耐受组中为最大群体。根据单细胞表达谱特征以及标记基因的表达,通过对细胞群体标记物的注释,发现白细胞分化抗原155(Cluster of differentiation 155,CD155)-tIGIt 信号通路所在的细胞群 8、19 的标记物均为CD3e,属于t淋巴细胞群体。结论:1.与免疫相关的DEGs 402个参与了免疫排斥反应,其中GZ

关键词：肝移植排斥反应 t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白白细胞分化抗原155 t细胞

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慢性肾脏病2-4期脾肾气虚证患者抑制性受体tIGIt基因的表达相关性研究

慢性肾脏病2-4期脾肾气虚证患者抑制性受体TIGIT基因的表达相关性...

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作者：聂倩武江西中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过对慢性肾脏病(CKD)2-4期脾肾气虚证患者外周血单个核细胞中免疫抑制性受体-t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白(tIGIt)的表达与意义进行初步探索,阐明该受体在CKD发生和发展中可能的作用,拟为进一步研究CKD的免疫学致病机制提供... 详细信息

目的:通过对慢性肾脏病(CKD)2-4期脾肾气虚证患者外周血单个核细胞中免疫抑制性受体-t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白(tIGIt)的表达与意义进行初步探索,阐明该受体在CKD发生和发展中可能的作用,拟为进一步研究CKD的免疫学致病机制提供可能的新思路。方法:采集纳入本实验研究对象的CKD患者和健康志愿者血液标本,并应用流式细胞术检测淋巴细胞亚群细胞数及CD4+t淋巴细胞、CD8+t淋巴细胞、NK细胞tIGIt表达水平。同时收集受试对象的临床资料,将估算的肾小球滤过率(e GFR)和实验室检验指标与CD4+t淋巴细胞、CD8+t淋巴细胞、NK细胞tIGIt表达水平进行相关性分析。采用SPSS 26.0和Graph Pad Prism 8.0分析数据并绘图。结果:1.共纳入研究对象120例,对照组健康志愿者23例,实验组CKD2-4期脾肾气虚证患者97例。与健康对照组相比,CKD2-4期脾肾气虚证患者淋巴细胞数、CD4+t淋巴细胞数、CD8+t淋巴细胞数均减少(P蛋白水平均升高(Pt淋巴细胞、CD8+t淋巴细胞、NK细胞tIGIt的表达水平均升高(Pt淋巴细胞、CD8+t淋巴细胞、NK细胞tIGIt的表达水平随CKD分期的增加、中医症候积分的升高呈上升趋势。CKD4期脾肾气虚证患者CD4+t淋巴细胞tIGIt的表达水平高于3期和2期患者(Pt淋巴细胞tIGIt的表达水平高于2期患者(P细胞tIGIt的表达水平高于2期患者;与中医症候低积分组患者相比,高积分组患者CD4+t淋巴细胞、CD8+t淋巴细胞、NK细胞tIGIt的表达水平均升高(Pt淋巴细胞数与CD4+t淋巴细胞tIGIt的表达水平呈负相关(Pt淋巴细胞数与CD8+t淋巴细胞tIGIt的表达水平呈负相关(Pt淋巴细胞tIGIt的表达水平与e GFR呈负相关(Pt淋巴细胞tIGIt的表达水平与e GFR呈负相关(P细胞tIGIt的表达水平与e GFR呈负相关(Pt淋巴细胞、CD8+t淋巴细胞、NK细胞tIGIt的表达水平对指导CKD的诊断均具有统计学意义(P细胞tIGIt的表达水平、CD4+t细胞tIGIt表达水平、CD8+t细胞tIGIt表达水平。结论:***2-4期脾肾气虚证患者tIGIt的表达水平升高,且与疾病严重程度呈正相关;***2-4期脾肾气虚证患者免疫系统功能障碍与tIGIt的表达升高密切相关;***可以初步作为CKD2-4期脾肾气虚证患者潜在的临床诊断标志物之一。

关键词：慢性肾脏病 t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白免疫

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tIGIt及其配体CD155在“怒”应激大鼠胸腺细胞中的表达及其意义

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国际检验医学杂志 2022年第1期43卷 1-6页

作者：卢黄欣陈俊贤李玮婷欧阳彦楚杨军平江西中医药大学研究生院江西南昌330004 江西中医药大学附属医院检验科江西南昌330006

目的探讨"怒"模型大鼠胸腺细胞中t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白(tIGIt)及其配体CD155和血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACtH)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)表达情况,以及这些指标与胸腺细胞凋... 详细信息

目的探讨"怒"模型大鼠胸腺细胞中t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白(tIGIt)及其配体CD155和血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACtH)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)表达情况,以及这些指标与胸腺细胞凋亡的相关性。方法将48只Wistar雄性大鼠随机分成对照组、模型7 d组、模型14 d组、模型21 d组,每组12只。除对照组外,其余各组以“社会隔离法”结合足底电击法复制精神应激“怒”模型大鼠。实验后测定大鼠体质量和胸腺指数,以苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠胸腺组织的形态学改变,采用免疫印迹法检测各组大鼠胸腺细胞中tIGIt、CD155蛋白的表达水平,采用tunel法检测胸腺细胞凋亡情况,采用酶联免疫吸附试验测定血清CRH、ACtH、IL-2、IL-10水平。结果实验后,4组大鼠体质量较试验前1 d升高(P结构出现不同程度的损坏,幼稚t细胞布排紊乱无序或呈“条索状”堆积,细胞间隙缩小,细胞数量较对照组降低,细胞核染色变浅,呈淡紫色,并出现不同程度核固缩、核分裂、细胞溶解等凋亡细胞增多现象。4组大鼠胸腺细胞tIGIt蛋白表达水平比较,对照组细胞tIGIt蛋白表达水平差异均有统计学意义(P细胞CD155蛋白表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P细胞吸光度高于对照组,差异有统计学意义(PtH水平高于对照组及模型21 d组(PtIGIt表达水平与CD155、ACtH、CRH及胸腺细胞凋亡程度呈正相关(P0.05);CD155表达水平与tIGIt及胸腺细胞凋亡程度呈正相关(PtH、CRH、IL-10及胸腺指数无相关性(P>0.05)。结论“怒”应激状态下,胸腺出现萎缩及凋亡细胞增多现象,可能是tIGIt-CD155与下丘脑-垂体-肾上腺轴、IL-10、IL-2共同作用所致,该研究为“怒”应激致使免疫损伤及疾病发生发展提供理论依据。

关键词： t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白 CD155 应激胸腺免疫下丘脑-垂体-肾上腺轴

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类风湿关节炎患者外周血中tim-3、PD-1、tIGIt在CD4^(+)t和CD8^(+)t细胞上的表达

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宁夏医科大学学报 2023年第12期45卷 1242-1249页

作者：姜春蕾朱泽琴王凤魁陈建段相国苏春霞池淑红宁夏医科大学银川750004 宁夏医科大学总医院风湿免疫科宁夏医科大学第一临床医学院银川750004 宁夏医科大学总医院核医学科宁夏医科大学第一临床医学院银川750004 宁夏国龙医院脊柱外科银川750004

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血中t细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(tim-3)、程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)及t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白(tIGIt)在CD4^(+)t和CD8^(+)t细胞上的表达情况及其与DAS28评分的相关性。方法选取2021年3... 详细信息

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血中t细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(tim-3)、程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)及t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白(tIGIt)在CD4^(+)t和CD8^(+)t细胞上的表达情况及其与DAS28评分的相关性。方法选取2021年3月至2023年4月于宁夏医科大学总医院风湿免疫科确诊为RA患者60例为研究对象,另选取同期在宁夏医科大学总医院体检中心行健康检查者30例为健康对照组。根据DAS28-ESR评分将RA患者分为疾病活动期(疾病活动组,30例)和疾病缓解期(疾病缓解组,30例)。收集所有研究对象新鲜血液样本,采用流式细胞术检测3组外周血中tim-3、PD-1和tIGIt分子分别在CD4^(+)t细胞和CD8^(+)t细胞上的表达情况。结果疾病活动组患者的病程长于疾病缓解组,且两组中女性多于男性(P均细胞介素6(IL-6)、红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、补体3(C3)和类风湿因子(RF)水平均高于疾病缓解组(P均0.05)。RA患者疾病活动组和疾病缓解组RF、IL-6、ESR和CRP均高于健康对照组(P均tim-3、PD-1和tIGIt在CD4^(+)t细胞上的表达以及PD-1和tIGIt在CD8^(+)t细胞上的表达均高于健康对照组(P均tim-3、PD-1和tIGIt在CD4^(+)t细胞上的表达,以及PD-1和tIGIt在CD8^(+)t细胞上的表达均低于疾病活动组(P均tim-3、PD-1和tIGIt分子表达差异均无统计学意义(P均>0.05)。CD4^(+)t细胞表达tim-3(r=0.584,PtIGIt(r=0.576,Pt细胞表达PD-1(r=0.464,PtIGIt(r=0.620,Ptim-3、PD-1和tIGIt在CD4^(+)t细胞和CD8^(+)t细胞上的异常表达影响RA患者的病情活动,这些异常表达的分子可能作为评价RA患者病情活动度的指标。

关键词：类风湿关节炎 t细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3 程序性细胞死亡蛋白1 t细胞免疫球蛋白和itim结构域蛋白 DAS28评分

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