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splunc1基因在人体组织中的表达分布特征

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南方医科大学学报 2016年第5期36卷 617-621页

作者：王爽李文路吕丽春姚开泰南方医科大学基础医学院病理学系广东广州510515 中国人民解放军458医院病理科广东广州510602 南方医科大学基础医学院肿瘤研究所广东广州510515

目的探讨人splunc1基因在人体组织中的表达分布特征。方法采用原位杂交方法检测人体37种组织中splunc1基因的细胞学定位。结果原位杂交结果显示:splunc1在上腭、表皮、食管及食管-贲门部的鳞状上皮,鼻咽部、气管、宫颈部化生的鳞状上皮... 详细信息

目的探讨人splunc1基因在人体组织中的表达分布特征。方法采用原位杂交方法检测人体37种组织中splunc1基因的细胞学定位。结果原位杂交结果显示:splunc1在上腭、表皮、食管及食管-贲门部的鳞状上皮,鼻咽部、气管、宫颈部化生的鳞状上皮及食管和肺的鳞状细胞癌中均不表达;在胃粘膜、胆囊、空肠、结肠、子宫内膜及腺体和宫颈部的单层柱状上皮细胞中也不表达;主要表达在鼻咽、气管和支气管的假复层纤毛柱状上皮中,且沿呼吸道从上至下,该基因表达逐渐减弱,在肺组织中检测不到其表达。在腮腺、下颌下腺的导管和浆液腺细胞、鼻咽和肺等部位的粘膜下浆液腺细胞、胃粘膜固有层壁细胞及乳腺小叶和导管上皮中表达splunc1,但粘液性腺上皮细胞中不表达。此外,在肺、胃、结肠、乳腺、子宫内膜和宫颈等部位的腺癌组织中,splunc1基因均呈强阳性表达。结论 splunc1基因的表达具有明显的细胞特异性,其表达分布特征可能与细胞功能有关。

关键词： splunc1 原位杂交鳞状上皮柱状上皮浆液性腺体

新的天然免疫保护分子splunc1的结构与功能研究进展

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生物化学与生物物理进展 2012年第10期39卷 945-951页

作者：郭小芳陈攀李夏雨李小玲李桂源中南大学肿瘤研究所长沙410078

腭、肺及鼻咽上皮克隆(palate,lung,and nasal epithelium clone,PLUNC)家族为一新近发现的具有宿主防御功能的蛋白质家族,它们大多存在于呼吸道上皮与消化道上皮的表面,在上皮组织与外界各种信号之间起着信号传递中介与信号执行分子的... 详细信息

腭、肺及鼻咽上皮克隆(palate,lung,and nasal epithelium clone,PLUNC)家族为一新近发现的具有宿主防御功能的蛋白质家族,它们大多存在于呼吸道上皮与消化道上皮的表面,在上皮组织与外界各种信号之间起着信号传递中介与信号执行分子的作用.在迄今为止发现的人类10个PLUNC家族成员中,我们所克隆的NASG基因即为这一免疫保护分子家族的成员,对其结构与功能分析表明,它属于splunc1(short palate,lung,and nasal epithelium clone 1)的全新转录本,具有杀菌/渗透增强蛋白质结构域,能对外来物理及化学刺激做出反应,并具有抗微生物、清除有害化学物质、抗肿瘤等多重功效.splunc1作为上呼吸道的一种新的天然免疫保护分子,在维持上呼吸道的正常生理活动以及抗炎杀菌抑瘤中起着重要作用.

关键词： splunc1 上呼吸道天然免疫保护分子

分泌性蛋白splunc1对上呼吸道绿脓杆菌的抑制作用

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中南大学学报（医学版） 2006年第4期31卷 464-469页

作者：周后德武明花石磊周鸣杨一新赵瑾邓坦李小玲沈守荣李桂源中南大学肿瘤研究所长沙410078

目的:构建哺乳动物细胞表达的splunc1重组蛋白,通过体外实验验证其杀菌/抑菌功能,并进一步研究其机制是否与splunc1蛋白结合细菌脂多糖有关,从而为其将来临床应用奠定基础。方法:将splunc1克隆入pCMV-tag4A哺乳动物表达载体,稳定转染鼻... 详细信息

目的:构建哺乳动物细胞表达的splunc1重组蛋白,通过体外实验验证其杀菌/抑菌功能,并进一步研究其机制是否与splunc1蛋白结合细菌脂多糖有关,从而为其将来临床应用奠定基础。方法:将splunc1克隆入pCMV-tag4A哺乳动物表达载体,稳定转染鼻咽癌HNE1细胞株;收集细胞培养上清液,用其处理从患者上呼吸道分离的绿脓杆菌,比较转染splunc1基因的细胞培养上清与转染空白载体的细胞培养上清对细菌克隆形成率的影响。同时将脂多糖包被96孔板,与splunc1蛋白共同孵育,ELISA法检测splunc1是否与细菌脂多糖结合;利用FITC标记的脂多糖干预转染splunc1基因及空白载体的细胞,观察细胞内脂多糖与splunc1的结合作用。结果:转染splunc1基因的细胞培养上清能显著抑制绿脓杆菌在LB软琼脂板上形成集落;体外试验表明,splunc1能与细菌脂多糖结合,但结合效率低;HNE1细胞经转染splunc1后,细菌脂多糖摄取明显增加。结论:重组splunc1蛋白能经转染细胞分泌到培养上清液中,具有结合细菌脂多糖,杀灭或抑制上呼吸道绿脓杆菌的功能,从而可能具有重要的临床应用价值。

关键词： splunc1 绿脓杆菌脂多糖杀菌/抑菌固有免疫

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splunc1多肽抗体的设计、制备与鉴定

中国生物化学与分子生物学报 2006年第6期22卷 513-518页

作者：周后德赵瑾张晋欧阳珏周鸣彭淑平李小玲李桂源中南大学肿瘤研究所长沙410078

通过设计splunc1蛋白的一段多肽,快速制备抗splunc1的多肽抗体,检测多肽抗体的性能,为splunc1的功能研究提供可靠的平台.用DS Gene1.1软件分析splunc1蛋白的跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性以及抗原性等,综合考虑抗体设计的其它因... 详细信息

通过设计splunc1蛋白的一段多肽,快速制备抗splunc1的多肽抗体,检测多肽抗体的性能,为splunc1的功能研究提供可靠的平台.用DS Gene1.1软件分析splunc1蛋白的跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性以及抗原性等,综合考虑抗体设计的其它因素,设计出两段15～20个氨基酸的多肽.将合成后的多肽与钥孔戚血蓝素（keyhole limpet hemocyanin,KLH）偶联,同时初筛出宿主血清与splunc1无交叉反应的新西兰家兔,用与KLH相连的splunc1多肽免疫家兔,2个月后获取血清,亲和纯化出抗splunc1多肽抗体,通过ELISA法检测其效价,免疫印迹与免疫组化检测其特异性与适用范围.通过该方法得到了高效价与高特异性的splunc1多克隆特异性抗体,ELISA法测定其效价可达到1：105,通过对包含有PLUNC家族不同成员的蛋白混合物进行Western印迹检测证明,该多肽抗体具有较高的特异性,不与同一家族中的其它蛋白发生交叉反应,而且该抗体可用于免疫组化,说明所制备的分泌性蛋白splunc1抗体具有高特异、高效价等特点,将为splunc1基因的功能研究提供有用的研究材料.

关键词： splunc1 多肽抗体特异性

splunc1 reduces the inflammatory induced by influenza in vitro and vivo

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：周丽娟崔家骏郭瑞霞史云胡晓丰刘雪林宋宏彬张传福军事医学科学院疫病预防控制所淮北师范大学宜春学院山西医科大学

Objective: To study the function of splunc1 in vivo and in vitro after influenza infection and to examine the underlying mechanisms.Methods: We detected mRNA of splunc1, cytokines and viral load by Real time qPCR in influenza infected A549 cells;splunc1 protein of mouse lung tissue was detected by immunofluorescence and Western blot.Results: splunc1 mRNA level decreased significantly in wild A549 cells after influenza infection. compared with wild-type cells,lower levels of pro-inflammatory cytokines IL-4,TNF-α, IL-6, IL-1βbut higher levels of anti-inflammatory cytokine IL-2 were observed in RNA overexpressed group. However we found completely opposite results in RNAi group;immunofluorescence and Western blot results showed that after influenza infection, protein of splunc1 in mouse lung tissue decreased gradually.Conclusions: splunc1 effectively reduce the inflammation mediated by influenza, thus could be a potential target for the effective treatment of influenza infection.

关键词： splunc1 influenza inflammation

来源： cnki会议评论

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splunc1在呼吸道疾病中的研究进展

国际呼吸杂志 2009年第21期29卷 1329-1332页

作者：薛君力张洪涛北京市结核病胸部肿瘤研究所中心实验室 101149

短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1（Short Palate Lung and Nasal epithelium Clonel，splunc1）是最近发现的黏膜分泌蛋白上腭、肺及鼻咽上皮克隆基因（Palate Lung and Nasal epithelium Clone，PLUNC）家族的一员，特异表达于呼吸道，是... 详细信息

短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1（Short Palate Lung and Nasal epithelium Clonel，splunc1）是最近发现的黏膜分泌蛋白上腭、肺及鼻咽上皮克隆基因（Palate Lung and Nasal epithelium Clone，PLUNC）家族的一员，特异表达于呼吸道，是呼吸道重要的天然防御分子。它不仅参与外来病原体特别是革兰阴性菌的清除和免疫应答、炎症的调节，而且也参与肿瘤的发生、发展，与多种人类呼吸道疾病有关。splunc1可能成为鼻咽癌、非小细胞肺癌早期诊断及判断疗效、预后的一种非常有前景的标记物。

关键词： splunc1 黏膜的免疫应答呼吸道疾病

splunc 1通过TLR4信号通路抑制炎症参与鼻咽癌发生的机制研究

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SPLUNC 1通过TLR4信号通路抑制炎症参与鼻咽癌发生的机制研究