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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3反式激活sv40病毒早期启动子的研究

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解放军医学杂志 2003年第1期28卷 44-46页

作者：刘妍成军牟劲松陆荫英王建军李克王琳张玲霞解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

聚合酶链反应(PCR)扩增丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白NS3基因 ,克隆至真核表达载体pcDNA3 1(- )中 ,构建HCV　NS3基因真核表达载体 pcDNA3 1(- ) NS3;以该质粒转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞 ,免疫印迹方法 (Westernblotting)检测转染... 详细信息

聚合酶链反应(PCR)扩增丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白NS3基因 ,克隆至真核表达载体pcDNA3 1(- )中 ,构建HCV　NS3基因真核表达载体 pcDNA3 1(- ) NS3;以该质粒转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞 ,免疫印迹方法 (Westernblotting)检测转染细胞中HCVNS3蛋白的瞬时表达 ;与报告质粒pCAT3 promoter共转染HepG2细胞 ,用酶联免疫吸附方法 (ELISA)检测细胞中氯霉素乙酰转移酶 (CAT)的表达活性。结果显示 ,质粒pcDNA3 1(- ) NS3在HepG2细胞瞬时表达HCVNS3蛋白 ,共转染实验中pcDNA3 1(- ) NS3组的CAT表达活性是空质粒对照组的 4 6倍。表明构建的表达载体能在哺乳动物细胞中表达出相应蛋白 ,并能够反式激活sv4 0病毒早期启动子。本研究为进一步克隆HCVNS3蛋白反式激活的靶基因。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3 反式激活 sv40病毒早期启动子

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恒河猴外周血及肾组织sv40病毒基因分析

中国病毒学 2003年第1期18卷 79-81页

作者：刘建生刘馨徐冬蕾邵聪文侯宗柳中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所云南昆明650118

sv40即猿猴病毒40(simian virus 40),是DNA肿瘤病毒的原型代表,其基因结构为共价闭合环状双股DNA分子,标准参考株sv40-776含5243个核甘酸,不同分离株bp数略有差异.

关键词： sv40病毒大T抗原小T抗原恒河猴

动物园工作人员感染sv40病毒的危险情况不详

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传染病网络动态 2005年第2期 6-7页

作者：张薇

据*** 12月14日报道(原载J Infect Dis 2004；39：190)，对254例北美动物园工作人员的研究提示，与灵长类的动物有密切接触的动物园工作人员的猿病毒40(sv40)感染危险呈上升趋势。但要明确感染风险的确切水平以及是否人感染sv40后不会... 详细信息

据*** 12月14日报道(原载J Infect Dis 2004；39：190)，对254例北美动物园工作人员的研究提示，与灵长类的动物有密切接触的动物园工作人员的猿病毒40(sv40)感染危险呈上升趋势。但要明确感染风险的确切水平以及是否人感染sv40后不会发病等具体情况则需要进行大样本调查才能明确。

关键词：感染工作人员密切接触 sv40病毒危险发病大样本动物园

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sv40病毒与人类肿瘤

抗癌 2002年第2期18卷 45-45页

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sv40病毒对体外培养的人角朊细胞的转化

第四军医大学学报 1999年第5期20卷 382-385页

作者：苏映军陈璧汤朝武胡大海姜笃银贾赤宇第四军医大学西京医院整形外科中心烧伤外科

目的：研究ＳＶ４０（ｓｉｍｉａｎｖｉｒｕｓ４０）病毒对人角朊细胞的体外转化作用以及转化后细胞生物学特性的改变．方法：采用体外共培养法以ＳＶ４０野生型病毒感染人包皮角朊细胞，观察病毒基因在细胞内的表达以及细胞表型的改变... 详细信息

目的：研究ＳＶ４０（ｓｉｍｉａｎｖｉｒｕｓ４０）病毒对人角朊细胞的体外转化作用以及转化后细胞生物学特性的改变．方法：采用体外共培养法以ＳＶ４０野生型病毒感染人包皮角朊细胞，观察病毒基因在细胞内的表达以及细胞表型的改变情况．结果：分离获得了可长期体外培养的ＳＶ４０转化细胞克隆，已传２３代以上，体外存活超过２５０ｄ；ＤＮＡ印迹实验显示ＳＶ４０大Ｔ基因已整合至细胞染色体内，间接免疫荧光检测示多数细胞胞核内有大Ｔ基因产物的表达；转化细胞对裸鼠无致瘤性，并可正常表达角蛋白．结论：ＳＶ４０病毒转化人角朊细胞后可使其在体外长期培养，该细胞的获得为进一步研究外源性基因对角朊细胞生长的调控奠定了基础．

关键词： sv40病毒角朊细胞细胞转化体外培养

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多瘤病毒及其相关的移植肾病

中华肾脏病杂志 2005年第9期21卷 558-560页

作者：刘龙山王长希中山大学附属第一医院器官移植外科广州510080

多瘤病毒(polyoma virus)属乳多空病毒科,目前已知13种,其中与人类相关的主要有BK多瘤病毒(BKV)、JC病毒(JCV)和sv 40病毒.多瘤病毒相关的移植肾病(PVN),多数由BKV感染引起,因此常被称为BKV相关的移植肾病(BKVN).BKV于1971年从1例肾移... 详细信息

多瘤病毒(polyoma virus)属乳多空病毒科,目前已知13种,其中与人类相关的主要有BK多瘤病毒(BKV)、JC病毒(JCV)和sv 40病毒.多瘤病毒相关的移植肾病(PVN),多数由BKV感染引起,因此常被称为BKV相关的移植肾病(BKVN).BKV于1971年从1例肾移植术后输尿管狭窄的患者体内分离而得.

关键词： BK多瘤病毒肾移植肾病病毒感染性疾病术后输尿管狭窄 sv40病毒乳多空病毒肾功能丧失 BKV

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sv40大T抗原在人脑肿瘤中的表达

肿瘤 1999年第5期19卷 272-274页

作者：甄海宁章翔步星耀张志文黄文晋张萍梁景文王西玲中国人民解放军第四军医大学西京医院神经外科西安710032 河南省人民医院神经外科中国人民解放军第四军医大学神经科学研究所西安710032

目的　检测ＳＶ４０早期区域基因编码产物大Ｔ抗原（Ｔａｇ）在人脑肿瘤中的表达，探讨ＳＶ４０与人脑肿瘤发生的病因学关系。方法　采用免疫共沉淀、银染色及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测６５例人脑肿瘤组织、８例正常人... 详细信息

目的　检测ＳＶ４０早期区域基因编码产物大Ｔ抗原（Ｔａｇ）在人脑肿瘤中的表达，探讨ＳＶ４０与人脑肿瘤发生的病因学关系。方法　采用免疫共沉淀、银染色及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测６５例人脑肿瘤组织、８例正常人脑组织及２株人脑胶质瘤细胞系中Ｔａｇ的表达。结果　Ｔａｇ在８例室管膜瘤、２例脉络丛乳头状瘤及２株人脑胶质瘤细胞系中全部表达；垂体腺瘤Ｔａｇ阳性率为９０％（９／１０），星形胶质细胞瘤７３％（１１／１５），脑膜瘤７０％（７／１０），多形性胶质母细胞瘤５０％（４／８），髓母细胞瘤３３％（２／６）；５例少枝胶质细胞瘤、１例松果体瘤及８例正常人脑组织无Ｔａｇ表达。结论　ＳＶ４０感染与人脑肿瘤的发生有一定关系。

关键词： sv40病毒抗原多瘤病毒转化脑肿瘤

sv40大T抗原在人脑肿瘤中与p53形成特异性复合物

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中华实验和临床病毒学杂志 2001年第1期15卷 73-76页

作者：甄海宁章翔步星耀黄文晋张萍梁景文王西玲陈镔复张志文易声禹西安第四军医大学西京医院神经外科 710032 全军神经科学研究所

目的　探讨sv40早期区域基因编码产物大T抗原 (Tag)表达及与抑癌蛋白p5 3的相互作用在人脑肿瘤发生发展中的意义。方法　采用免疫共沉淀及Western印迹法检测 43例人脑肿瘤组织及 5例正常人脑组织中Tag的表达 ,并对 18例Tag阳性瘤组织检... 详细信息

目的　探讨sv40早期区域基因编码产物大T抗原 (Tag)表达及与抑癌蛋白p5 3的相互作用在人脑肿瘤发生发展中的意义。方法　采用免疫共沉淀及Western印迹法检测 43例人脑肿瘤组织及 5例正常人脑组织中Tag的表达 ,并对 18例Tag阳性瘤组织检测Tag p5 3复合物的存在。结果　Tag在 5例室管膜瘤及 2例脉络丛乳头状瘤中全部表达 ,垂体腺瘤 (5 / 6 )、星形胶质细胞瘤 (7/10 )、脑膜瘤 (4 / 6 )、多形性胶质母细胞瘤 (3/ 5 )及髓母细胞瘤 (2 / 5 )均有Tag的表达 ,3例少枝胶质细胞瘤、1例松果体瘤及 5例正常人脑组织无Tag表达 ;检测 18例Tag阳性瘤组织均发现Tag与 p5 3形成特异性复合物。结论　在人脑肿瘤组织中Tag广泛表达 ,Tag可与p5 3形成特异性复合物 ,Tag p5 3特异性复合物的形成导致 p5 3失活。

关键词： sv40病毒 T抗原抑癌蛋白P53 脑肿瘤

具有软骨细胞表型特征的永生化兔髁突软骨细胞系的建立

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实用口腔医学杂志 2002年第1期18卷 26-28页

作者：段小红吴军正杨彤元王会信西安第四军医大学口腔医学院 710032 美国Schering-Plough研究所北京军事医学科学院基础所

目的 :建立具有稳定软骨细胞表型特征的永生化兔髁突细胞系。方法 :采用逆转录病毒载体介导的方法将sv40大T抗原基因导入原代培养的兔髁突软骨细胞 ,利用G418筛选阳性克隆并对其进行扩大培养 ,通过RNA点杂交检测转基因细胞I、II型胶原... 详细信息

目的 :建立具有稳定软骨细胞表型特征的永生化兔髁突细胞系。方法 :采用逆转录病毒载体介导的方法将sv40大T抗原基因导入原代培养的兔髁突软骨细胞 ,利用G418筛选阳性克隆并对其进行扩大培养 ,通过RNA点杂交检测转基因细胞I、II型胶原基因的转录。结果 :有一株克隆在体外 1年半稳定传代10 0次以上 ,命名为永生化髁突软骨细胞系 (immortalizedmandibularcondylarchondrocyte ,IMCC) ,点杂交显示IMCC有I、II型前胶原基因的转录。结论 :获得具有稳定软骨细胞表型特征的永生化兔髁突细胞系。

关键词：软骨细胞表型特征永生化 sv40病毒兔下颌骨髁状突软骨细胞系建立