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一例真间性猪的研究

中国农业科学 2014年第10期47卷 2021-2029页

作者：周怡赵海全刘玉清于辉帅素容李华四川农业大学动物科技学院/动物遗传育种研究所佛山科学技术学院动物科学系

【目的】为探讨间性猪的生殖遗传发育基础和优化猪的种质资源,对一例间性猪进行了外部形态、细胞遗传、性激素、解剖以及组织病理学的研究。【方法】5月龄间性大白猪为试验组,以与试验组同窝的正常公母猪为对照组,分别进行内外生殖器官... 详细信息

【目的】为探讨间性猪的生殖遗传发育基础和优化猪的种质资源,对一例间性猪进行了外部形态、细胞遗传、性激素、解剖以及组织病理学的研究。【方法】5月龄间性大白猪为试验组,以与试验组同窝的正常公母猪为对照组,分别进行内外生殖器官检察;PCR检测sry基因;染色体组型和带型分析,取外周血进行常规短期淋巴细胞培养,获取中期细胞分裂相,制成染色体标本,G显带和C显带处理;放射免疫法测定静脉血睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)、促黄体素(luteinizing hormone,LH)、促卵泡素(folliclestimulating hormone,FSH)、孕酮(progesterone,PRG)和催乳素(prolactin,PRL)含量;生殖腺病理切片制做及观察,取2 cm×2 cm大小生殖腺组织,10%甲醛固定后进行常规石蜡切片制作,苏木(Hematoxylin)与伊红(Eosin)染色(H.E.染色),镜检并显微照相;下丘脑和垂体电镜切片制做及观察,取2 mm×2 mm大小脑部组织,2.5%戊二醛固定后进行常规电镜切片制作,透射电镜观察并拍摄。【结果】结果表明,间性猪外生殖器为雌性表型,外阴位于肛门下方,阴蒂肿大突出于阴门之外,左侧可见睾丸,右侧隐睾,阴囊发育良好。间性猪和正常母猪染色体组型为38,XX,sry阴性,核型组成为10sm+4st+12m+12t,G带带型没有差异,C带的显带基本相似,1、3、4、6、8、9、10、13、14和16号染色体均不同程度显带,以圆形带为主。试验组和对照组各号染色体的相对长度及臂比值差异均不显著(P>0.05)。睾酮和雌二醇水平均介于正常公、母猪之间,促黄体素、促卵泡素、孕酮和催乳素水平均高于正常母猪,LH/FSH比值明显低于正常母猪。剖检发现间性猪有雌雄两性生殖腺,有两个卵睾体,左侧有附睾,子宫体、子宫角和阴道明显退化,阴蒂中隐藏有假阴茎。病理组织镜检发现卵睾体为睾丸和卵巢混合组织,柱状上皮细胞退化,有正常莱氏细胞,无精原细胞或其残留物存在;附睾假复层纤毛柱状上皮细胞正常,内腔无精细胞或其残留物;子宫内膜有较低程度退化,部分内膜腺正常。试验组下丘脑和垂体分泌细胞较对照组发达,促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)神经元核大且饱满,细胞器增多并融合;垂体以促性腺激素细胞为主,细胞数量明显增多,分泌颗粒大小不均;催乳素细胞数量较正常母猪多,分泌颗粒电子密度也较大。【结论】该间性猪为真间性,无染色体易位现象,性激素紊乱,无种用价值。

关键词：真间性猪 sry 细胞遗传解剖病理

林麝及马麝sry基因片段克隆及其在系统进化分析中的应用

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Zoological Research 2004年第4期25卷 334-340页

作者：张亮邹方东陈三赵尔宓岳碧松四川大学生命科学学院四川成都610064 四川养麝研究所四川成都611830

根据已报道的偶蹄目动物并参照人和狗sry基因碱基序列设计一对简并引物 ,以林麝 (Moschusberezovskii)及马麝 (M chrysogaster)基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增出sry基因CDS区。克隆的林麝及马麝sry基因片段经测序 ,其长度为 6 84bp。从... 详细信息

根据已报道的偶蹄目动物并参照人和狗sry基因碱基序列设计一对简并引物 ,以林麝 (Moschusberezovskii)及马麝 (M chrysogaster)基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增出sry基因CDS区。克隆的林麝及马麝sry基因片段经测序 ,其长度为 6 84bp。从父亲遗传角度出发 ,利用GenBank中收录的 18种偶蹄目sry基因 ,用邻位相接法 (NJ)和最大简约法 (MP)分别构建了鹿科、牛科和麝科的系统进化树。聚类树显示麝形成一个单系 ,支持麝作为独立一科的观点。

关键词：林麝马麝 sry 基因片段克隆系统进化父系遗传

Isodicentric Ychromosome: Case Study

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Open Journal of Genetics 2021年第3期11卷 56-62页

作者： Amal Al Wathnani Suha Tashkandi Khelad Al Saidi Kholoud Al Muteiri Wasmaya Al Enezi Pathology and Clinical Laboratory Medicine Administration Cytogenetic Department King Fahad Medical City Riyadh Saudi Arabia

Isodicentric chromosomes are a frequently appearing abnormality in the human Y chromosome. Making predictions regarding the phenotypic outcomes of a variety of duplications/deletions in the dicentric Y chromosome generally depends on the breakpoint location and also the level of mosaicism (45, X cell lines);in certain instances, these may not be detected and result in variations running between male, abnormal female, or ambiguity in individual genitalia. A referral was received from a urology clinic concerning two patients, one aged 34 and one aged 35, with a request to investigate reasons for infertility: G-banded karyotyping and fluorescence in situ hybridization (FISH) revealed the presence of an isodicentric Y chromosome.

关键词： Isodicentric Y Mosaicism Fluorescence in Situ Hybridization sry G-Banded Karyotyping Infertility

8例含Y染色体性腺发育不全患者的sry基因分析

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实用妇产科杂志 2011年第4期27卷 295-297页

作者：周慧梅姚凤霞田秦杰中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院北京100730

目的:研究含Y染色体性腺发育不全女性患者发病的分子机制。方法:应用PCR扩增、DNA序列分析技术对8例性腺发育不全患者进行研究和分析。结果:8例患者均证实存在有sry基因,其中2例检测到有sry基因突变,包括1例新生突变(第272位核苷酸碱基G... 详细信息

目的:研究含Y染色体性腺发育不全女性患者发病的分子机制。方法:应用PCR扩增、DNA序列分析技术对8例性腺发育不全患者进行研究和分析。结果:8例患者均证实存在有sry基因,其中2例检测到有sry基因突变,包括1例新生突变(第272位核苷酸碱基G被C取代);1例已知突变(第192位核苷酸中的碱基G置换为T)。结论:通过对性腺发育不全患者的sry基因分析及突变的发现,有助于发现新的突变并解释性腺发育不全的分子病因。

关键词： Y染色体性腺发育不全 sry 突变

基于sry基因分析梅花鹿的遗传多样性及父系类型

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中国畜牧兽医 2019年第2期46卷 489-496页

作者：董依萌刘华淼玉手英利刘汇涛鞠妍邢秀梅何金明鞠贵春吉林农业大学长春130118 中国农业科学院特产研究所长春130112 日本山形大学

试验旨在研究梅花鹿sry基因的遗传多样性及其父系类型。选取东北亚种、北海道亚种、本州亚种、指名亚种、屋久岛亚种5个亚种的144个个体,利用试剂盒和传统酚/仿(1∶1)法进行DNA的提取,采用PCR扩增和直接测序法分析梅花鹿的核苷酸多样性(... 详细信息

试验旨在研究梅花鹿sry基因的遗传多样性及其父系类型。选取东北亚种、北海道亚种、本州亚种、指名亚种、屋久岛亚种5个亚种的144个个体,利用试剂盒和传统酚/仿(1∶1)法进行DNA的提取,采用PCR扩增和直接测序法分析梅花鹿的核苷酸多样性(Pi)、单倍型多样性(Hd)、遗传距离及系统进化关系。结果显示,试验所获序列长度为1 613bp,在第47、62、602、1 148、1 569、1 604bp处共检测到6个SNPs多态位点,占核苷酸总数的0.3%,碱基替换以碱基转换为主。通过6个SNPs多态位点确立了6种单倍型:Hap-1、Hap-2、Hap-3、Hap-4、Hap-5和Hap-6,其中Hap-4、Hap-5和Hap-6为新发现单倍型。遗传多样性由高至低依次为:指名亚种、屋久岛亚种、东北亚种、本州亚种、北海道亚种。各亚种间遗传距离最小为北海道亚种与本州亚种的距离(0.000056),最大为东北亚种与指名亚种的距离(0.001733)。基于单倍型利用邻接法构建系统进化树,结果显示,与日本梅花鹿相比,东北亚种与马鹿关系更近,东北亚种存在两大分支,日本梅花鹿各亚种间无明显分支,其他单倍型均是由Hap-3进化而来,单倍型最小跨度网络图与系统进化树一致。结果表明,东北梅花鹿存在两大父系类型,日本梅花鹿存在一个父系类型,单倍型Hap-3是日本梅花鹿的原始单倍型。

关键词：梅花鹿 sry 基因遗传多样性父系类型

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大鼠骨髓间充质干细胞对子宫内膜的损伤修复

中国妇产科临床杂志 2019年第3期20卷 240-242页

作者：林彤李冬宏张鲁榕郭玉佳陈丽红陈杏婷连梅林晨深圳市龙华区妇幼保健院生殖医学科 518109 福建医科大学附属第一医院生殖医学中心福建医科大学附属第一医院中心实验室福建医科大学附属第一医院妇产科

目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)移植对大鼠子宫内膜损伤的修复作用。方法 45只雌性SD大鼠分为三组:正常组、模型组、BMSCs组,每组15只。除正常组外,其余两组大鼠采用95%乙醇宫腔注射法建立子宫内... 详细信息

目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)移植对大鼠子宫内膜损伤的修复作用。方法 45只雌性SD大鼠分为三组:正常组、模型组、BMSCs组,每组15只。除正常组外,其余两组大鼠采用95%乙醇宫腔注射法建立子宫内膜损伤模型。正常组不予任何干预,模型组造模后注射PBS溶液,BMSCs组注射体外分离培养的雄性SD大鼠BMSCs悬液。14 d后切除子宫,观察子宫内膜形态学改变、子宫内膜厚度、用免疫组织化学方法检测子宫内膜角蛋白、波形蛋白、整合素β3的表达,通过对移植后子宫内膜组织的sry DNA原位杂交来定位源自雄性供体的细胞。结果与正常组相比,模型组大鼠子宫内膜厚度显著变薄[(276.25±59.46)μm vs(413.52±68.67)μm,P sry阳性细胞的定植,模型组则未见。结论 BMSCs移植能不同程度地促进大鼠损伤子宫内膜的修复。

关键词：大鼠骨髓充质干细胞子宫损伤模型大鼠 sry DNA

牛胚胎性别鉴定与取样胚胎移植应用技术的研究

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畜牧兽医学报 1995年第6期26卷 487-495页

作者：胡明信吴学清曾溢滔黄英陈美珏高建明谢富强张美兰任兆瑞北京农学院畜牧兽医系上海医学遗传研究所

本研究应用ＰＣＲ技术扩增牛ＳＲＹ序列进行奶牛胚胎性别鉴定。经１０９枚鲜、冻胚的移植，获鲜胚移值妊娠率５８．６％（３４／５８），常规冷冻胚胎移植妊娠率４４．４％（１２／２７），一步细管冷冻解冻胚胎移值妊娠率１６．７％（... 详细信息

本研究应用ＰＣＲ技术扩增牛ＳＲＹ序列进行奶牛胚胎性别鉴定。经１０９枚鲜、冻胚的移植，获鲜胚移值妊娠率５８．６％（３４／５８），常规冷冻胚胎移植妊娠率４４．４％（１２／２７），一步细管冷冻解冻胚胎移值妊娠率１６．７％（４／２４）。犊牛性别验证与ＳＲＹ鉴定结果均相符合。实验中对胚胎发育时期的划分，胚胎质量评定和胚龄的确定，胚龄与受体发情时间在移植中的关系，胚胎的切割取样，取样胚胎的冷冻进行了研究。

关键词：牛胚胎 sry 性别鉴定移植

版纳微型猪近交系性别决定基因(sry)原核表达载体的构建及蛋白高效表达

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云南农业大学学报（自然科学版） 2012年第2期27卷 198-202页

作者：霍金龙王配成文敏王淑燕曾养志云南农业大学云南省版纳微型猪近交系重点实验室云南昆明650201 云南农业大学动物科学技术学院云南昆明650201

为了构建版纳微型猪近交系sry的原核表达载体pET-32a(+)-sry,并通过诱导使其在大肠杆菌中获得高效表达,研究采用添加限制性内切酶位点的引物特异性扩增sry,连入pMD19-T simple载体,转化入大肠杆菌DH5α,克隆后提取pMD19-T-sry阳性重组质... 详细信息

为了构建版纳微型猪近交系sry的原核表达载体pET-32a(+)-sry,并通过诱导使其在大肠杆菌中获得高效表达,研究采用添加限制性内切酶位点的引物特异性扩增sry,连入pMD19-T simple载体,转化入大肠杆菌DH5α,克隆后提取pMD19-T-sry阳性重组质粒,使用相同的内切酶同时对pMD19-T-sry质粒和原核表达pET-32a(+)载体进行酶切,连接后使sry定向克隆到pET-32a(+)表达载体中。经PCR、酶切和测序鉴定后,重组质粒转化大肠杆菌感受态DH5α,提取质粒后再次转化大肠杆菌Rosetta(DE3),用不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并通过15%SDS-PAGE鉴定。结果显示,不同浓度IPTG诱导的sry均在大肠杆菌中进行了高效特异性融合表达。

关键词：版纳微型猪近交系 Y染色体性别决定基因 sry 原核表达

在一名XY女性的sry基因中发现的新生突变——Codon 113 GCA→ACA

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科学通报 1992年第22期37卷 2097-2099页

作者：曾溢滔任兆瑞张美兰黄英曾凡一黄淑帧陆建英朱效林上海市儿童医院上海医学遗传研究所上海200040 上海市第一妇婴保健院上海200040

动物性别决定的最新研究成果揭示了在胎生哺乳动物(包括人类)的Y染色体短臂上存在着决定性别的主宰基因sry(Sex-determining region of the Y)。sry是一个高度保守的、核心序列为250个碱基的单拷贝基因。该基因编码主结构为80个氨基酸的... 详细信息

动物性别决定的最新研究成果揭示了在胎生哺乳动物(包括人类)的Y染色体短臂上存在着决定性别的主宰基因sry(Sex-determining region of the Y)。sry是一个高度保守的、核心序列为250个碱基的单拷贝基因。该基因编码主结构为80个氨基酸的DNA结合蛋白质,它具有HMG盒(high mobility group box)的特征。

关键词：性反转 sry 基因突变女性