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tRIM21促进t淋巴细胞凋亡的分子机制及临床应用价值分析

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上海医学 2012年第2期35卷 137-140页

作者：谢军万小健卞金俊江苏省盱眙县人民医院检验科 211700 上海第二军医大学附属长海医院麻醉科

目的探讨E3连接酶tRIM21在anti-Fas诱导的t淋巴细胞凋亡中的作用及其分子机制,为评价tRIM21在临床上的应用奠定基础。方法构建tRIM21真核表达载体,设计tRIM21干扰片段,分别将它们过度表达于Jurkat t淋巴细胞中。将流式细胞仪分选的阳性... 详细信息

目的探讨E3连接酶tRIM21在anti-Fas诱导的t淋巴细胞凋亡中的作用及其分子机制,为评价tRIM21在临床上的应用奠定基础。方法构建tRIM21真核表达载体,设计tRIM21干扰片段,分别将它们过度表达于Jurkat t淋巴细胞中。将流式细胞仪分选的阳性细胞分为空载无药物组、空载药物处理组(anti-Fas 20ng/mL处理3h)、tRIM21无药物组和tRIM21药物处理组(anti-Fas 20ng/mL处理3h)分别进行药物处理,将转入对照双链小干扰RNA(siRNA)与tRIM21siRNA的Jurkat t淋巴细胞分为对照siRNA无药物组、对照siRNA药物处理组(anti-Fas 20ng/mL处理3h)、tRIM21siRNA无药物组和tRIM21siRNA药物处理组(anti-Fas 20ng/mL处理3h),并采用Annexin V/碘化丙啶双染法测定Jurkat t淋巴细胞的凋亡率。将分选Jurkat t淋巴细胞分为空载组和tRIM21过表达组,分别采用蛋白质免疫印迹法与实时定量聚合酶链反应检测tRIM21过度表达对抗凋亡蛋白c-FLICE抑制蛋白(FLIP)的蛋白质及mRNA水平表达的影响。结果空载药物处理组的Jurkat t淋巴细胞凋亡率显著高于空载无药物组(PtRIM21药物处理组的Jurkat t淋巴细胞凋亡率显著高于tRIM21无药物组(Ptt淋巴细胞凋亡率显著高于对照siRNA无药物组(PtRIM21siRNA药物处理组的Jurkat t淋巴细胞凋亡率大大降低,显著低于对照siRNA药物处理组(PtRIM21过表达组则为(31.25±0.25)%。以空载组的c-FLIP(L)mRNA表达量为100%,tRIM21过表达组则为(25.60±3.33)%。结论 tRIM21能抑制抗凋亡蛋白c-FLIP的表达,增强t淋巴细胞对Fas诱导细胞凋亡的敏感性。

关键词： t淋巴细胞凋亡 tRIM21 c-FLICE抑制蛋白

白细胞介素-15对放射线诱导t淋巴细胞凋亡的保护作用

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中华实验外科杂志 2005年第7期22卷 813-814页

作者：吴华余忠华张万清庞伟君广东医学院附属医院放疗科广东湛江524001 广东医学院附属医院胸外科广东湛江524001 广东医学院附属医院检验科广东湛江524001

目的观察重组人白细胞介素(rhIL)-15对放射线照射的t淋巴细胞损伤的保护作用。方法从30例正常人的骨髓分离淋巴细胞,随机分为实验组及对照组各15例。实验组加入100μg/L的IL15,两组分别放射线照射,流式细胞术和细胞核形态检测等方法观... 详细信息

目的观察重组人白细胞介素(rhIL)-15对放射线照射的t淋巴细胞损伤的保护作用。方法从30例正常人的骨髓分离淋巴细胞,随机分为实验组及对照组各15例。实验组加入100μg/L的IL15,两组分别放射线照射,流式细胞术和细胞核形态检测等方法观察照射前后t细胞亚群、bclXL、bax和bcl-2蛋白水平变化和淋巴细胞凋亡率。结果放射线照射后淋巴细胞出现大量凋亡;实验组的淋巴细胞凋亡率较对照组明显降低,t细胞亚群表达率较对照组明显升高,差异有统计学意义(P细胞凋亡相关基因bcl2、bclXL的表达水平较对照组上调,bax表达则较对照组下调(P淋巴细胞凋亡,改善急性放射病引起的免疫损伤。

关键词：白细胞介素-15 保护作用 t淋巴细胞凋亡淋巴细胞凋亡率重组人白细胞介素 bcl-XL 放射线照射 bcl-2蛋白基因bcl-2 IL-15 t细胞亚群淋巴细胞损伤对照组流式细胞术 bax表达急性放射病实验组骨髓分离形态检测水平变化

可溶性Fas阻断Fas介导的t淋巴细胞凋亡

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中华外科杂志 2005年第5期43卷 288-289页

作者：王平张柏和杨家和吴孟超第二军医大学东方肝胆外科医院胆一科上海200438

在用肝癌手术切除标本制备肿瘤特异性细胞毒性t淋巴细胞(CtL)过程中,应用可溶性Fas阻断激活t细胞间诱导t细胞凋亡可望短时间获得大量肿瘤特异的激活t细胞.本研究进一步观察阻断Fas介导t细胞凋亡后制备的CtL抗肿瘤免疫活性,观察肝癌细胞... 详细信息

在用肝癌手术切除标本制备肿瘤特异性细胞毒性t淋巴细胞(CtL)过程中,应用可溶性Fas阻断激活t细胞间诱导t细胞凋亡可望短时间获得大量肿瘤特异的激活t细胞.本研究进一步观察阻断Fas介导t细胞凋亡后制备的CtL抗肿瘤免疫活性,观察肝癌细胞表面Fas被封闭后对杀伤敏感性变化,可望为肿瘤免疫治疗研究提供新策略[1]。

关键词：可溶性Fas 肿瘤阻断介导 t淋巴细胞凋亡 t细胞凋亡 CtL 标本制备激活变化

我国HIV/AIDS患者外周血CD4^+ t淋巴细胞凋亡与疾病进展的相关性分析

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中国免疫学杂志 2006年第12期22卷 1156-1157页

作者：代娣尚红姜拥军张子宁韩晓旭耿文清刁莹莹王亚男刘静张旻中国医科大学附属第一医院艾滋病研究所沈阳110001

HIV特征性地引起CD4~+t细胞逐步减少和进行性免疫缺陷.尽管目前HIV导致CD4~+t细胞死亡的具体机制仍不完全清楚,但越来越多证据支持HIV引发的淋巴细胞凋亡是一个重要因素.有研究显示HIV感染使CD4~+t细胞上多种凋亡相关分子表达异常,但有... 详细信息

HIV特征性地引起CD4~+t细胞逐步减少和进行性免疫缺陷.尽管目前HIV导致CD4~+t细胞死亡的具体机制仍不完全清楚,但越来越多证据支持HIV引发的淋巴细胞凋亡是一个重要因素.有研究显示HIV感染使CD4~+t细胞上多种凋亡相关分子表达异常,但有关CD4~+t细胞凋亡率与疾病进程的报道较少,更少见到中国HIV/AIDS患者CD4~+t细胞凋亡在不同疾病进程中变化特点的研究资料.本实验采用流式细胞术研究了我国HIV/AIDS患者CD4~+t细胞凋亡情况及其在不同疾病阶段中的变化特点.

关键词： CD4^+t细胞 t淋巴细胞凋亡 AIDS患者 HIV感染疾病进展外周血 t细胞凋亡凋亡相关分子

系统性红斑狼疮患者t淋巴细胞凋亡与亲环素A的表达

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中华皮肤科杂志 2007年第12期40卷 762-763页

作者：张缪佳刘晓华季晓辉柯瑶顾镭王艳艳谈文峰王嫱南京医科大学第一附属医院风湿免疫科 210029 南京医科大学微生物与免疫学系 210029

亲环素A（Cyclophilin A）是环孢素的细胞内受体，介导环孢素的免疫抑制作用；同时参与免疫调节和信号转导，并发挥细胞因子的功能，在细胞生命活动中具有作用。某些免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（SLE）具有抗亲环素A抗体，或有亲环素A... 详细信息

亲环素A（Cyclophilin A）是环孢素的细胞内受体，介导环孢素的免疫抑制作用；同时参与免疫调节和信号转导，并发挥细胞因子的功能，在细胞生命活动中具有作用。某些免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（SLE）具有抗亲环素A抗体，或有亲环素AmRNA表达异常。我们用流式细胞仪同时检测12例SLE患者和12例正常人对照外周血CD4＋和CD8^＋t淋巴细胞凋亡和CD4^＋和CD8^＋t淋巴细胞内亲环素表达量，并进行相关性分析。

关键词：系统性红斑狼疮患者抗亲环素A抗体 t淋巴细胞凋亡 CD8^+t 免疫抑制作用细胞内受体免疫性疾病淋巴细胞内

历节胶囊对AA大鼠IL-2、IL-6水平及t淋巴细胞凋亡的影响

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中药药理与临床 2005年第4期21卷 58-59页

作者：张立军唐农柴立民黄小琪林国彪广西中医学院中内教研室南宁530001 中国中医研究院广西中医学院药理教研室南宁530001

目的研究历节胶囊对AA大鼠血中IL-2、IL-6的水平以及t淋巴细胞凋亡的影响。方法佐剂型关节炎(AA)大鼠作为动物模型,流式细胞仪检测外周血t淋巴细胞的凋亡率,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中IL-2、IL-6的水平。结果历节胶囊可明显降... 详细信息

目的研究历节胶囊对AA大鼠血中IL-2、IL-6的水平以及t淋巴细胞凋亡的影响。方法佐剂型关节炎(AA)大鼠作为动物模型,流式细胞仪检测外周血t淋巴细胞的凋亡率,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中IL-2、IL-6的水平。结果历节胶囊可明显降低AA大鼠血清中IL-6的含量,提高IL-2的水平,显著增加外周血t淋巴细胞的凋亡率。结论历节胶囊可通过降低IL-6的含量,减少致炎细胞因子的产生,提高IL-2的水平,通过Fas/FasL凋亡系统介导,促进t淋巴细胞凋亡,来达到治疗的目的。

关键词：历节胶囊 AA大鼠 IL-2 IL-6 t淋巴细胞凋亡 t淋巴细胞凋亡 IL-2 IL-6 大鼠血清胶囊历节 AA 外周血t淋巴细胞流式细胞仪检测

静压力作用下牙周膜干细胞介导大鼠t淋巴细胞凋亡的研究

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静压力作用下牙周膜干细胞介导大鼠T淋巴细胞凋亡的研究

作者：申琳第四军医大学

学位级别：硕士

正畸牙移动是指牙齿在机械力的作用下通过压力侧骨吸收,张力侧骨生成来促进牙周组织改建,从而实现牙齿移动。众所周知,正畸牙移动的实质是一个无菌性炎性反应。当机械力作用于牙周膜时,压力侧的牙周膜纤维被压缩,血管血流量减少,胶原纤... 详细信息

正畸牙移动是指牙齿在机械力的作用下通过压力侧骨吸收,张力侧骨生成来促进牙周组织改建,从而实现牙齿移动。众所周知,正畸牙移动的实质是一个无菌性炎性反应。当机械力作用于牙周膜时,压力侧的牙周膜纤维被压缩,血管血流量减少,胶原纤维和细胞基质降解吸收,细胞凋亡,促使牙周膜细胞合成分泌多种炎性因子;炎性因子作为炎症反应的调控者,招募t淋巴细胞和B淋巴细胞迁移至炎症反应区域,进而引起适应性的免疫应答。研究发现,骨组织的改建与免疫调控密切相关,表现在激活的t淋巴细胞和B淋巴细胞可以调节破骨细胞分化,促进RANKL的表达,并最终通过破骨细胞的吞噬作用促进牙槽骨吸收;相反,t淋巴细胞凋亡可以抑制破骨细胞的成熟和分化,进而抑制骨吸收。有文献报道,在免疫系统中,Fas和Fas L是调节细胞凋亡的关键分子,当Fas与Fas L结合后,可诱导t淋巴细胞发生凋亡。牙周膜干细胞(Periodontal ligament stem cells,PDLSCs)是一类具有自我更新和多向分化能力的细胞,在牙周组织改建中发挥重要作用。研究发现,健康牙周组织来源的PDLSCs具有免疫抑制作用,可以促进t淋巴细胞凋亡;而炎症组织来源的PDLSCs免疫调节能力相对较弱,易导致免疫反应失衡,加速骨溶解和骨吸收。因此,健康组织来源的PDLSCs作为种子细胞,可发挥免疫调控作用,恢复受损牙周组织,促进牙齿再生和牙周组织重建。本实验拟探讨PDLSCs在正畸牙移动过程中的免疫调控作用,明确正畸牙移动的生物学机制,进而指导临床正畸治疗。为此,首先通过构建大鼠正畸牙移动模型确定PDLSCs和t淋巴细胞参与正畸牙移动;而后利用体外加力装置模拟正畸牙移动过程中牙周膜干细胞承受压力的微环境,确定压力作用下PDLSCs的免疫调控能力发生改变;最后体外构建PDLSCs与t淋巴细胞共培养模型,明确压力作用下PDLSCs的免疫调控能力对t淋巴细胞凋亡的影响。实验一大鼠正畸牙移动模型的建立及nestin和CD3的表达分布特征研究目的1)构建大鼠正畸牙移动模型并观察牙周组织形态学改变。2)观察nestin和CD3在牙周组织中的分布特征。方法1)构建大鼠正畸牙移动模型,以上颌中切牙作为支抗牙,利用镍钛螺旋拉簧,近中移动大鼠上颌第一磨牙,牵引力值为50g(0.49N)。对照组不作任何加力处理。2)取材后行HE(hemetaxylin-eosin)染色观察牙周组织形态,免疫组化染色观察PDLSCs的标记物nestin和t淋巴细胞的标记物CD3在牙周组织中的分布,免疫荧光染色双染检测t淋巴细胞的凋亡。实验结果1)镜下观察HE染色结果显示,牙周膜压力侧宽度缩窄,张力侧宽度增加。2)免疫组化染色结果显示nestin和CD3均在压力侧牙周膜中显著表达,并且随着时间的延长,表达越显著。3)免疫荧光染色结果显示,与对照组相比,加力3天组牙周膜压力侧的t淋巴细胞凋亡最显著。结论1)PDLSCs与大鼠t淋巴细胞均参与正畸牙齿移动过程。2)正畸牙移动过程中确实存在大鼠t淋巴细胞的凋亡,说明PDLSCs发挥了一定的免疫调控作用。实验二可控液压细胞加载装置的建立及压力刺激下PDLSCs的免疫功能变化特征研究目的明确在压应力作用下PDLSCs的免疫调控能力发生的相应变化。方法构建一个可控液压细胞加载装置,将体外培养的大鼠牙周膜干细胞(Rat periodontal ligament cells,r PDLSCs)置于自行研发的加压力装置中,100kpa静态压力分别加力1h和12 h,检测和比较免疫相关蛋白Fas和Fas L(Fas ligand)的表达水平。实验结果1)结果显示体外加载静态压力100 kpa/1h后,r PDLSC的Fas和Fas L蛋白的表达明显高于对照组(Pt淋巴细胞凋亡的研究研究目的明确压力刺激后的r PDLSCs对t淋巴细胞凋亡的影响。方法1)将r PDLSCs以2x105的密度接种于12孔板中,孵箱培养24h,进行体外加力100kpa/1 h和100 kpa/12 h。2)将加压刺激的r PDLSC和Con A体外激活的大鼠t淋巴细胞,按照1:10的接种比例接种,置于孵箱中共培养2天。3)收集t淋巴细胞,凋亡试剂盒染色,流式细胞仪检测t淋巴细胞的凋亡水平;western blot检测大鼠t淋巴细胞凋亡相关蛋白casp

关键词：大鼠牙周膜干细胞(rPDLSC) Fas FasL t淋巴细胞凋亡

HIV/AIDS中医证型与t淋巴细胞凋亡相关性研究

同方学位论文库评论

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辽宁中医杂志 2013年第11期40卷 2198-2200页

作者：贺小举徐立然郑志攀孟鹏飞马秀霞唐引引宋夕元黄冠惠高萌李正河南中医学院河南郑州450046 河南中医学院第一附属医院河南郑州450000

目的:探讨HIV/AIDS中医证型与t淋巴细胞凋亡的相关性。方法:入组276例HIV/AIDS患者作为病例组,选择11个健康人作为对照组,将入选患者参考中医辨证分型标准分为六种常见证型,检测两组外周血细胞中CD+4、CD+8、CD4/CD95、CD8/CD95表达水... 详细信息

目的:探讨HIV/AIDS中医证型与t淋巴细胞凋亡的相关性。方法:入组276例HIV/AIDS患者作为病例组,选择11个健康人作为对照组,将入选患者参考中医辨证分型标准分为六种常见证型,检测两组外周血细胞中CD+4、CD+8、CD4/CD95、CD8/CD95表达水平并进行对比分析。结果:各证型患者与健康人相比较,CD+4、CD4/CD95均低于健康人,而CD8/CD95均高于健康人,差异具有统计学意义(P0.05);两证型比较,痰湿内蕴组CD+4低于气血两虚兼血瘀和气血两虚组,痰湿内蕴组CD8/CD95高于气血两虚兼血瘀和阴虚火旺组,差异具有统计学意义(Pt淋巴细胞凋亡存在差异,具有一定的相关性,当证型发生转化时,其t淋巴细胞凋亡水平发生变化。个别指标在辨证两种证型时具有辅助辨证的参考意义。

关键词： HIV AIDS 中医证型 t淋巴细胞凋亡相关性

红霉素及其体内代谢产物促进t淋巴细胞凋亡和抑制核因子-κB表达

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中华风湿病学杂志 2006年第1期10卷 59-62,i0002页

作者：吴岚赵丽娟张为革肖卫国中国医科大学附属第一医院风湿免疫科沈阳110001 沈阳药科大学药物化学教研室

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是慢性多关节疾病,主要表现为滑膜组织过度增生和炎性细胞浸润.给正常动物关节注射由关节炎动物分离的t淋巴细胞株或克隆的t淋巴细胞可诱发关节炎,而去除t淋巴细胞则可阻止发病[1];在RA时存在t淋... 详细信息

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是慢性多关节疾病,主要表现为滑膜组织过度增生和炎性细胞浸润.给正常动物关节注射由关节炎动物分离的t淋巴细胞株或克隆的t淋巴细胞可诱发关节炎,而去除t淋巴细胞则可阻止发病[1];在RA时存在t淋巴细胞凋亡不足的现象[2],同时t淋巴细咆可通过分泌多种与破骨形成有关的细胞因子而导致RA的骨破坏[1],故浸润的t淋巴细胞对RA的发生和病理的持续性进展起着重要作用。

关键词： t淋巴细胞凋亡抑制核因子-κB 体内代谢产物红霉素类风湿关节炎炎性细胞浸润 t淋巴细胞株关节疾病过度增生滑膜组织