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Genes expression induced by restraint stress in mouse lymphocyte studied by ssh technique

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Acta Pharmacologica Sinica 1999年第5期 84-85页

作者： LI Le-Qun, LI Yi-Fan, HAN Wen-Lin, MA Da-Long, DING Gui-Feng, FAN Shao-Guang ( Department of Physiology, Department of Immunology, Beijing Medical University, Beijing 100083, China)

To research the special expressed genes in lymphocytes induced by restraint stress.A new gene screening technique for differential expression of genes, suppression subtractive hybridization (ssh), was *** mRNA was isolated from lymph node of restraint-stressed mice (Tester) or normal mice (Driver) and reverse transcript into cDNA. Then the cDNA was cut with Rsa 1 into suitable *** the Tester cDNA fragments were linked with a specially designed oligonucleotide *** Tester cDNA and Driver cDNA were combined for hybridization at 68 ℃ for 10 *** the product of hybridization as template, the suppression PCR was performed. Since the primer was designed to selectively anneal to the adapter,

关键词： ssh Genes expression induced by restraint stress in mouse lymphocyte studied by ssh technique cDNA

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ssh可信信道安全属性的形式化验证

北京交通大学学报 2012年第2期36卷 8-15页

作者：常晓林秦英邢彬左向晖北京交通大学计算机与信息技术学院北京100044

可信信道是一个与终端的系统平台状态信息安全绑定的安全信道.现有的关于可信信道的研究工作都没有从理论上对所设计的可信信道的安全属性进行分析.本文首先提出一个基于ssh安全信道协议的可信信道协议,然后利用形式化模型检测器NuSMV... 详细信息

可信信道是一个与终端的系统平台状态信息安全绑定的安全信道.现有的关于可信信道的研究工作都没有从理论上对所设计的可信信道的安全属性进行分析.本文首先提出一个基于ssh安全信道协议的可信信道协议,然后利用形式化模型检测器NuSMV分析该协议的安全属性,最后基于检测器执行轨迹所构成的反例,提出了一个强壮的ssh可信信道协议.本文提出的建模和验证方法具有通用性,可用于分析其他基于安全信道协议的可信信道协议的安全属性.

关键词： ssh TCG远程证明可信信道模型检测 NuSMV

利用ssh文库技术分离鉴定常春藤应答甲醛胁迫相关基因

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植物生理学报 2014年第4期50卷 549-557页

作者：曾智东游览赵艳戚传娇李昆志陈丽梅昆明理工大学生命科学与技术学院生物工程技术研究中心昆明650500

很多研究结果证实常春藤可以有效吸收气体甲醛,本研究结果表明常春藤叶片也可以有效吸收液体甲醛,甲醛吸收量和时间呈指数函数关系。2、4、6 mmol·L^(-1)液体甲醛处理均在常春藤叶片内诱发氧化胁迫,但2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫在常... 详细信息

很多研究结果证实常春藤可以有效吸收气体甲醛,本研究结果表明常春藤叶片也可以有效吸收液体甲醛,甲醛吸收量和时间呈指数函数关系。2、4、6 mmol·L^(-1)液体甲醛处理均在常春藤叶片内诱发氧化胁迫,但2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫在常春藤叶片内诱发的氧化胁迫水平较低。此外,2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫还显著提高了常春藤叶片内可溶性糖和可溶性蛋白的含量,说明常春藤对2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫的抗性较强。通过构建2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫2~48 h常春藤叶片的正向ssh cDNA文库,分离鉴定常春藤叶片中的甲醛胁迫应答基因并对甲醛胁迫应答基因进行功能聚类,结果说明光合作用和代谢相关基因占的比例最大,表达分析结果证实光合作用和代谢相关基因在2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫的不同阶段被诱导上调表达,这些基因的上调表达可能和甲醛在常春藤叶片内的代谢脱毒有关。此外,参与植物对多种生物和非生物胁迫应答的14-3-3蛋白基因(14-3-3p)也受2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫的强烈诱导,该基因的上调表达可能参与甲醛胁迫下常春藤叶片内可溶性蛋白的合成与抗氧化系统活性的调控作用,是常春藤叶片应答甲醛胁迫的重要基因之一。

关键词：常春藤甲醛胁迫应答基因 ssh cDNA文库光合作用相关基因 14-3-3p 基因

西藏青稞品种喜玛拉雅10号干旱胁迫的ssh文库构建及干旱诱导表达基因分析

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麦类作物学报 2012年第4期32卷 640-647页

作者：曾兴权尼玛扎西于静娟唐亚伟韦泽秀其美旺姆达瓦顿珠刘仁建雄奴塔巴扎西罗布高丽云西藏自治区青稞种质改良和牦牛繁育重点实验室西藏拉萨850002 西藏自治区农牧科学院西藏拉萨850002 中国农业大学农业生物技术重点实验室北京100086

为了研究西藏青稞抗旱的分子机制,以西藏耐旱青稞(Hordeum vulgare *** HK.f.)品种喜玛拉雅10号为材料,利用抑制性差减杂交技术(ssh)构建青稞苗期叶片干旱胁迫诱导基因表达的正向差减文库。挑取600个阳性克隆进行PCR验证,并对验证后的... 详细信息

为了研究西藏青稞抗旱的分子机制,以西藏耐旱青稞(Hordeum vulgare *** HK.f.)品种喜玛拉雅10号为材料,利用抑制性差减杂交技术(ssh)构建青稞苗期叶片干旱胁迫诱导基因表达的正向差减文库。挑取600个阳性克隆进行PCR验证,并对验证后的单克隆进行测序分析,共获得420个有效序列。去除冗余序列和嵌合序列后,获得220条高质量EST序列,其中183条singlets,37条contigs。BlastN分析表明,其中189个EST序列可以在GenBank的unigene中找到同源序列,31个未能找到unigene同源序列;BlastX分析表明,62个EST序列unigene与未知功能蛋白或假定蛋白有较高的相似性;158条EST序列与已知功能蛋白有较高的同源性。获得的EST序列多数不仅与植物的非生物胁迫相关,也与植物的生物胁迫反应相关,说明植物在胁迫反应中有明显的共同机制。其中与大麦表达序列高度同源的EST占58%;这些基因涉及参与信号转导和转录调节的基因(11.96%),编码保护、防御和胁迫耐受蛋白的基因(9.78%),跨膜转运相关基因(5.43%),光合作用基因(6.52%),参与结构和功能代谢合成途径中的一些酶(30.43%)等代谢过程。实验结果表明,青稞在干旱复水条件下可诱导一系列特异基因的表达,如参与抗旱反应相关酶和蛋白基因锌指蛋白、衰老相关蛋白、CAS、细胞色素P450、热激蛋白、胁迫诱导蛋白,以及LEA蛋白、脱水蛋白、P5CS等保护蛋白基因。用KOBAS系统将56个EST定位到32个Pathways中,初步分析发现,谷氨酸盐代谢途径(Glutamate metabolism)、精氨酸和脯氨酸代谢途径(Arginine and proline metabolism)、泛素蛋白介导的蛋白质水解代谢(Ubiquitin mediated proteolysis)途径可能与青稞抗旱相关性较大。

关键词：青稞干旱胁迫 ssh EST

Integrated Web Architecture Based on Web3D, Flex and ssh

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Journal of Software Engineering and Applications 2010年第1期3卷 73-80页

作者： Wenjun ZHANG Department of Computer Science & Technology China Women University Research Institute of Applied Computer Technology China Women University

Focusing on the problems occurred in traditional 2D image-word-based web applications, the author put forward con-cept of integrating Web3D, Flex and ssh technologies to create advanced “3D Virtual Reality & RIA” web application architecture, researched mechanisms of their architectures, and implemented their integration and communication & interaction: Flex and Struts2 via XML, Flex and Spring & Hibernate via BlazeDS, Flex and Web3D via JavaScript. The practice has shown that the integrated web architecture based on Web3D, Flex and ssh is effective and valuable.

关键词： Web Architecture Web3D Flex ssh RIA BlazeDS

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ssh法分离早期发育相关基因片段

中国生物工程杂志 2005年第3期25卷 35-39页

作者：郁卫东梁蓉杨丽君郭静竹北京大学人民医院中心实验室北京100044 北京大学人民医院儿科北京100044

目的 :分离和鉴定与小鼠合子基因组激活 (ZGA)以及母源调控向胚胎调控 (MZT)过渡事件相关的基因片段 ,为进一步认识ZGA和MZT发生的分子机制奠定基础。方法 :利用单个植入前胚胎抑制性消减杂交 (SPE ssh)的方法 ,对单个小鼠MⅡ卵母细胞和... 详细信息

目的 :分离和鉴定与小鼠合子基因组激活 (ZGA)以及母源调控向胚胎调控 (MZT)过渡事件相关的基因片段 ,为进一步认识ZGA和MZT发生的分子机制奠定基础。方法 :利用单个植入前胚胎抑制性消减杂交 (SPE ssh)的方法 ,对单个小鼠MⅡ卵母细胞和 2 细胞期胚胎进行双向消减杂交 ;利用cDNAarray对获得的基因片段作进一步的鉴定。结果 :从构建的消减杂交库中随机挑取得 31个克隆 ,经cDNAarray鉴定发现其中有 5个MⅡ期特异表达的基因片段和 9个 2 细胞期特异表达的基因片段 ,Genbank检索发现其中 1 0个片段是首次报道在植入前发育阶段表达。结论 :这些基因片段具有明显的期特异性表达的特点 ,可能在ZGA、MZT和胚胎植入前发育过程中起着重要的作用。

关键词：基因片段消减杂交小鼠相关基因 ssh 植入前胚胎首次细胞期特异表达早期发育

ssh法构建奶牛乳房炎抗性相关基因的cDNA文库

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中国兽医学报 2009年第5期29卷 649-652页

作者：陶金忠张勇张进隆杨永新赵兴绪甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

以经产荷斯坦奶牛的乳腺组织为材料,抽提总的RNA,分离提纯Poly(A)+RNA,反转录并合成单链和双链的cDNA,经酶切形成200～800bp的片段。将患乳房炎奶牛的cDNA分成2组,分别与不同的接头连接,再与正常奶牛的cDNA进行2次消减杂交和2次抑制性的... 详细信息

以经产荷斯坦奶牛的乳腺组织为材料,抽提总的RNA,分离提纯Poly(A)+RNA,反转录并合成单链和双链的cDNA,经酶切形成200～800bp的片段。将患乳房炎奶牛的cDNA分成2组,分别与不同的接头连接,再与正常奶牛的cDNA进行2次消减杂交和2次抑制性的PCR扩增;将第2次PCR产物与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞进行文库扩增,构建了具有高消减效率的奶牛乳房炎抗性相关cDNA文库。文库扩增后得到361个白色阳性克隆,随机挑选克隆进行PCR鉴定,插入片段主要分布在200～800bp。文库的成功构建为进一步筛选、克隆与奶牛乳房炎抗性相关基因奠定了基础,对研究奶牛乳房炎抗性的分子机制以及乳房炎的综合防制具有重要意义。

关键词： ssh 奶牛乳房炎 cDNA文库

山葡萄‘通化-3’抗寒相关基因ssh文库的构建及分析

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果树学报 2015年第4期32卷 546-554页

作者：米宝琴毛娟申鹏陈佰鸿郝燕杨瑞甘肃农业大学园艺学院兰州730070 武威市林业综合服务中心甘肃武威733000 甘肃省农业科学院林果花卉研究所兰州730070

【目的】克隆山葡萄抗寒相关基因和分析葡萄的抗寒机理。【方法】利用抑制性消减杂交技术(ssh),选用抗寒性强的山葡萄株系‘通化-3’和抗寒性弱的欧洲葡萄品种‘红地球’分别作Driver和Tester,建立了Assh(山葡萄)与Sssh(‘红地球’)2个c... 详细信息

【目的】克隆山葡萄抗寒相关基因和分析葡萄的抗寒机理。【方法】利用抑制性消减杂交技术(ssh),选用抗寒性强的山葡萄株系‘通化-3’和抗寒性弱的欧洲葡萄品种‘红地球’分别作Driver和Tester,建立了Assh(山葡萄)与Sssh(‘红地球’)2个c DNA表达文库。【结果】差异表达克隆测序后经DNAMAN比对,从657个克隆中筛选出了70个Unigenes;通过BLAST比对分析,发现在Assh文库中含有与山葡萄相关的r RNA基因内含子编码的归巢核酸内切酶、衰老相关蛋白质、细胞色素P450、抗冻蛋白、防御素样蛋白、热休克蛋白等相关的EST序列;Sssh文库中含有与‘红地球’相关的衰老蛋白。此外还发现了14个未知蛋白的ESTs序列。【结论】筛选出了与山葡萄抗寒性相关的AFPs、Haps、防御素样蛋白、细胞色素P450加单氧酶等多个相关的ESTs,以及14个未知蛋白序列,也可能参与山葡萄的抗寒代谢。

关键词：山葡萄 '红地球’ ssh 抗寒蛋白差异表达

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基于ssh的可信信道建立方法研究

信息网络安全 2018年第1期 45-51页

作者：范博杨润垲黎琳中国电子技术标准化研究院北京100007 北京交通大学计算机与信息技术学院北京100044

现有安全信道技术与TCG远程证明技术集成后,其安全性得到提高。文章提出了一种构建基于ssh的可信信道的方法,称为"可信ssh"。可信ssh从安全的角度出发,不仅实现了平台状态信息与ssh安全信道的真实绑定,而且保护了平台状态信息的隐私。... 详细信息

现有安全信道技术与TCG远程证明技术集成后,其安全性得到提高。文章提出了一种构建基于ssh的可信信道的方法,称为"可信ssh"。可信ssh从安全的角度出发,不仅实现了平台状态信息与ssh安全信道的真实绑定,而且保护了平台状态信息的隐私。从功能角度看,可信ssh具有以下特点:证明灵活性、向后兼容、可扩展性,这些特性体现在ssh中使用的任何会话密钥交换算法都可以在可信ssh中无缝使用。文章提供了可信ssh在openssh的实现及其他功能评估。

关键词： ssh 可信计算远程证明可信信道