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人参皂苷Rb1改善拘束应激合并脂多糖诱导的小鼠免疫性肝损伤的作用机制研究

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中草药 2022年第13期53卷 4028-4034页

作者：王国恩杨帆刘心雨叶钰菁王若鸿吕茜婷刘小婷广东药科大学广东广州510006

目的研究人参皂苷Rb对拘束应激(restraint stress,RS)合并脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的免疫性肝损伤小鼠的保肝作用及其机制。方法BALB/c小鼠预先给予人参皂苷Rb(15 mg/kg)共7 d,给予RS(18 h)合并15μg/kg LPS诱发免疫性肝损... 详细信息

目的研究人参皂苷Rb对拘束应激(restraint stress,RS)合并脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的免疫性肝损伤小鼠的保肝作用及其机制。方法BALB/c小鼠预先给予人参皂苷Rb(15 mg/kg)共7 d,给予RS(18 h)合并15μg/kg LPS诱发免疫性肝损伤。取小鼠肝脏进行组织学观察、免疫组化和生化指标检测,基因和蛋白表达检测,利用网络药理学预测人参皂苷Rb的潜在信号通路并加以验证。结果人参皂苷Rb改善RS合并LPS诱导肝损伤小鼠的肝脏炎性细胞浸润、脂肪空泡以及炎症坏死现象;显著抑制肝组织白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)表达(PSirtuin-3(SIRT3)蛋白表达水平(P3的下游靶标叉头框转录因子O3(forkhead box O3,FoxO3)的基因表达有关(P3/FoxO3/SOD功能有关。

关键词：人参皂苷Rb1 免疫性肝损伤氧化应激 Sirtuin-3 超氧化物歧化酶

α-硫辛酸抑制慢性低氧大鼠骨骼肌线粒体的氧化应激

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中国组织工程研究 2013年第28期17卷 5216-5222页

作者：肖频庞奕辉彭朋薄海武警后勤学院军事训练医学教研室天津市300162 武警江西总队医院药剂科江西省南昌市330001 武警后勤学院远程继续教育处天津市300162

背景:α-硫辛酸被誉为"全能抗氧化剂"和"线粒体营养剂",但其是否可用于慢性低氧骨骼肌的防护,及其相关机制尚不清楚。目的:观察α-硫辛酸对慢性低氧大鼠骨骼肌线粒体活性氧生成及抗氧化酶系的作用,并探讨α-硫辛酸作用的相关信号通路。... 详细信息

背景:α-硫辛酸被誉为"全能抗氧化剂"和"线粒体营养剂",但其是否可用于慢性低氧骨骼肌的防护,及其相关机制尚不清楚。目的:观察α-硫辛酸对慢性低氧大鼠骨骼肌线粒体活性氧生成及抗氧化酶系的作用,并探讨α-硫辛酸作用的相关信号通路。方法:将36只SD大鼠随机分为常氧对照组、单纯低氧组和单纯低氧+α-硫辛酸组。低氧干预为常压低氧帐篷,氧体积分数设定为11.3%;α-硫辛酸干预为标准饲料中添加α-硫辛酸(0.25%)。各种干预均持续4周。结果与结论:α-硫辛酸显著上调Sirtuin-3表达,提高线粒体ATP合成活力和膜电位,上调线粒体态3呼吸速率、呼吸控制比和磷氧比,下调态4呼吸速率,促进并上调锰超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶等线粒体抗氧化酶系活性,从而抑制线粒体H2O2产生速率,降低线粒体丙二醛含量。表明α-硫辛酸可提高慢性低氧骨骼肌线粒体能量代谢效率,抑制活性氧生成。并通过提高线粒体抗氧化酶系活性,抑制低氧诱导的氧化应激。α-硫辛酸对低氧骨骼肌线粒体的保护效应可能与其上调态3呼吸速率有关。

关键词：组织构建组织构建细胞学实验肌肉肌腱韧带慢性低氧 α-硫辛酸线粒体 Sirtuin-3 氧化应激骨骼肌省级基金

亚低温对大鼠自发性蛛网膜下腔出血急性期脑组织线粒体功能的影响

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中华神经医学杂志 2014年第3期13卷 239-245页

作者：薄海彭朋秦永生王大宁刘暌康伟民武警后勤学院军事训练医学教研室天津300121 天津市心血管重塑与靶器官损伤重点实验室天津市环湖医院神经外科 300060 解放军第二炮兵总医院神经介入科北京100080

目的观察亚低温对大鼠自发性蛛网膜下腔出血（SAH）急性期脑组织线粒体活性氧（ROS）生成及能量代谢的影响，并探讨亚低温作用的相关信号通路。方法SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH常温组和SAH亚低温组（每组各6只），后两组采... 详细信息

目的观察亚低温对大鼠自发性蛛网膜下腔出血（SAH）急性期脑组织线粒体活性氧（ROS）生成及能量代谢的影响，并探讨亚低温作用的相关信号通路。方法SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH常温组和SAH亚低温组（每组各6只），后两组采用视交叉前池注血法建立SAH模型，SAH亚低温组在脑池注血后即刻给予亚低温干预（32．5～33．5℃1。各组大鼠于SAH后2h处死取材，电镜下观察海马CA1区超微结构，比色法检测线粒体锰超氧化物歧化酶（MnSOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（OPx）、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）含量，极谱法检测线粒体呼吸速率。二氯荧光素法检测线粒体ROS生成速率，JC-1荧光标记法检测膜电位，荧光素酶发光法检测线粒体ATP合成活力。实时荧光定量PCR法检测脑组织sirtuin．3（SIRT3）mRNA表达，Westernblotting法检测线粒体S1RT3蛋白表达。结果与SAH常温组比较，SAH亚低温组SIRT3mRNA和蛋白表达、线粒体ATP合成活力和膜电位，线粒体态3呼吸速率[（55．26±6．30）nmol02／min·mg蛋白]、呼吸控制比（5．15％±0．63％）、磷氧比（2．16％±0．25％），MnSOD、GPx、CAT活性均明显上调，差异均有统计学意义（P〈0．05）；SAH亚低温组线粒体态4呼吸速率[（10．67±1．69）nmool O2/min·mg蛋白]、ROS产生速率及MDA含量明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论亚低温可提高线粒体能量代谢效率及ROS清除能力，增强脑组织对SAH的耐受力。

关键词：蛛网膜下腔出血亚低温线粒体能量代谢氧化应激 Sirtuin-3

pSilencer 3.1-Sirt3基因RNA干扰表达载体的构建及鉴定

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山西医科大学学报 2017年第7期48卷 650-653页

作者：曲璇李军马晓军韩洛川史海龙陕西中医药大学基础医学院生物学教研室咸阳712046

目的构建Sirt3基因的RNA干扰载体,并在真核细胞中进行pSilencer 3.1-Sirt3的功能鉴定。方法利用体外DNA合成技术及液相色谱纯化技术合成Sirt3干扰序列,通过酶切将干扰序列连接至pSilencer 3.1载体中,将阳性克隆载体转入感受态大肠杆菌... 详细信息

目的构建Sirt3基因的RNA干扰载体,并在真核细胞中进行pSilencer 3.1-Sirt3的功能鉴定。方法利用体外DNA合成技术及液相色谱纯化技术合成Sirt3干扰序列,通过酶切将干扰序列连接至pSilencer 3.1载体中,将阳性克隆载体转入感受态大肠杆菌细胞后,筛选阳性克隆,通过第二代体外DNA测序技术进行序列测定。将测序正确的克隆用于Western blot实验和real time PCR实验,以对其在真核细胞中的正确表达和内源性Sirt3的干涉效果进行鉴定。结果 PCR扩增得到序列测定结果与干扰序列完全一致。构建的pSilencer 3.1-Sirt3质粒在AGS和SGC-7901细胞中进行基因的转染,pSilencer3.1-Sirt3能够有效抑制内源性Sirt3的mRNA水平和蛋白质水平的表达。结论成功构建获得Sirt3干扰载体,并有效降低Sirt3的mRNA和蛋白质水平的表达,为今后Sirt3的功能研究提供良好的基础。

关键词： Sirtuin-3 RNA干扰载体构建