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现代肿瘤医学 2023年第10期31卷 1780-1784页

作者：阳亮芳朱志文郑杨黄海丽何惠娟广东医科大学附属医院肝胆外科广东湛江524001

目的:探讨spon1对胆管癌细胞迁移、侵袭能力和上皮间质转化的影响。方法:通过生物信息学和免疫组织化学分析spon1的表达。将spon1过表达质粒、spon1敲低质粒和阴性对照质粒转入胆管癌细胞系(QBC939、HCCC-9810),通过划痕实验和Transwel... 详细信息

目的:探讨spon1对胆管癌细胞迁移、侵袭能力和上皮间质转化的影响。方法:通过生物信息学和免疫组织化学分析spon1的表达。将spon1过表达质粒、spon1敲低质粒和阴性对照质粒转入胆管癌细胞系(QBC939、HCCC-9810),通过划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;免疫印迹检测spon1对胆管癌细胞中上皮间质转化相关蛋白表达的影响。结果:生信分析结果和免疫组化结果均提示spon1在胆管癌组织中高表达(Pspon1能够有效增强胆管癌细胞的迁移和侵袭能力(Pspon1则抑制了胆管癌细胞的迁移和侵袭能力(Pspon1通过上调Vimentin、下调E-cadherin促进胆管癌细胞上皮间质转化(Pspon1在胆管癌中被上调,并促进胆管癌细胞迁移、侵袭和上皮间质转化。

关键词： spon1 胆管癌癌基因上皮间质转化

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spon1在锰致神经炎症中的作用及其机制

SPON1在锰致神经炎症中的作用及其机制

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作者：张洁广西医科大学

学位级别：硕士

背景和目的探索不同浓度锰暴露对神经组织和细胞中spon1及其炎症通路蛋白的影响,并进一步研究spon1诱导炎症通路在锰致神经炎症中的作用。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠32只随机分为对照组、25、50和100mg/kg组,每天灌胃染锰,持续3个月。通... 详细信息

背景和目的探索不同浓度锰暴露对神经组织和细胞中spon1及其炎症通路蛋白的影响,并进一步研究spon1诱导炎症通路在锰致神经炎症中的作用。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠32只随机分为对照组、25、50和100mg/kg组,每天灌胃染锰,持续3个月。通过Western blot和ELISA等实验技术检测亚慢性染锰小鼠皮层和海马中spon1、ERK1/2/NF-κB通路蛋白的表达水平,以及海马和血浆中炎症因子的表达水平。通过MTT、SRB、LDH检测不同浓度锰暴露对BV2和N2a细胞毒性的影响,根据三个实验结果选定0、25、50、100μM Mn为BV2细胞锰染毒浓度,0、100、200、400μM Mn为N2a细胞锰染毒浓度。小鼠神经元染锰浓度参考相关文献选定0、100、200、400μM Mn。Western blot和ELISA检测不同浓度锰暴露后体外小鼠原代神经元、BV2和N2a细胞中spon1、ERK1/2/NF-κB通路相关蛋白及炎症因子的表达情况。根据以上实验结果构建spon1慢病毒基因过表达和基因敲降稳转BV2细胞,染锰组浓度选定最高浓度100μM Mn。q RT-PCR检测锰暴露后spon1过表达或敲降的BV2细胞中spon1 m RNA水平。Western blot和ELISA检测spon1过表达或敲降的BV2细胞锰染毒24小时后spon1、ERK1/2/NF-κB通路相关蛋白及炎症因子的表达情况。数据处理使用SPSS 25.0软件,文中图表分析数据多以“平均值±标准差”的形式表示。当多组之间的实验数据方差相等时,使用单向方差分析,两组之间的比较采用最小有效差方法(LSD)。方差不齐时采用秩和检验,若总体分布不全相同,再进行组间两两比较(Kruskal-Wallis),以上检验水准为α=0.05。结果1.动物试验结果显示:在小鼠海马中,不同染锰组spon1蛋白水平及炎症因子表达水平无变化;在小鼠皮层中,当染锰浓度高于50 mg/kg时,spon1蛋白水平下降(P1/2蛋白表达水平增加(Pspon1蛋白水平无变化。在小鼠原代皮层神经元中,当染锰浓度高于200μM时,spon1蛋白水平下降(P150μM的Bv2细胞存活率下降(P1);与对照组相比,染锰浓度高于300μM的N2a细胞存活率下降(P1)。SRB结果显示:与对照组相比,染锰浓度高于150μM的Bv2细胞存活率下降(P100μM的Bv2细胞LDH含量增加(P1)。3.锰暴露后BV2细胞和N2a细胞中spon1蛋白的表达水平降低。在BV2细胞中,当染锰浓度大于等于50μM时,spon1蛋白表达水平降低(P100μM时,spon1蛋白表达水平降低(P1)。4.锰暴露会增加BV2细胞和N2a细胞中ERK1/2、p-ERK1/2、p-NF-κB(p65)蛋白的水平。在BV2细胞中,NF-κB(p65)蛋白水平的变化无统计学意义,当染锰浓度大于等于50μM时,ERK1/2蛋白和p-NF-κB(p65)蛋白表达水平增加(P1/2蛋白水平增加(P1/2蛋白水平增加(P100μM时,p-NF-κB(p65)蛋白和p-ERK1/2蛋白水平增加(P100μM锰暴露增加了细胞中ROS水平(P100μM Mn组的IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白水平增加(P1)。***-PCR结果显示:与spon1 shRNA空载组相比,spon1 shRNA1BV2细胞、spon1 shRNA2 BV2细胞和spon1 shRNA3 BV2细胞组spon1m RNA水平分别下降(Pspon1

关键词：锰 spon1 神经炎症炎症因子

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spon1表达对骨肉瘤细胞侵袭、转移能力的影响

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肿瘤学杂志 2019年第10期25卷 882-886页

作者：陈勇姜泳大连市第二人民医院

[目的]探讨spon1表达对骨肉瘤细胞侵袭、转移能力的影响。[方法]骨肉瘤细胞株KHOS分为对照组、空白转染组和si-spon1组,其中空白转染组转染siRNA,si-spon1组转染siRNA-spon1,采用MTT法检测各组细胞增殖,采用Tranwell细胞侵袭和细胞划痕... 详细信息

[目的]探讨spon1表达对骨肉瘤细胞侵袭、转移能力的影响。[方法]骨肉瘤细胞株KHOS分为对照组、空白转染组和si-spon1组,其中空白转染组转染siRNA,si-spon1组转染siRNA-spon1,采用MTT法检测各组细胞增殖,采用Tranwell细胞侵袭和细胞划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力,Western blot检测spon1蛋白以及FAK/Src信号通路蛋白表达。[结果] si-spon1组spon1蛋白相对表达量为0.212±0.087,明显低于对照组和空白转染组(Pspon1组转染12h、24h、48h和72h吸光度A值比较差异无统计学意义(P>0.05);si-spon1组细胞迁移率和侵袭细胞数分别为14.08%±3.11%和75.64±24.20个,明显低于对照组和空白转染组(Pspon1组p-FAK和p-Src相对表达量分别为0.354±0.100和0.310±0.101,均低于对照组和空白转染组(Pspon1组FAK和Src蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]抑制spon1蛋白表达,可降低骨肉瘤KHOS细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与FAK/Src信号通路有关。

关键词： spon1 骨肉瘤迁移侵袭

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Early dynamic transcriptomic changes during preoperative radiotherapy in patients with rectal cancer: A feasibility study

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World Journal of Gastroenterology 2013年第21期19卷 3249-3254页

作者： Stephane Supiot Wilfried Gouraud Loc Campion Pascal Jezéquel Bruno Buecher Josiane Charrier Marie-Francoise Heymann Marc-Andre Mahé Emmanuel Rio Michel Chérel Department of Radiation Oncology Institut de Cancérologie de l'Ouest René Gauducheau44800 Nantes-St-HerblainFrance INSERM U892 Centre de Recherche en Cancérologie Nantes-AngersUniversity of Nantes44000 NantesFrance Centre Hospitalier Universitaire 44000 NantesFrance Department of Nuclear Medicine Institut de Cancérologie de l'Ouest René Gauducheau44800 Nantes-Saint HerblainFrance

AIM: To develop novel biomarkers of rectal radiotherapy, we measured gene expression profiles on biopsies taken before and during preoperative radiotherapy. METHODS: Six patients presenting with a locally advanced rectal cancer (T>T2, N0/Nx, M0) eligible for preoperative radiotherapy (45 Gy in 25 fractions) were selected in a pilot study. Six tumor and 3 normal tissues biopsies were taken before and during radiotherapy,after a dose of 7.2 Gy at a median time of 1 h following irradiation (0:27-2:12). Tumor or normal tissue purity was assessed by a pathologist prior to RNA extraction. Mean RNA content was 23 μg/biopsy (14-37) before radiotherapy and 22.7 μg/biopsy (12-35) during radiotherapy. After RNA amplification, biopsies were analysed with 54K HG-U133A Plus 2.0 Affymetrix expression micro-arrays. Data were normalized according to MAS5 algorithm. A gene expression ratio was calculated as: (gene expression during radiotherapy-gene expression before radiotherapy)/gene expression before radiotherapy. Were selected genes that showed a ratio higher than ± 0.5 in all 6 patients. RESULTS: Microarray analysis showed that preoperative radiotherapy significantly up-regulated 31 genes and down-regulated 6 genes. According to the Gene Ontology project classification, these genes are involved in protein metabolism (ADAMDEC1 ; AKAP7 ; CAPN5 ; CLIC5 ; CPE ; CREB3L1 ; NEDD4L ; RAB27A), ion transport (AKAP7 ; ATP2A3 ; CCL28 ; CLIC5 ; F2RL2 ; NEDD4L ; SLC6A8), transcription (AKAP7 ; CREB3L1 ; ISX ; PAB-PC1L ; TXNIP), signal transduction (CAPN5 ; F2RL2 ; RA- B27A ; TNFRSF11A), cell adhesion (ADAMDEC1 ; PXDN ; spon1 ; S100A2), immune response (CCL28 ; PXDN ; TNFRSF11A) and apoptosis (ITM2C ; PDCD4 ; PVT1). Up-regulation of 3 genes (CCL28 ; CLIC5 ; PDCD4) was detected by 2 different probes and up-regulation of 2 genes (RAB27A ; TXNIP) by 3 probes. CONCLUSION: Micro-arrays can efficiently assess early transcriptomic changes during preoperative radiotherapy for rectal cancer, and may he

关键词： CCL28 CLIC5 PDCD4 RAB27A TXNIP Protein metabolism Cell adhesion Cell migration spon1 Carboxypeptidase E

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