检索结果-南通市图书馆

中国药房 2021年第23期32卷 2875-2879页

作者：冯磊杨建敏杨然孙丽董莉丽张清伟南阳市中心医院妇科河南南阳473000 漯河医学高等专科学校第一附属医院妇科河南漯河462000

目的:研究槲皮素对人宫颈鳞癌顺铂耐药细胞siha/ddp的逆转作用。方法:测定顺铂对siha/ddp细胞的耐药指数以及槲皮素对siha/ddp细胞的逆转耐药倍数;考察槲皮素(0.005μg/mL)、顺铂(2.5μg/mL)、顺铂联合槲皮素(2.5μg/mL顺铂+0.005μg/m... 详细信息

目的:研究槲皮素对人宫颈鳞癌顺铂耐药细胞siha/ddp的逆转作用。方法:测定顺铂对siha/ddp细胞的耐药指数以及槲皮素对siha/ddp细胞的逆转耐药倍数;考察槲皮素(0.005μg/mL)、顺铂(2.5μg/mL)、顺铂联合槲皮素(2.5μg/mL顺铂+0.005μg/mL槲皮素)、槲皮素联合通路抑制剂(0.005μg/mL槲皮素+20 nmol/L雷帕霉素)对siha/ddp细胞凋亡率及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白[PI3K、Akt、mTOR、肿瘤多药耐药蛋白(P-gp)、p70核糖体S6激酶(p70S6K)]表达的影响。结果:顺铂对siha/ddp细胞的耐药指数为5.19,槲皮素对siha/ddp细胞的逆转耐药倍数为4.00。与单用顺铂和单用槲皮素比较,顺铂联合槲皮素、槲皮素联合雷帕霉素均可显著升高siha/ddp细胞的凋亡率(Psiha/ddp细胞对顺铂的耐药性,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达有关。

关键词：槲皮素宫颈鳞癌 siha/ddp细胞 PI3K/Akt/mTOR信号通路耐药性逆转

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中华实用诊断与治疗杂志 2023年第3期37卷 252-260页

作者：夏娜娜杨安银余敏敏南京中医药大学附属南京医院、南京市第二医院妇科江苏南京210003

目的应用生物信息学方法筛选宫颈癌顺铂耐药相关的枢纽基因,探讨KRT6A表达对顺铂耐药宫颈癌siha细胞生物学行为的影响。方法(1)收集TCGA数据库306份宫颈癌标本的mRNA表达数据,基于GDSC数据库,应用R软件包“pRRophetic”预测宫颈癌样本... 详细信息

目的应用生物信息学方法筛选宫颈癌顺铂耐药相关的枢纽基因,探讨KRT6A表达对顺铂耐药宫颈癌siha细胞生物学行为的影响。方法(1)收集TCGA数据库306份宫颈癌标本的mRNA表达数据,基于GDSC数据库,应用R软件包“pRRophetic”预测宫颈癌样本顺铂化疗的敏感度,采用线性回归分析顺铂的半数抑制浓度(the half inhibitory concentration,IC_(50))。依据IC_(50)值将宫颈癌样本分为顺铂敏感组和耐药组,应用limma软件包进行差异表达mRNA分析,对其进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,应用Cytoscape软件构建差异表达基因的蛋白互作网络,进行模块分析并筛选枢纽基因。选择KRT6A基因进行细胞实验。(2)取对数生长期siha和顺铂耐药siha(siha/ddp)细胞,采用实时荧光定量PCR法检测KRT6A mRNA相对表达量;分别应用0、0.625、1.25、2.5、5、10、20 mg/L顺铂处理48 h,采用CCK-8法检测2组细胞增殖率。(3)取对数生长期siha/ddp细胞分为转染组(转染siRNA-KRT6A)和对照组(转染siRNA-NC),转染48 h,2组采用实时荧光定量PCR法检测KRT6A mRNA相对表达量,采用Western blot法检测KRT6A蛋白相对表达量;然后采用CCK-8法检测应用0、0.625、1.25、2.5、5、10、20 mg/L顺铂处理48 h细胞增殖,计算顺铂的IC_(50)值。转染48 h取转染组和对照组细胞,应用5 mg/L(IC_(50)值)浓度的顺铂处理48 h,采用流式细胞术检测处理0、48 h时细胞凋亡。结果(1)顺铂敏感组与顺铂耐药组差异表达基因有190个,与顺铂敏感组比较,顺铂耐药组74个基因表达上调、116个基因表达下调。GO分析结果提示差异表达基因参与表皮发育、肽酶活性调节、角质形成细胞分化、蛋白质水解和水解酶活性的负调控等生物过程,其产物参与细胞间连接、顶端质膜、中间体、侧质膜等细胞组分,发挥丝氨酸型内肽酶抑制剂活性、氧化还原酶活性、钙依赖性蛋白结合和细胞骨架的结构成分等生物学分子功能。KEGG富集分析结果显示,差异表达基因主要富集于雌激素信号通路、补体和凝血级联反应、白细胞介素-17信号通路、酪氨酸代谢、肾素分泌和组氨酸代谢等。通过蛋白互作网络和聚类分析得到6个宫颈癌顺铂耐药的枢纽基因,分别为KRT6A、KRT5、KRT14、SPRR1B、KRT16和SPRR1A。(2)siha/ddp细胞KRT6A mRNA相对表达量(6.310±0.417)高于siha细胞(1.000±0.110)(t=21.314,Psiha/ddp细胞增殖率[(72.461±3.598)%、(70.862±3.474)%、(63.013±3.565)%、(47.754±5.023)%]均高于siha细胞[(50.702±6.477)%、(22.593±4.413)%、(5.964±1.396)%、(3.555±1.263)%](t=5.086,P=0.007;t=14.886,P细胞增殖率[(65.676±3.358)%、(53.150±1.902)%、(40.932±2.455)%、(33.580±2.949)%、(18.042±3.183)%]均低于对照组[(75.557±3.573)%、(66.144±3.843)%、(53.801±2.276)%、(41.683±1.422)%、(28.953±3.065)%](t=3.529,P=0.024;t=5.294,P=0.006;t=6.658,P=0.003;t=4.287,P=0.013;t=4.276,P=0.013)。5 mg/L顺铂处理0、48 h,转染组细胞凋亡率[(14.039±2.410)%、(32.963±3.133)%)]高于对照组[(4.455±1.028)%、(23.004±3.613)%](t=6.377,P=0.003;t=3.594,P=0.022)。结论宫颈癌顺铂耐药的枢纽基因主要有KRT6A、KRT5、KRT14、SPRR1B、KRT16和SP

关键词：宫颈癌差异表达基因顺铂耐药 KRT6A基因 siha细胞 siha/ddp细胞

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