检索结果-南通市图书馆

作者：张建奇华中科技大学

学位级别：硕士

肝癌目前已经成为我国最普遍的癌症之一,并且在男性的癌症死亡中占比最高,是危害我国人民健康的重要疾病。肝癌的早期诊断对于提升后期的治疗效果以及提高患者的生存率都具有重要作用。作为一种新兴的医学成像技术,核磁共振成像(MRI)具... 详细信息

肝癌目前已经成为我国最普遍的癌症之一,并且在男性的癌症死亡中占比最高,是危害我国人民健康的重要疾病。肝癌的早期诊断对于提升后期的治疗效果以及提高患者的生存率都具有重要作用。作为一种新兴的医学成像技术,核磁共振成像(MRI)具有诊断符合率高、无创伤等诸多优点,非常适合用于肝癌的临床诊断。但对于直径小于1cm的肿瘤组织,MRI存在着病灶部位与正常组织信号区别不明显的问题,需要使用对比剂提升病灶部位与正常组织的信号差异。超顺磁性纳米氧化铁颗粒(spion)作为MRI的T2对比剂,具有良好的生物相容性、较低的毒性、较高的弛豫率以及被动靶向肿瘤部位等优点,且通过对spion的功能化修饰可以实现对肝癌的主动靶向,是一种极具发展潜力的肝癌诊断MRI对比剂。本论文制备了一种具有主动靶向及被动靶向肿瘤能力的spion,并通过细胞实验以及动物模型实验对制备的spion的靶向能力以及肝癌成像能力进行了评估。本论文的具体研究内容如下:(1)制备了粒径在38 nm,电位在-6 mV的由羟乙基淀粉(HES)包覆的亲水性spion,动态光散射测量结果显示制备的spion粒径分布窄,在水中分布均匀;溶解度及稳定性试验显示制备的spion具有很高的溶解度且能够较长时间内保持稳定。合成并分离纯化了酸性响应多肽pHLIP的N端及C端链接在聚乳酸上形成的两种聚赖氨酸聚合物PDL-(PEG)-ACP(N端链接)以及pHLIPx-(PEG)-PDL(C端链接),使用紫外以及荧光光谱对聚合物的结构进行了确认;使用圆二色光谱验证了聚合物上的靶向多肽的pH响应能力。运用合成的聚合物成功地对spion进行了组装获得了spion纳米簇,DLS结果显示通过控制聚合物的量可以精准控制所得的spion纳米簇的粒径,TEM结果显示组装得到的spion纳米簇在水中分布均匀、粒径分布窄、形貌完整,稳定性试验证明组装的spion纳米簇具有良好的胶体稳定性。(2)通过细胞实验考察了制备的spion纳米簇的酸性环境响应能力,结果显示带有酸性响应多肽的spion纳米簇在弱酸性条件下有着更多的细胞摄取,即具有良好的pH响应能力,PDL-(PEG)-ACP组装的spion纳米簇拥有更好的pH响应功能。(3)考察了spion及其纳米簇溶液的横向弛豫率,结果显示制备的亲水性的HES-spion的弛豫率为55.367 mM-1·s-1,弛豫率与spion的粒径程正相关关系;使用手术移植法建立了小鼠原位肝癌模型,之后采用组织观察法以及切片观察法验证了原位肝癌的成功建立;使用制备spion纳米簇进行小鼠原位肝癌的MRI成像,结果显示不同的spion纳米簇都具有一定的背景T2造影效果,而只有pH响应的spion纳米簇具备肿瘤动态MRI成像的能力,这对于准确诊断直径<1cm的肝癌肿瘤有着潜在实际应用价值。

关键词： spion 对比剂 MRI 肿瘤靶向肝癌

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纳米材料spion诱导人单核细胞自噬作用的研究

纳米材料SPION诱导人单核细胞自噬作用的研究

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第十届全国免疫学学术大会

作者：吴啟洪冯婷金蓉蓉朱婷婷艾华李虹四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院四川大学国家生物材料工程技术研究中心

研究背景:纳米材料被广泛的运用于生物医药行业,其可以作为药物载体、药物释缓剂、造影剂等,但是其生物安全性一直是研究者被受关注的问题。spion具有很好的生物相容性,被广泛的运用于临床的诊断和治疗。因此,研究spion与人的免疫细胞... 详细信息

研究背景:纳米材料被广泛的运用于生物医药行业,其可以作为药物载体、药物释缓剂、造影剂等,但是其生物安全性一直是研究者被受关注的问题。spion具有很好的生物相容性,被广泛的运用于临床的诊断和治疗。因此,研究spion与人的免疫细胞之间的相互作用对其生物安全性评价具有重要的意义。目的 :本文主要拟研究纳米材料spion对人单核细胞自噬的诱导作用,探讨其作用机制并进一步评价spion的生物安全性。方法 :采集健康人外周血,分离获取单个核细胞(PBMC),并用CD14磁珠分选得到单核细胞,采用流式细胞术检测其纯度和颗粒度(side-scatter);将纯化的单核细胞接种于24孔板进行培养,再用不同浓度的spion(0、10、20、50、100μg/μl)刺激单核细胞,刺激24h后收集细胞,分别采用Western Blot检测自噬相关蛋白LC3及P62的表达情况,并用MDC染色检测其自噬泡,以及CCK-8方法检测spion刺激后单核细胞活性。结果:流式显示单核细胞的纯度在92.7%—96.2%之间,能够满足实验需要;spion的浓度越高其颗粒度越大,提示单核细胞可能以非饱和的方式对材料进行摄取。Western Blot结果显示经spion刺激诱导后,单核细胞内自噬标记物LC3由|型向‖型转换,并且呈剂量依赖性增加,自噬负调控蛋白P62的条带和灰度值亦呈剂量依赖性减少,并且MDC染色法结果显示自噬泡的数量和荧光强度都有明显增加,并呈剂量依赖性关系。CCK-8结果显示spion对单核细胞的活力无明显影响。结论 :纳米材料spion具有良好的生物相容性,并且能够诱导人单核细胞发生自噬,其自噬在其中的具体作用机制还有待作进一步的研究。

关键词：纳米材料 spion 自噬单核细胞

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spions Increase Biofilm Formation by <i>Pseudomonas aeruginosa</i>

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Journal of Biomaterials and Nanobiotechnology 2012年第4期3卷 508-518页

作者： Carl Haney John J. Rowe Jayne B. Robinson Department of Biology University of Dayton Dayton USA

Limited research has suggested iron oxide nanoparticles (FeNP) have an inhibitory effect against several different genera of bacteria: Staphylococcus, Bacillus and Pseudomonas spp. In this study we looked at the effect of three different sets of Fe3O4 nanoparticles (FeNPs) on the development of Pseudomonas aeruginosa PAO1 biofilms. Two of the tested NPs were spions (Superparamagnetic Iron Oxide Nanoparticles). Exposure of cells to the spions at concentrations up to 200 μg/ml resulted in an increase in biofilm biomass by 16 h under static conditions and a corresponding increase in cell density in the bulk liquid. In contrast, these biofilms had decreased levels of extracellular DNA (eDNA). Fe(II) levels in the supernatants of biofilms formed in the presence of FeNPs exceeded 100 μM compared with 20 μM in control media without cells. Spent cell supernatants had little effect on Fe(II) levels. Cells also had an effect on the aggregation behavior of these nanoparticles. spions incubated with cells exhibited a decrease in the number and size of FeNP aggregates visible using light microscopy. spions resuspended in fresh media or spent culture supernatants formed large aggregates visible in the light microscope upon exposure to a supermagnet;and could be pelleted magnetically in microtitre plate wells. In contrast, spion FeNPs incubated with cells were unaffected by exposure to the supermagnet and could not be pelleted. The results of this study indicate a need to reconsider the effects of FeNPs on bacterial growth and biofilm formation and the effect the bacterial cells may have on the use and recovery of spions.

关键词： spion Iron Oxide Nanoparticles Biofilms Pseudomonas Aeruginosa Magnetism Nanotechnology

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Measurements of Pulsed 532 nm Laser Breakdown Spectroscopy of Synthesized Magnetite Nanoferrofluid

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World Journal of Nano Science and Engineering 2018年第3期8卷 39-55页

作者： Mohammad E. Khosroshahi Maryam Tajabadi Laser and Nanobiophotonics Laboratory Biomaterial Group Faculty of Biomedical Engineering Amirkabir University of Technology Tehran Iran MIS-Electronics Nanobiophotonics and Biomedical Research Laboratory Richmond Hill Canada Department of Mechanical and Industrial Engineering University of Toronto Toronto Canada School of Metallurgy and Materials Engineering Iran University of Science and Technology Tehran Iran

We describe the results of 532 nm pulse laser-induced breakdown spectroscopy (LIBS) of two samples of magnetite nanoparticles (spions) nanoferrofluid synthesized at room (S1) and elevated temperatures (S2) and at three different laser energy levels and pulse frequency. The size of magnetite nanoparticles, size distribution, magnetic crystalline phase and magnetization were analyzed and measured using transmission electron microscopy (TEM), X-ray diffraction spectroscopy (XRD) and vibrating sample magnetometry (VSM). The spions showed a distribution between 4 - 22 nm with a peak about 12 nm and saturation magnetization of about 65 emu/g. The Saha-Boltzmann analysis of spectra for medium energy level (1050 mJ) yields plasma temperatures of (3881 ± 200) K and (26,047 ± 200) K for Fe I and OV as the lowest and highest temperatures respectively. A range of corresponding electron density (Ne-) of (0.47 - 6.80) × 1020, (0.58 - 8.30) × 1020 and (0.69 - 9.96) × 1020 cm-3?were determined at 860, 1050 and 1260 mJ respectively using the estimated CCD pictures. The results confirmed a higher elements ratio for S1 than S2 and the signal intensity indicated a non-linear behaviour as a function of pulse frequency with the maximum ratio value at 3 Hz. At higher frequency of 6 Hz no such turning point was observed. The highest and lowest temperatures corresponded to Fe I and OV respectively. The LIBS technique can be utilized to study, characterize and determine the elements ratio required in most applications involving the synthesizing process.

关键词： Laser-Induced Breakdown Spectroscopy Second Harmonic Generation spion Nanoferrofluid Elements Ratio

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胰腺癌多功能影像分子探针构建及性能的初步研究

胰腺癌多功能影像分子探针构建及性能的初步研究

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作者：蒲宇福建医科大学

学位级别：硕士

目的:探索通过化学合成方式构建具有磁共振成像和胰腺癌基因沉默作用的多功能影像分子探针的合成条件,并在体内外评价该分子探针的生物特性、显影条件和治疗效果。方法:1.PEI/spion基因载体的构建。通过有机高温热分解法制备尺寸均一可... 详细信息

目的:探索通过化学合成方式构建具有磁共振成像和胰腺癌基因沉默作用的多功能影像分子探针的合成条件,并在体内外评价该分子探针的生物特性、显影条件和治疗效果。方法:1.PEI/spion基因载体的构建。通过有机高温热分解法制备尺寸均一可控的有机相spion晶体,通过动态光散射法(DLS)检测了其粒径大小和分布,通过透射电子显微镜观察纳米晶体的分布与晶面间距。用N,N’-羰基二咪唑(CDI)对胆固醇(Chol)分子中的羟基进行活化制备中间体,并进一步与支链聚醚酰亚胺(PEI,2 k Da)上的氨基反应,获得部分疏水分子接枝的双亲性PEI分子(PEI-g-Chol)。通过核磁共振氢谱(H-NMR)表征该分子的化学结构和接枝率,通过CCK-8实验检测其细胞毒性。应用该双亲性分子PEI-g-Chol在水溶液中包裹有机相spion制备PEI/spion纳米复合物,复合siRNA后检测其纳米粒度和电位,通过临床1.5T MRI测试其体外弛豫效率和对比增强效果。2.PEI/spion/siRNA多功能影像分子探针体外验证。通过人黏蛋白4(MUC4)m RNA序列设计出沉默效果最好的siRNA序列。采用琼脂糖凝胶电泳阻滞实验,检测PEI/spion与siRNA的复合效率。采用肝素释放实验,通过琼脂糖凝胶电泳检测PEI/spion/siRNA纳米分子探针在肝素钠的作用下siRNA的释放情况以及是否有结构变化。通过血清稳定性实验,检测PEI/spion/siRNA纳米分子探针在血清中的稳定性。在体外通过PEI/spion/siRNA纳米分子探针标记胰腺癌细胞株,再进行普鲁士蓝染色,检测胰腺癌细胞对纳米分子探针的吞噬效率并确定安全有效的细胞吞噬浓度。同时分别用脂质体和PEI/spion做为载体,装载相同浓度的siRNA并转染胰腺癌细胞,通过RT-PCR和Western blotting检测转染后胰腺癌细胞MUC4-m RNA和MUC4蛋白的表达量,观测应用不同载体对胰腺癌细胞的沉默效率。3.PEI/spion/siRNA多功能影像分子探针体内验证。采用胰腺癌细胞株建立裸鼠皮下移植瘤动物模型,通过瘤体原位注射PEI/spion/siRNA纳米分子探针,观测肿瘤生长情况。通过Western blotting检测裸鼠肿瘤组织中MUC4蛋白的表达情况,评价PEI/spion/siRNA纳米分子探针在胰腺癌动物模型体内的基因沉默效果。结果:1.动态光散射法(DLS)显示PEI/spion纳米基因载体在水溶液中的粒度为61.7±18.5 nm,Zeta电位为46.7±0.8 m V。H-NMR显示以PEI和胆固醇特征氢H-NMR积分含量计算PEI-g-Chol中胆固醇接枝率为5%。磁共振成像显示PEI/spion纳米基因载体具有较高的T弛豫效率(423 Fe m Ms)。CCK-8细胞毒性实验结果显示,Fe浓度为0,1.5,3,6μg/m L时,PEI/spion纳米基因载体对细胞无毒性,Fe浓度为12μg/m L时,具有细胞毒性。2.PEI/spion/siRNA多功能影像分子探针体外实验表明,通过MUC4 m RNA序列设计的siRNA序列为5’-GAACAACUUCAGUCCAACUTT-3’,将PEI/spion与siRNA以氮磷比(N/P)为25的条件进行复合,PEI/spion基因载体能够有效的复合siRNA。通过1%凝胶电泳证实肝素钠与siRNA质量比在(10,20,40)的情况下均能完全释放PEI/SPIO/siRNA复合物中的siRNA,并且释放的siRNA与自由siRNA的电泳位置相同,证明siRNA原有结构没有发生变化。PEI/spion/siRNA血清稳定性实验结果表明,PEI/spion/siRNA复合物与50%血清孵育48小时后siRNA条带明显,PEI/spion基因载体可以很好的保护siRNA免受核酸酶降解。PEI/spion/siRNA复合物细胞吞噬实验表明,复合物能够被细胞吞噬且6 ug/m L的Fe浓度为安全有效的细胞吞噬浓度。PEI/spion/siRNA复合物对胰腺癌细胞株MUC4基因沉默实验表明,装载同等浓度的siRNA转染胰腺癌细胞,对比Lipofectamine 2000脂质载体,PEI/SPIO载体对MUC4基因有更好的沉默效应,能够减少胰腺癌细胞MUC4蛋白的表达。3.PEI/spion/siRNA多功能影像分子探针体内实验表明,在裸鼠胰腺癌皮下移植瘤动物模型原位注射该分子探针,能够抑制胰腺癌瘤体的生长和降低瘤体中MUC4蛋白的表达。结论:1.对PEI/spion载体进行表征证实,该载体为带正电荷的纳米团簇结构,能够自动复合和释放siRNA,具有较高的磁共振T弛豫效率和增强效果。2.PEI/spion/siRNA分子探针体外实验证实,该分子探针具有较高的血清稳定性,能够通过细胞吞噬作用进入细胞,转染人胰腺癌细

关键词：胰腺癌 spion MUC4 siRNA沉默

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