检索结果-南通市图书馆

WT1和SPRY2在上皮性卵巢癌中的作用研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

扬州大学学报（农业与生命科学版） 2021年第6期42卷 81-86页

作者：韩云黄梦卉薛莉莉韩煜雯陈霞杨美玲陈晶晶鲁晓燕郑艳莉南通大学第二附属医院/南通市第一人民医院妇产科江苏南通226001

为探讨肾母细胞瘤(WT1)基因和信号通路特异性抑制蛋白(SPRY2)在上皮性卵巢癌(EOC)中的临床意义,通过qRT-PCR和Western blot检测WT1与SPRY2的表达,分析两者与EOC患者临床病理特征及复发的关系;分析两者之间的相关性;通过体外细胞试验初... 详细信息

为探讨肾母细胞瘤(WT1)基因和信号通路特异性抑制蛋白(SPRY2)在上皮性卵巢癌(EOC)中的临床意义,通过qRT-PCR和Western blot检测WT1与SPRY2的表达,分析两者与EOC患者临床病理特征及复发的关系;分析两者之间的相关性;通过体外细胞试验初探两者在EOC细胞侵袭中的作用机制。结果表明:EOC原发灶中WT1呈高表达,SPRY2呈低表达,两者与临床FIGO分期、病理分级及复发率密切相关;与原发灶相比,EOC转移灶中WT1表达水平进一步升高,SPRY2表达水平进一步降低;原发灶和转移灶中WT1与SPRY2的表达均呈负相关;WT1敲减后EOC细胞株SKOV3细胞的侵袭能力减弱,SPRY2表达明显上调,ERK1/2磷酸化明显受到抑制。WT1和SPRY2表达与EOC发生发展密切相关,可作为EOC恶性程度及不良预后的评价指标,WT1可能通过下调SPRY2进而调控ERK1/2信号通路促进EOC细胞的侵袭转移。

关键词：上皮性卵巢癌 WT1 SPRY2 ERK1/2信号通路复发

miR-21通过靶向调节SPRY2在EGF诱导的胰腺癌细胞增殖中的作用及其机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-21通过靶向调节Spry2在EGF诱导的胰腺癌细胞增殖中的作用及其...

作者：赵秋艳上海交通大学

学位级别：硕士

目的:本研究旨在探讨miR-21在EGF诱导的胰腺癌细胞增殖中的作用及其调控机制;检测miR-21和SPRY2在胰腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:利用qRT-PCR检测miR-21在6种胰腺癌细胞和永生化胰腺导管上皮细胞内的表达量。q RT-... 详细信息

目的:本研究旨在探讨miR-21在EGF诱导的胰腺癌细胞增殖中的作用及其调控机制;检测miR-21和SPRY2在胰腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:利用qRT-PCR检测miR-21在6种胰腺癌细胞和永生化胰腺导管上皮细胞内的表达量。q RT-PCR检测miR-21在不同的EGF浓度梯度和时间梯度下的表达量。在EGF刺激下,分别上下调miR-21表达,利用CCK-8和Ed U实验检测细胞的增殖能力,利用流式细胞学技术检测细胞周期、细胞凋亡,应用Western blot技术检测细胞增殖（Ki67,PCNA）、细胞凋亡（Bax,Bcl-2）、细胞周期（Cyclin D1）等相关蛋白的表达以及信号通路相关蛋白的变化。以含有firefly luciferase标记基因的慢病毒载体构建miR-21过表达及敲低的稳转株,构建裸鼠皮下成瘤模型,利用小动物活体成像技术检测各组裸鼠体内瘤体大小。荧光素酶报告基因实验检测miR-21对SPRY2的调控作用,q RT-PCR和Western blot技术分别检测miR-21上下调后SPRY2 m RNA和蛋白的表达。分别上下调SPRY2的表达,利用CCK-8和Ed U实验检测细胞增殖能力,流式细胞学技术检测细胞周期、细胞凋亡。应用Western blot技术检测信号通路相关蛋白的变化。采用ISH、IHC技术检测胰腺癌患者癌和癌旁正常组织miR-21、SPRY2的表达。结果:1、qRT-PCR结果显示miR-21在胰腺癌细胞中的表达显著增高;EGF刺激能增加miR-21的表达量。2、上调PANC-1细胞中miR-21的表达,细胞增殖能力增强,细胞周期由G1期向S期转化,细胞凋亡比例下降,同时,Ki67、PCNA、Cyclin D-1、Bcl-2表达量升高,Bax表达量降低;下调MIA Pa Ca-2细胞中miR-21的表达,细胞生长增殖能力降低,细胞周期G1期捕获,细胞凋亡比例显著增加,Ki67、PCNA、Cyclin D-1、Bcl-2表达量下降,Bax表达量增高。3、miR-21上调,裸鼠皮下移植瘤增长能力增强,miR-21下调后,裸鼠皮下移植瘤增长能力下降。4、miR-21上调,ERK1/2和AKT的磷酸化水平增强,而miR-21敲低后,ERK1/2和AKT的磷酸化水平明显被抑制。5、上调PANC-1细胞中miR-21的表达,SPRY2m RNA和蛋白水平降低,下调MIA Pa Ca-2细胞中miR-21的表达,SPRY2 m RNA和蛋白水平升高;双荧光素酶报告实验表明上调miR-21表达可抑制含SPRY2序列质粒的荧光素酶活性,下调miR-21表达可增强含SPRY2序列质粒的荧光素酶活性,进一步证明了miR-21能够直接与SPRY2 m RNA 3’-UTR（untranslated region）区结合,进而抑制SPRY2表达。6、在MIA Pa Ca-2细胞中上调SPRY2表达,细胞生长增殖能力降低,细胞周期G1期捕获,细胞凋亡比例增加;在PANC-1细胞中下调SPRY2表达,细胞生长增殖能力增强,细胞周期由G1期向S期转化,细胞凋亡比例降低。7、SPRY2上调,ERK1/2和AKT的磷酸化水平明显被抑制;SPRY2下调,ERK1/2和AKT的磷酸化水平增强。8、ISH、IHC实验结果表明,miR-21与SPRY2表达量存在负相关;miR-21表达在胰腺癌组织中均显著高于对应癌旁正常组织,且与肿瘤T分期、N分期和UICC（Union for International Cancer Control）分期呈正相关,高表达miR-21胰腺癌患者总生存期（OS,Overall survival）显著低于低表达miR-21胰腺癌患者;SPRY2表达在胰腺癌组织中均低于对应癌旁正常组织,且与肿瘤分级、T分期、N分期和UICC分期呈负相关,高表达SPRY2胰腺癌患者总生存期明显高于低表达SPRY2胰腺癌患者。结论:EGF促进miR-21的表达量,miR-21通过抑制SPRY2表达,增强EGF下游信号通路MAPK/ERK和PI3K/AKT的活性,进而促进EGF诱导的胰腺癌细胞增殖,促进细胞周期进程,抑制细胞凋亡。这一调控机制不仅为揭示胰腺癌细胞的增殖机制提供新的研究方向,亦可为胰腺癌的诊治和预后提供新的分子靶标,具有重要的理论意义和临床应用价值。

关键词：胰腺癌增殖 EGF miR-21 SPRY2

SPRY2正向调节TNF-α诱导的成纤维细胞瘤L929细胞毒作用

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

免疫学杂志 2014年第7期30卷 569-573页

作者：朱静潆杜芝燕王芳殷小涛田仁礼王启宇武帅张巍新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046 军事医学科学院基础医学研究所转化医学研究室北京100850

目的探索SPRY2分子在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的L929细胞毒作用中的调节作用。方法应用RT-PCR方法观察SPRY2基因在不同质量浓度TNF-α刺激作用下表达水平的变化;应用重组腺病毒介导SPRY2基因过表达方法观察其对TNF-α细胞毒活性的调... 详细信息

目的探索SPRY2分子在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的L929细胞毒作用中的调节作用。方法应用RT-PCR方法观察SPRY2基因在不同质量浓度TNF-α刺激作用下表达水平的变化;应用重组腺病毒介导SPRY2基因过表达方法观察其对TNF-α细胞毒活性的调解效应。结果 L929细胞中存在SPRY2基因的天然表达,并且其表达水平随TNF-α刺激质量浓度的升高而升高,过表达SPRY2基因促进TNF-α诱导的L929细胞死亡。结论 SPRY2分子在TNF-α介导的肿瘤细胞杀伤效应中发挥正向调节作用。

关键词： SPRY2 TNF-α L929细胞细胞毒性

miRNA-27a靶向SPRY2对退变椎间盘血管长入生成作用的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

现代生物医学进展 2020年第21期20卷 4030-4036页

作者：黄启帆白杰何坤王贤李浩唐上德广州中医药大学第二临床医学院广东广州510006 广东省中医院珠海医院广东珠海519000

目的:探讨miRNA-27a靶向调控Sprouty同源物2(Sprouty Homolog 2, SPRY2)对人髓核细胞系(nucleus pulposus cells,NPCs)诱导人微血管内皮细胞(Human microvascular vascular endothelial cells, HMEC-1)血管生成作用的影响。方法:收集脊柱侧弯和椎间盘退变(Intervertebral disc degeneration, IDD)患者的椎间盘组织分别作为对照组和IDD组,通过miRNA芯片筛选差异表达的miRNA。RT-qPCR和荧光原位杂交实验验证组织中miR-27a的表达水平。慢病毒转染细胞,细胞分为Control组(未转染);NC组(转染慢病毒空载);sh-miR-27a组(转染miR-27a抑制慢病毒);miR-27a组(转染miR-27a过表达慢病毒);SPRY2组(转染SPRY2过表达慢病毒)及miR-27a+SPRY2组(转染miR-27a和SPRY2过表达慢病毒)。RT-qPCR检测髓核细胞中miR-27a和SPRY2的表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-27a和SPRY2的靶向关系。将经过不同处理的髓核细胞条件培养基与完全培养基混合培养HMEC-1细胞,Transwell和管腔形成实验检测HMEC-1细胞的侵袭和血管生成能力。免疫荧光和ELISA检测髓核细胞和混合培养基中转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1, TGF-β1)含量。结果:与对照组椎间盘组织相比,IDD组miR-27a表达明显增加。与NC组相比,SPRY2在sh-miR-27a组中表达升高(P27a组中表达降低(P27a组HMEC-1细胞侵袭和血管生成能力增强(PSPRY2组HMEC-1细胞侵袭数减少(P27a组相比,miR-27a+SPRY2组HMEC-1细胞侵袭和血管生成能力下降(P27a通过靶向抑制SPRY2的表达促进髓核细胞诱导HMEC-1细胞成血管能力。

关键词： microRNA-27a SPRY2 椎间盘退变侵袭血管形成

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

SPRY2对类风湿性关节炎的生物抑制作用

SPRY2对类风湿性关节炎的生物抑制作用

作者：朱静潆新疆大学

学位级别：硕士

研究背景：类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一种发病机制比较复杂的慢性自身免疫病，其主要病理特征是成纤维样滑膜细胞（fibroblast-likesynoviocytes，FLS）过度增殖、炎性细胞侵润等，增生的滑膜组织形成血管翳侵蚀关... 详细信息

研究背景：类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一种发病机制比较复杂的慢性自身免疫病，其主要病理特征是成纤维样滑膜细胞（fibroblast-likesynoviocytes，FLS）过度增殖、炎性细胞侵润等，增生的滑膜组织形成血管翳侵蚀关节软骨和骨，造成关节破坏甚至功能丧失等。FLS作为RA病理改变的最终靶细胞，在RA发展过程中发挥着重要作用。FLS具有类似肿瘤细胞样疯狂增长的特性，以FLS为主的滑膜组织的生长特性也类似于局部侵袭生长的肿瘤，因此提示阻断滑膜细胞增殖的途径可能用于治疗RA。 Sprouty（SPRY2）是一种能够反馈抑制RTK信号通路的重要生物分子，在多种肿瘤细胞中表达下调，而过表达SPRY2分子可抑制肿瘤细胞的增殖与侵袭。SPRY2通过下调RAS/细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated proteinkinases,ERK）和磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（AKT）激活信号而抑制肿瘤的增殖和发展。而这两条通路恰好是FLS增殖及产生炎性反应的主要通路，因此提示该分子很可能通过影响FLS增殖从而抑制RA的发展。研究目的：探讨SPRY2分子对类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞异常增殖的影响，并在大鼠RA模型中验证SPRY2对类风湿性关节炎的抑制作用。方法：1.SPRY2基因的克隆和活性鉴定：通过PCR的方法扩增人SPRY2（hSPRY2）基因，并将其克隆到pDC315载体中，构建重组质粒pDC315/hSPRY2。将pDC315/hSPRY2转染至293T细胞，CCK-8细胞增殖实验检测293T细胞增殖和存活情况。 2.重组腺病毒AdSPRY2的包装、鉴定和活性检测：pDC315/hSPRY2与5型腺病毒骨架质粒共转染HEK293细胞，包装重组腺病毒AdSPRY2;应用RT-PCR方法，观察SPRY2基因在不同浓度TNF-α刺激作用下表达水平的变化;AdSPRY2感染L929细胞后， CCK-8细胞增殖法检测SPRY2对TNF-α介导的L929细胞杀伤活性的调节作用。 3.SPRY2体外抑制RA FLS的增殖和炎性反应：观察在TNF-α炎刺激作用下，FLS细胞中SPRY2基因表达水平的变化;再用AdSPRY2感染FLS细胞，利用Brdu细胞增殖实验检测SPRY2对TNF-α介导的FLS细胞增殖的调节作用。 4.重组腺病毒Ad5-hSPRY2对佐剂诱导大鼠关节炎的影响：向RA大鼠关节腔内注射5型重组病毒AdSPRY2;每隔3天观测大鼠的踝关节厚度、关节指数评分和大鼠体重，统计临床指标;在观察终点时间处死大鼠，取其踝关节进行组织切片H＆E染色，并利用ELISA方法检测促炎性细胞因子TNF-促和IL-1促的分泌情况。结果：1.成功构建重组质粒pDC315/hSPRY2：通过双酶切及测序鉴定成功构建了pDC315/hSPRY2重组质粒， RT-PCR和Western blot检测证实了pDC315/hSPRY2转染HEK293T细胞后，可以表达SPRY2基因和SPRY2蛋白;CCK-8细胞增殖实验证实SPRY2分子可促进HEK293T细胞的增殖和存活。 2.成功包装5型重组腺病毒AdSPRY2，并证明其具活性：病毒基因组PCR及测序结果证实成功构建5型重组腺病毒AdSPRY2;RT-PCR和Western blot结果表明L929细胞中存在SPRY2基因天然表达，并发现SPRY2表达水平与TNF-与刺激浓度成正相关;通过CCK-8实验证实SPRY2分子可增强L929细胞对TNF9杀伤作用的敏感性。 3.过表达SPRY2能抑制RA FLS的异常增殖：RT-PCR和Western blot发现人FLS细胞中存在SPRY2分子的天然表达，在FLS中SPRY2基因表达水平随TNF-α刺激浓度升高而降低;Ad5-hSPRY2感染FLS细胞后，通过Brdu细胞增殖实验，结果显示，与对照组相比，实验组显著地抑制人FLS的异常增殖（p＜0.05）。 4.重组腺病毒AdSPRY2能有效抑制大鼠佐剂诱导关节炎：临床指标统计结果显示，与对照组相比，治疗组的大鼠的踝关节厚度和关节指数评分明显降低（p＜0.05），病情得到明显抑制;组织切片H＆E结果表明，治疗组关节腔的侵润显著少于对照组;ELISA检测结果显示，与对照组相比，治疗组的IL-1平表达水平显著低于对照组，p＜0.05，具有统计学意义。结论：过表达SPRY2分子在体外可明显抑制人FLS的异常增殖;在大鼠体内动物实验中，SPRY2分子能够有效抑制大鼠类风湿性关节炎的发展。

关键词：类风湿性关节炎重组腺病毒 SPRY2 成纤维样滑膜细胞

微小核糖核酸-21调控SPRY2影响Jurkat细胞炎症反应的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

实用医学杂志 2013年第9期29卷 1400-1402页

作者：杨栋文伟明苏强刘洋周游王江友广西医科大学第一附属医院心血管内科南宁市530021

目的:探讨微小核糖核酸(miRNA)-21通过调控SPRY2进而对Jurkat细胞炎症反应的影响。方法:将人T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞分为miRNA-21模拟物组、miRNA-21模拟物阴性对照组、miRNA-21抑制物组和miRNA-21抑制物组阴性对照组,每组例数为8,... 详细信息

目的:探讨微小核糖核酸(miRNA)-21通过调控SPRY2进而对Jurkat细胞炎症反应的影响。方法:将人T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞分为miRNA-21模拟物组、miRNA-21模拟物阴性对照组、miRNA-21抑制物组和miRNA-21抑制物组阴性对照组,每组例数为8,进行细胞转染,使用荧光定量PCR检测各组细胞的miRNA-21和SPRY2 mRNA的表达水平,采用蛋白免疫印迹技术检测各组SPRY2蛋白表达情况,同时用酶联免疫法检测细胞上清液IL-10、IL-2和TNF-α的分泌水平。结果:与其阴性对照组比较,模拟物组miRNA-21的相对表达量和IL-10的分泌水平明显增加(PSPRY2 mRNA的相对表达量和SPRY2的相对蛋白含量显著减少(P21的相对表达量和细胞上清液IL-10的分泌水平明显减少(PSPRY2 mRNA相对表达量和SPRY2的相对蛋白含量显著增加(P2的分泌水平均无明显变化(P>0.05)。结论:在Jurkat细胞中,miRNA-21可能通过抑制其靶基因SPRY2的表达而促进抗炎细胞因子IL-10的分泌,表明miRNA-21可能通过影响IL-10的分泌而作为血管的一种保护因子。

关键词：微RNAs 微小核糖核酸-21 SPRY2 炎症反应

lncRNA SCGB1B2P通过调控SPRY2基因表达对肾癌细胞增殖和侵袭的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

医学研究杂志 2020年第7期49卷 87-90,95页

作者：鲁帅奇李小辉郝彤彤韩兴涛张寒郑州大学附属洛阳中心医院泌尿外科 471009

目的探讨长链非编码(long non-coding RNA,lncRNA)SCGB1B2P在肾癌中的表达及影响肾癌细胞增殖和侵袭能力的作用机制。方法采用荧光实时定量PCR(qPCR)检测82例肾癌组织和肾癌细胞株中SCGB1B2P的表达水平。以SCGB1B2P表达水平最低的OS-RC-... 详细信息

目的探讨长链非编码(long non-coding RNA,lncRNA)SCGB1B2P在肾癌中的表达及影响肾癌细胞增殖和侵袭能力的作用机制。方法采用荧光实时定量PCR(qPCR)检测82例肾癌组织和肾癌细胞株中SCGB1B2P的表达水平。以SCGB1B2P表达水平最低的OS-RC-2细胞为转染对象,采用脂质体转染表达SCGB1B2P的质粒(实验组)或表达无意义序列的质粒(对照组)。采用qPCR检测各组细胞SCGB1B2P的表达水平。MTT法和Matrigel侵袭实验检测肾癌细胞的增殖能力和侵袭能力。qPCR和Western blot法分别检测SPRY2(sprouty RTK signaling antagonist 2)基因表达。结果肾癌组织中SCGB1B2P的表达水平低于癌旁组织(P2P的表达水平低于正常肾小管上皮细胞(P2细胞中SCGB1B2P的表达水平明显高于对照组(P2P可显著抑制肾癌细胞的增殖能力和侵袭能力(P2P可显著促进肾癌OS-RC-2细胞中SPRY2基因的表达(P2P在肾癌中表达明显降低,上调SCGB1B2P可显著抑制肾癌OS-RC-2细胞的增殖和侵袭能力,其可能的作用机制是SCGB1B2P可促进SPRY2基因表达。

关键词：长链非编码RNA SPRY2 肾癌细胞增殖肿瘤浸润

微小核糖核酸-21抑制SPRY2影响jurkat细胞IL-10表达的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微小核糖核酸-21抑制spry2影响jurkat细胞IL-10表达的研究

作者：杨栋广西医科大学

学位级别：硕士

[目的]通过研究微小核糖核酸(miRNA)-21调控SPRY2对surkat细胞IL-10、IL-2和TNF-α表达的影响,从而探讨miRNA-21在炎症反应中的作用机制。【方法]将人T淋巴细胞系jurkat E6-1细胞分为人工合成的miRNA-21模拟物(Mimics)组和miRNA-21模... 详细信息

[目的]通过研究微小核糖核酸(miRNA)-21调控SPRY2对surkat细胞IL-10、IL-2和TNF-α表达的影响,从而探讨miRNA-21在炎症反应中的作用机制。【方法]将人T淋巴细胞系jurkat E6-1细胞分为人工合成的miRNA-21模拟物(Mimics)组和miRNA-21模拟物阴性对照(Mimics NC)组、miRNA-21抑制物(inhibitors)组和miRNA-21抑制物组阴性对照(inhibitors NC)组,使用无血清的RPMI1640把jurkat细胞的浓度调整为2×106/m1,各组转染物的终浓度为75nM,每组重复8次,对培养的jurkat细胞使用脂质体2000试剂进行细胞转染48小时后,离心收集各组jurkat细胞的上清液,并用PBS洗涤jurkat细胞后提取细胞总RNA和蛋白,使用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测各组细胞的miRNA-21和SPRY2mRNA的表达水平,采用蛋白免疫印迹技术(Western Blotting)检测各组SPRY2蛋白表达,同时用酶联免疫法(ELISA)检测细胞上清液白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素2(IL-2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌水平,并对IL-10的分泌与miRNA-21和SPRY2的表达进行直线相关性分析。 [结果]jurkat细胞转染48h后,与其阴性对照组比较,Mimics组miRNA-21的相对表达量和细胞上清液IL-10的分泌水平显著增加(PSPRY2mRNA的相对表达量和SPRY2的相对蛋白含量显著减少(P2的分泌水平无显著变化(P>0.05);与其阴性对照组比较,抑制物组miRNA-21的相对表达量和细胞上清液IL-10的分泌水平显著减少(PSPRY2mRNA相对表达量和SPRY2的相对蛋白含量显著增加(P2的分泌水平无显著变化(P>0.05) IL-10的分泌水平与miRNA-21的表达量呈显著正相关(r=0.816,PSPRY2蛋白的相对表达量呈显著负相关,(r=-0.762,P21可能通过抑制其靶基因SPRY2的表达而促进抗炎性细胞因子IL-10的分泌,因此表明miRNA-21可能通过促进IL-10的表达而发挥潜在的保护作用。

关键词：微小核糖核酸-21 SPRY2 jurkat细胞 IL-10

miRNA-27a靶向SPRY2调控Wnt/β-catenin信号通路对人卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

癌症进展 2018年第3期16卷 282-285页

作者：刘卫民柳学芳龚文端潜江市中心医院妇产科湖北潜江4331000

目的探讨mi RNA-27a靶向SPRY2调控Wnt/β-catenin信号通路对人卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法采用荧光定量RT-PCR和Western blot法检测卵巢癌组织、癌旁正常上皮结缔组织和HO-8910细胞、正常卵巢上皮细胞的mi RNA-27a和SPRY2表... 详细信息

目的探讨mi RNA-27a靶向SPRY2调控Wnt/β-catenin信号通路对人卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法采用荧光定量RT-PCR和Western blot法检测卵巢癌组织、癌旁正常上皮结缔组织和HO-8910细胞、正常卵巢上皮细胞的mi RNA-27a和SPRY2表达水平;MTT法检测转染细胞的增殖情况;Transwell实验检测细胞侵袭情况;荧光素酶分析验证mi RNA-27a对SPRY2的靶向调控能力;免疫荧光染色检测mi RNA-27a与SPRY2对Wnt/β-catenin信号通路的调控能力。结果卵巢癌组织、HO-8910细胞中mi RNA-27a的表达水平分别高于癌旁正常上皮结缔组织、卵巢正常上皮细胞(P﹤0.05),而SPRY2的m RNA和蛋白表达水平均低于癌旁正常组织及卵巢正常上皮细胞(P﹤0.05)。与B组相比,C组和E组HO-8910细胞增殖及侵袭能力均下调(P﹤0.05)。F组的荧光素酶活性明显高于G组(P﹤0.01)。C组的HO-8910细胞中,β-catenin表达上升,且进入细胞核。结论 mi RNA-27a通过靶向抑制SPRY2激活Wnt/β-catenin信号通路,从而促进人卵巢癌细胞的增殖和侵袭能力。

关键词： miRNA-27a SPRY2 卵巢癌 Wnt/β-catenin 增殖侵袭 HO-8910