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白藜芦醇降低缺氧诱导因子1α蛋白sumo化抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成

中华皮肤科杂志 2023年第11期56卷 1035-1042页

作者：盛凤国书雅鲍京京张春艳刘晓智邢卫斌天津市第五中心医院皮肤科天津300450 天津市第五中心医院天津市早产儿器官发育表观遗传重点实验室天津300450 天津中医药大学研究生院天津301617 天津市中医药研究院附属医院皮肤科天津300120

目的从蛋白质泛素/类泛素化修饰平衡角度探讨白藜芦醇抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成的内在机制。方法以人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象,分别给予培养基中加入50μmol/L和100μmol/L白藜芦醇处理对数生长期A431细胞作为实验组,... 详细信息

目的从蛋白质泛素/类泛素化修饰平衡角度探讨白藜芦醇抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成的内在机制。方法以人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象,分别给予培养基中加入50μmol/L和100μmol/L白藜芦醇处理对数生长期A431细胞作为实验组,以不加白藜芦醇培养基处理为对照组。按照上述实验分组,培养48 h采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)实验检测各组细胞增殖活性;采用血管模拟形成实验检测白藜芦醇处理12 h对A431细胞血管拟态形成能力的影响;采用Western印迹检测白藜芦醇处理48 h各组细胞泛素(ubiquitin)、小泛素相关修饰蛋白1(sumo1)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)相对表达水平。将24只8周龄BALB/c雄性去胸腺小鼠随机均分3组,于腹股沟皮下接种A431细胞,治疗组予1 mg/kg或2 mg/kg白藜芦醇腹腔注射给药,对照组注射相同体积的生理NaCl溶液,每3天注射1次,第21天处死小鼠,解剖肿瘤称重;采用免疫组化检测各组肿瘤组织中CD31的表达。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果对照组、50μmol/L组、100μmol/L组A431细胞增殖率差异有统计学意义(F=17.75,P=0.017),50μmol/L组、100μmol/L组低于对照组(66.53%±5.09%、35.88%±4.28%比100%,LSD-t=21.17、29.04,P=0.011、0.004);3组A431细胞血管管壁样细胞嵴的总长度差异有统计学意义(F=21.37,P=0.004),50μmol/L组、100μmol/L组低于对照组[(102.73±11.36)μm、(37.83±4.19)μm比(185.26±8.02)μm,均Psumo1、HIF-1α、VEGFR相对表达差异均有统计学意义,50μmol/L组、100μmol/L组泛素相对表达均高于对照组(2.09±0.13、3.53±0.16比0.68±0.11,均Psumo1、HIF-1α、VEGFR的相对表达均低于对照组(sumo1:1.87±0.13、1.02±0.11比3.10±0.11,HIF-1α:0.81±0.06、0.45±0.06比0.97±0.08,VEGFR:0.73±0.09、0.39±0.05比0.98±0.07,均P1 mg/kg组、2 mg/kg组小鼠皮下肿瘤质量[(3.29±0.57)g、(2.91±0.49)g、(2.55±0.52)g]、肿瘤组织CD31细胞阳性率(76.24%±5.51%、39.45%±5.48%、12.07%±3.54%)差异均有统计学意义(F=14.33、15.34,P=0.019、0.021),1 mg/kg组、2 mg/kg组均低于对照组(均P1α蛋白泛素/类泛素化修饰途径抑制皮肤鳞癌新生血管形成有关。

关键词：肿瘤,鳞状细胞细胞增殖泛素 sumo1蛋白缺氧诱导因子1,α亚基小鼠,近交BALB C 白藜芦醇 A431细胞系血管生成抑制

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小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶1介导糖尿病性血管内皮细胞损伤修复的研究

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中华老年心脑血管病杂志 2020年第4期22卷 414-418页

作者：李萍李丽丽李艳霞马晓芳边希云肖晓琳张春艳刘凤婷刘晓智天津市第五中心医院康复理疗科 300450 天津市第五中心医院中心实验室 300450 天津市肿瘤医院骨与软组织肿瘤科天津市滨海新区中医医院药学科中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市放射医学分子核医学重点实验室

目的利用小泛素相关修饰体(sumo)特异性蛋白酶1(SENP1)解离过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的小泛素样修饰蛋白1(sumo1)修饰。方法人脐静脉内皮细胞培养传代后分对照组、高糖组及SENP1组;Western blot法检测SENP1、... 详细信息

目的利用小泛素相关修饰体(sumo)特异性蛋白酶1(SENP1)解离过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的小泛素样修饰蛋白1(sumo1)修饰。方法人脐静脉内皮细胞培养传代后分对照组、高糖组及SENP1组;Western blot法检测SENP1、sumo1、PGC-1α和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平;实时荧光定量PCR检测线粒体转录因子A(TFAM)、核呼吸因子2α(NRF-2α)和雌激素受体相关受体α(ERRα)的mRNA表达;ELISA测定乳酸脱氢酶(LDH);细胞划痕愈合方法、Transwell方法和体外血管模拟形成实验分别检测细胞自愈、迁移和形成血管拟态的能力。结果与对照组比较,高糖组共价sumo1、PGC-1α和活化Caspase-3蛋白表达明显升高,SENP1蛋白表达明显降低,TFAM、NRF-2α和ERRα的mRNA表达明显降低,细胞划痕修复能力及模拟血管形成能力下降(P蛋白表达明显升高,共价sumo1、PGC-1α和活化Caspase-3蛋白表达明显降低,TFAM、NRF-2α和ERRα的mRNA表达明显升高,细胞划痕修复和迁移能力及模拟血管形成能力明显改善(Psumo修饰,解除其对PGC-1α下游转录因子的抑制作用,改善线粒体功能,抑制高糖诱导的血管内皮细胞功能损伤作用。

关键词： sumo1蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 核呼吸因子类 L-乳酸脱氢酶

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