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通过失活sec途径阻遏蛋白和胞外蛋白酶提高地衣芽孢杆菌产碱性蛋白酶的能力

中国生物工程杂志 2024年第2期44卷 39-47页

作者：郝漫惠威邵岚莹史超硕路福平张会图天津科技大学生物工程学院应用微生物与酶工程实验室天津300457

为了探究sec分泌途径对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)碱性蛋白酶产量的影响,对地衣芽孢杆菌TCCC11470(BLΔuppΔepsΔpgs)中的分子伴侣阻遏蛋白基因hrcA和基因组中3个sec途径分泌的胞外蛋白酶基因epr、bpr和vpr进行叠加敲除。... 详细信息

为了探究sec分泌途径对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)碱性蛋白酶产量的影响,对地衣芽孢杆菌TCCC11470(BLΔuppΔepsΔpgs)中的分子伴侣阻遏蛋白基因hrcA和基因组中3个sec途径分泌的胞外蛋白酶基因epr、bpr和vpr进行叠加敲除。通过对比分析基因缺失前后的碱性蛋白酶酶活力发现,敲除菌株TCCC11470ΔhrcA和TCCC11470ΔhrcAΔeprΔbprΔvpr在42 h的碱性蛋白酶酶活力分别达到18521.2 U/mL和20048.5 U/mL,分别高出对照菌株BLΔuppΔepsΔpgs(14478.6 U/mL)27.9%和38.5%。这一结果指出,通过改进sec分泌通路可以显著提升碱性蛋白酶的催化效能,为构建优化的工业酶生产宿主提供了新思路和研究方向。

关键词：地衣芽孢杆菌 sec分泌途径碱性蛋白酶 HrcA 胞外蛋白酶

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青春双歧杆菌ATCC15703I型sec途径分泌蛋白的预测和功能分析

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安徽农业科学 2017年第12期45卷 136-138页

作者：朱德全周金影张跃华张武佳木斯大学理学院黑龙江佳木斯 154007 佳木斯大学农业与环境生物技术研究所黑龙江佳木斯 154007 佳木斯大学生命科学学院黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学理学院黑龙江佳木斯154007

[目的]对青春双歧杆菌分泌蛋白进行预测和功能分析,为分析该菌胞外蛋白的分泌机制和功能打下基础.[方法]以青春双歧杆菌代表菌株ATCC15703基因组编码蛋白序列为研究对象,采用 SignalP 4.0和TMHMM 2.0 软件分析该菌株的I型sec途径分泌蛋... 详细信息

[目的]对青春双歧杆菌分泌蛋白进行预测和功能分析,为分析该菌胞外蛋白的分泌机制和功能打下基础.[方法]以青春双歧杆菌代表菌株ATCC15703基因组编码蛋白序列为研究对象,采用 SignalP 4.0和TMHMM 2.0 软件分析该菌株的I型sec途径分泌蛋白,同时采用COG功能数据库(Cluster of Orthologous Groups of proteins)对预测的这类分泌蛋白进行功能分析.[结果]青春双歧杆菌ATCC15703的1 648个蛋白中有91个被I 型(Spase I)信号肽酶识别的I型sec途径分泌蛋白,分泌蛋白的信号肽长度最大的有54个氨基酸,最小的有11个氨基酸.I 型sec途径分泌蛋白的功能分析结果显示,分泌蛋白主要参与碳水化合物代谢与转运,氨基酸代谢与转运,复制、重组和修复,以及无机离子代谢和转运.[结论]青春双歧杆菌I型sec途径分泌蛋白的预测和功能分析为了解该菌胞外蛋白的分泌机制提供了数据基础.

关键词：青春双歧杆菌基因组分泌蛋白 sec分泌途径信号肽

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青春双歧杆菌ATCC15703 Ⅰ型sec途径分泌蛋白的预测和功能分析

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安徽农业科学 2017年第12期45卷 136-138,143页

作者：朱德全周金影张跃华张武佳木斯大学理学院黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学农业与环境生物技术研究所黑龙江佳木斯154007 佳木斯大学生命科学学院黑龙江佳木斯154007

[目的]对青春双歧杆菌分泌蛋白进行预测和功能分析,为分析该菌胞外蛋白的分泌机制和功能打下基础。[方法]以青春双歧杆菌代表菌株ATCC15703基因组编码蛋白序列为研究对象,采用Signal P 4.0和TMHMM 2.0软件分析该菌株的Ⅰ型sec途径分泌蛋... 详细信息

[目的]对青春双歧杆菌分泌蛋白进行预测和功能分析,为分析该菌胞外蛋白的分泌机制和功能打下基础。[方法]以青春双歧杆菌代表菌株ATCC15703基因组编码蛋白序列为研究对象,采用Signal P 4.0和TMHMM 2.0软件分析该菌株的Ⅰ型sec途径分泌蛋白,同时采用COG功能数据库(Cluster of Orthologous Groups of proteins)对预测的这类分泌蛋白进行功能分析。[结果]青春双歧杆菌ATCC15703的1 648个蛋白中有91个被Ⅰ型(Spase Ⅰ)信号肽酶识别的Ⅰ型sec途径分泌蛋白,分泌蛋白的信号肽长度最大的有54个氨基酸,最小的有11个氨基酸。Ⅰ型sec途径分泌蛋白的功能分析结果显示,分泌蛋白主要参与碳水化合物代谢与转运,氨基酸代谢与转运,复制、重组和修复,以及无机离子代谢和转运。[结论]青春双歧杆菌Ⅰ型sec途径分泌蛋白的预测和功能分析为了解该菌胞外蛋白的分泌机制提供了数据基础。

关键词：青春双歧杆菌基因组分泌蛋白 sec分泌途径信号肽

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变形链球菌致龋毒力因子蛋白分泌机制的研究

变形链球菌致龋毒力因子蛋白分泌机制的研究

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2007年第七次全国牙体牙髓病学学术会议

作者：黄梅靖边专武汉大学口腔医学院牙体牙髓科口腔生物医学工程教育部重点实验室武汉大学口腔医学院牙体牙髓科口腔生物医学工程教育部重点实验室

目的:牙菌斑生物膜中的变形链球菌是人类龋病的主要致病菌,它产生的致龋毒力因子与牙菌斑形成及龋病的发生密切相关;sec分泌途径在多种细菌的蛋白分泌中发挥作用。本研究首次探讨sec分泌途径在变形链球菌蛋白分泌过程中的作用, 同时结... 详细信息

目的:牙菌斑生物膜中的变形链球菌是人类龋病的主要致病菌,它产生的致龋毒力因子与牙菌斑形成及龋病的发生密切相关;sec分泌途径在多种细菌的蛋白分泌中发挥作用。本研究首次探讨sec分泌途径在变形链球菌蛋白分泌过程中的作用, 同时结合生物膜形成过程重点研究变链菌毒力因子分泌的变化。方法:①使用免疫金标技术观察与蛋白分泌有关的微结构区域,进行sec蛋白的亚细胞定位;②通过体外构建生物膜模型,以变形链球菌毒力因子GTF、FTF和Pac为示踪靶,比较在生物膜（牙菌斑）状态下和浮游状态中不同时期sec蛋白功能的差异;③观察应激环境对变形链球菌sec分泌途径的调节和影响;④构建sec蛋白缺陷株,观察变形链球菌生长和蛋白分泌及形成牙菌斑的变化。结果:实验证实sec分泌途径在变形链球菌的蛋白分泌中发挥重要的作用,并且sec蛋白在变形链球菌不同生长状态下的表达有显著差异。在生物膜状态下,变形链球菌毒力因子的分泌明显增加。结论:实验结果提示sec蛋白可能在牙菌斑生物膜的形成中发挥作用。本研究有助于深入认识sec分泌途径对变形链球菌致龋毒力因子分泌及牙菌斑形成的影响,可能对致龋牙菌斑的形成产生新的认识。

关键词：变形链球菌生物膜蛋白分泌 sec分泌途径

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