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spinophilin的表达与垂体腺瘤侵袭性的关系

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中国临床神经外科杂志 2022年第5期27卷 373-375,379页

作者：阳荣牟吉周龙田仁富恩施土家族苗族自治州中心医院神经外科湖北445500

目的探讨垂体腺瘤(PA)组织spinophilin(SPN)的表达及其与腺瘤侵袭性的关系。方法选取2018年8月至2021年6月手术切除并经术后病理确诊的PA组织98例和瘤旁组织64例,用免疫组化染色检测SPN蛋白表达水平,应用PCR检查PA组织SPN mRNA表达水... 详细信息

目的探讨垂体腺瘤(PA)组织spinophilin(SPN)的表达及其与腺瘤侵袭性的关系。方法选取2018年8月至2021年6月手术切除并经术后病理确诊的PA组织98例和瘤旁组织64例,用免疫组化染色检测SPN蛋白表达水平,应用PCR检查PA组织SPN mRNA表达水平。根据Knosp分类法评估肿瘤侵袭性。结果 98例中,侵袭性46例,非侵袭性52例。PA组织SPN阳性表达率(21.43%,21/98)明显低于瘤旁组织(71.87%,46/64;P<0.05)。侵袭性PA组织SPN阳性表达率(13.04%,6/46)明显低于非侵袭性PA组织(28.85%,15/52;P<0.05)。PA组织SPN mRNA相对表达量(1.21±0.37)明显低于瘤旁组织(2.89±0.75;P<0.05)。SPN阴性表达(OR=2.876;95%CI 1.003-5.121;P<0.001)是PA侵袭性的独立危险因素。ROC曲线分析显示,SPN mRNA预测PA侵袭性的AUC为0.830(95%CI 0.813-0.916;P<0.001),诊断临界值为0.84,灵敏度和特异度分别为95.23%和83.12%。结论侵袭性PA组织SPN呈低表达,检测SPN表达水平对PA侵袭性有一定评估作用。

关键词：垂体腺瘤 spinophilin 肿瘤侵袭性基因表达

Angiotensin IV upregulates the activity of protein phosphatase 1α in Neura-2A cells

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Protein & Cell 2013年第7期4卷 520-528页

作者： Dan Wang Peng Xue Xiu Lan Chen Zhen Sheng Xie Fu Quan Yang Li Zheng Tao Xu National Key Laboratory of Biomacromolecules Institute of BiophysicsChinese Academy of SciencesBeijing 100101China University of Chinese Academy of Science Beijing 100049China

The peptide angiotensin IV(Ang IV)is a derivative of angiotensin II.While insulin regulated amino peptidase(IRAP)has been proposed as a potential receptor for Ang IV,the signalling pathways of Ang IV through IRAP remain elusive.We applied high-resolution mass spectrometry to perform a systemic quantitative phosphoproteome of Neura-2A(N2A)cells treated with and without Ang IV us-ing sta ble-isotope labeling by amino acids in cell culture(SILAC),and identifi ed a reduction in the phosphorylation of a major Ser/Thr protein phosphorylase 1(PP1)upon Ang IV treatment.In addition,spinophilin(spn),a PP1 reg-ulatory protein that plays important functions in the neural system,was expressed at higher levels.Immunoblotting revealed decreased phosphorylation of p70S6 kinase(p70S6K)and the major cell cycle modulator retinoblas-toma protein(pRB).These changes are consistent with an observed decrease in cell proliferation.Taken together,our study suggests that Ang IV functions via regulating the activity of PP1.

关键词： angiotensin IV PP1α cell proliferation p70S6 kinase spinophilin

人脑胶质瘤组织中spinophilin的表达及临床意义

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临床与实验病理学杂志 2021年第9期37卷 1044-1048页

作者：邢靖松梁东克甜甜张琳于如同高尚锋徐州医科大学附属医院神经外科/徐州医科大学神经系统疾病研究所徐州221000 吉林大学第一医院康复科长春130000

目的探讨spinophilin在人脑胶质瘤和非瘤脑组织中的表达差异,分析其表达与胶质瘤病理分级、IDH分型及患者预后的关系。方法应用公共数据库分析spinophilin在不同级别、不同亚型脑胶质瘤中的表达及与患者预后的关系。采用qRT-PCR、免疫... 详细信息

目的探讨spinophilin在人脑胶质瘤和非瘤脑组织中的表达差异,分析其表达与胶质瘤病理分级、IDH分型及患者预后的关系。方法应用公共数据库分析spinophilin在不同级别、不同亚型脑胶质瘤中的表达及与患者预后的关系。采用qRT-PCR、免疫组化和Western blot法检测其在非瘤脑组织和胶质瘤组织中的表达。结果分析TCGA胶质瘤数据库和应用qRT-PCR检测2016年2月~2018年2月徐州医科大学附属医院收治的胶质瘤标本发现,spinophilin mRNA水平在WHOⅣ级胶质瘤中明显低于非瘤脑组织(Pspinophilin mRNA水平在WHOⅢ级(Pspinophilin mRNA表达下调,其中在GSE16011(Pspinophilin蛋白明显降低(Pspinophilin在不同级别胶质瘤中均表达下调,在WHOⅣ级胶质瘤中下调差异具有统计学意义(Pspinophilin高表达胶质瘤患者的总生存时间显著长于低表达患者(Pspinophilin在WHOⅡ级(P=0.041)和Ⅲ级(P=0.033)胶质瘤中高表达与患者较长的生存期相关。结论spinophilin高表达胶质瘤患者的预后较好,有望成为脑胶质瘤分子病理诊断和预后评估的生物标志物。

关键词：脑胶质瘤 spinophilin WHO分级 IDH 生存分析

谷氨酸致痫大鼠海马内spinophilin免疫反应的变化

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中国组织化学与细胞化学杂志 2002年第3期11卷 244-247页

作者：王争艳周厚纶刘庆莹魏瑛童逸龄朱长庚华中科技大学同济医学院人体解剖学教研室武汉430030

目的　研究spinophilin与癫痫发病的关系。方法　采用侧脑室注射L 谷氨酸钠 6 μl (5 0mg/ml)制作大鼠癫痫模型 ,动物存活 2小时。然后用免疫组织化学方法观察大鼠海马内spinophilin表达的变化。结果　实验组大鼠海马CA1及CA3区阳性反... 详细信息

目的　研究spinophilin与癫痫发病的关系。方法　采用侧脑室注射L 谷氨酸钠 6 μl (5 0mg/ml)制作大鼠癫痫模型 ,动物存活 2小时。然后用免疫组织化学方法观察大鼠海马内spinophilin表达的变化。结果　实验组大鼠海马CA1及CA3区阳性反应产物较对照组明显增多。结论　提示spinophilin可能参与了癫痫的发生。

关键词：免疫组织化学癫痫谷氨酸致痫大鼠海马 spinophilin 免疫反应

背根神经节中spinophilin对TRPV1的负性调控作用

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背根神经节中Spinophilin对TRPV1的负性调控作用

作者：郭浈兰州大学

学位级别：硕士

目的:瞬时感受器电位香草酸受体1(Transient Receptor Potential Vanilloid 1,简称TRPV1,又称辣椒素受体)是一种离子通道型受体,在痛觉传递和外周敏化过程中发挥着重要作用。我们以前的研究已经证明:在脊髓背角,spinophilin能够与蛋白... 详细信息

目的:瞬时感受器电位香草酸受体1(Transient Receptor Potential Vanilloid 1,简称TRPV1,又称辣椒素受体)是一种离子通道型受体,在痛觉传递和外周敏化过程中发挥着重要作用。我们以前的研究已经证明:在脊髓背角,spinophilin能够与蛋白磷酸酶1(protein phosphatase-1,PP1)结合,并将后者募集到突触后致密质,参与痛觉传递和突触可塑性的调控。但是,spinophilin在背根神经节(dosal root ganglia,DRG)中的功能尚不清楚。本研究旨在探讨spinophilin在DRG中的分布以及对TRPV1功能的影响;阐明外周炎性损伤导致的TRPV1功能亢进与spinophilin的关系。方法:利用免疫荧光组织化学方法,研究spinophilin在DRG中的分布。通过检测小鼠的热缩足潜伏期(Paw withdrawal latencies,PWLs)、机械性缩足阈值(Paw withdrawal thresholds,PWTs)、冷痛觉超敏和运动功能,研究spinophilin/PP1复合物在痛觉传递中的功能。免疫印迹法研究spinophilin/PP1复合物对TRPV1和CaMKII磷酸化水平的影响。膜蛋白生物素(Surface biotinylation)标记法检测spinophilin/PP1复合物对TRPV1膜表达的影响。免疫共沉淀法(Co-Immunoprecipitation)研究外周炎性损伤对spinophilin/PP1复合物与TRPV1间相互作用的影响。小鼠后足底皮下注射辣椒素(capsaicin)或福尔马林(formalin)建立自发性疼痛模型,用行为学方法研究spinophilin/PP1复合物在外周痛觉敏化中的作用。结果:(1)spinophilin广泛分布在DRG中,并且与神经元标记物NeuN、降钙素基因相关肽(CGRP)和异凝集素-B4(IB4)共分布,而与星形胶质细胞标志物GFAP几乎不存在共分布,提示,spinophilin可表达于肽能和非肽能C纤维伤害性感受器。(2)在DRG中转染spinophilin(F451A)突变体以打断spinophilin与PP1的结合,不影响小鼠的正常运动机能和对冷刺激的敏感性,但可显著降低小鼠的PWLs和PWTs,提示,内源性spinophilin锚定的PP1抑制着动物对机械性刺激和热刺激的敏感性。(3)spinophilin的特异性抗体可从小鼠的DRG裂解液中免疫共沉淀出TRPV1和PP1,提示,spinophilin可引导PP1靠近TRPV1。(4)表达spinophilin(F451A),可提高TRPV1第502位丝氨酸(Ser502)的磷酸化和CaMKII第286位苏氨酸(Thr286)的自磷酸化水平,提示,spinophilin锚定的PP1可抑制CaMKII对TRPV1的催化磷酸化。(5)表达野生型的spinophilin(WT),有降低TRPV1膜表达的趋势,但这种差异无统计学意义;然而,spinophilin(F451A)却可显著增加TRPV1在细胞膜表面的分布,提示,spinophilin/PP1复合物抑制着TRPV1的膜表达。(6)虽然spinophilin(WT)不影响正常动物TRPV1的膜表达,但却能够显著缩短capsaicin诱发的自发性疼痛过程中动物的累计舔足时长,提示,spinophilin/PP1复合物可抑制TRPV1依赖性的痛觉敏化。(7)福尔马林可打断spinophilin与TRPV1的相互作用,提高DRG神经元中TRPV1 Ser502的磷酸化水平。(8)DRG中表达spinophilin(WT),可阻断福尔马林诱发的Ser502磷酸化水平升高,缓解福尔马林诱发的两相自发性疼痛反应。结论:spinophilin引导的PP1控制着DRG神经元中TRPV1的磷酸化和膜表达;spinophilin与TRPV1的解离,是诱发TRPV1功能亢进的重要因素;增强spinophilin对PP1的锚定作用可有效抑制炎性痛觉敏化。

关键词： spinophilin 蛋白磷酸酶-1 TRPV1 背根神经节炎性痛觉敏化

RIN1与脊髓背角spinophilin之间的相互作用及其调控机制

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RIN1与脊髓背角Spinophilin之间的相互作用及其调控机制

作者：薛野兰州大学

学位级别：硕士

目的:spinophilin能够与细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、蛋白磷酸酶-1(PP1)、突触后致密质-95(PSD-95)等多种信号分子、骨架蛋白相互作用。作为一种锚定蛋白,spinophilin能将其结合的蛋白(binding partners)定位在特定的亚细胞区域,决定... 详细信息

目的:spinophilin能够与细胞外信号调节激酶(ERK1/2)、蛋白磷酸酶-1(PP1)、突触后致密质-95(PSD-95)等多种信号分子、骨架蛋白相互作用。作为一种锚定蛋白,spinophilin能将其结合的蛋白(binding partners)定位在特定的亚细胞区域,决定着这些结合蛋白的作用特异性。前期资料显示:spinophilin表达于脊髓背角,能够抑制兴奋性谷氨酸受体介导的痛觉突触传递,有效缓解外周组织损伤诱发的痛觉超敏。RIN1(Ras and Rab Interacting protein-1)是一种多功能的胞内信号蛋白,对调节ERK1/2、小GTP酶Rab5、酪氨酸激酶c-ABL等信号分子的活性至关重要,但RIN1的脊髓功能尚远不清楚。本文探讨了spinophilin与RIN1之间的相互作用及其调控特征。方法:本研究用免疫共沉淀法,探讨了spinophilin和RIN1在脊髓背角中的相互作用;通过大鼠鞘内注射N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate;NMDA)、代谢型谷氨酸受体1/5(metabotropic glutamate receptors 1/5;m Glu R1/5)激动剂DHPG、以及后足底皮下注射完全佛氏佐剂(Complete Freund’s Adjuvant;CFA),探讨了NMDA受体、m Glu R1/5受体以及外周炎性损伤对脊髓背角spinophilin和RIN1之间的相互作用的影响。结果:(1)免疫印迹实验显示:RIN1表达于大鼠脊髓背角;(2)免疫共沉淀实验显示:抗spinophilin的特异性抗体,能够从大鼠脊髓背角中共沉淀出RIN1;抗RIN1的特异性抗体,也能够共沉淀出spinophilin,提示:RIN1和spinophilin之间存在着分子间的、直接或间接的相互作用;(3)正常成年大鼠后足底皮下注射CFA(20μl),能够明显降低Von Frey纤维诱发的缩足阈值,诱发痛觉超敏;同时,抗spinophilin的特异性抗体从脊髓背角中沉淀出的RIN1含量明显减少,提示:外周组织损伤会打断RIN1和spinophilin之间的相互作用;(4)给正常成年大鼠鞘内注射NMDA受体激动剂NMDA(1μg)或m Glu R1/5受体激动剂DHPG(20μg),在降低缩足阈值的同时,也会减弱RIN1和spinophilin的相互作用,提示:RIN1/spinophilin的结合受到NMDA受体和m Glu R1/5受体的调控;(5)此外,改变蛋白磷酸酶的活性,也会影响RIN1和spinophilin的结合,因为给正常成年大鼠鞘内注射钙调磷酸酶(Calcineurin)抑制剂Cyclosporine A(50μg)后,抗RIN1的特异性抗体从脊髓背角中沉淀出的spinophilin含量会明显减少;(6)NMDA受体的NR2A亚基可能也通过spinophilin与RIN1相互作用。结论:spinophilin与RIN1具有密切的相互作用,两者的相互作用受到NMDA受体、m Glu R1/5受体以及蛋白磷酸酶的调节。

关键词： N-甲基-D-天门冬氨酸型谷氨酸受体代谢型谷氨酸受体脊髓背角完全弗氏佐剂 Ras and Rab Interacting protein-1 spinophilin

spinophilin在神经系统疾病中的研究进展

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基础医学与临床 2021年第10期41卷 1507-1509页

作者：邢靖松克甜甜张琳梁东张桐高尚锋徐州医科大学附属医院神经外科江苏徐州221002 徐州医科大学神经系统疾病研究所江苏徐州221002

spinophilin(SPN)最早作为蛋白磷酸酶PP1的结合蛋白从神经元树突棘中分离出来,故又名PPP1R9B。SPN不仅与PP1结合,而且与包括细胞骨架蛋白、黏附分子等30多个蛋白存在相互作用,参与突触可塑性、神经元迁移、胞内信号传导等生物学过程,并... 详细信息

spinophilin(SPN)最早作为蛋白磷酸酶PP1的结合蛋白从神经元树突棘中分离出来,故又名PPP1R9B。SPN不仅与PP1结合,而且与包括细胞骨架蛋白、黏附分子等30多个蛋白存在相互作用,参与突触可塑性、神经元迁移、胞内信号传导等生物学过程,并在神经退行性疾病、精神性疾病和神经肿瘤进展中发挥重要作用。因此,了解SPN在上述生理和病理过程中的作用及机制将有助于推进SPN基础研究与临床转化的进展。

关键词： spinophilin 帕金森病抑郁症胶质瘤

spinophilin蛋白及其催化亚基在肺癌预后的研究

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临床肺科杂志 2018年第10期23卷 1902-1904页

作者：吴娟娟吴晓梅哈尔滨医科大学附属第二医院呼吸内科黑龙江哈尔滨150086

肺癌（lung cancer）是目前危及人类健康最常见的恶性肿瘤之一,随着人口老龄化、空气质量的降低等,肺癌的发病率及死亡率呈现逐年上升的趋势,全球每年因肺癌死亡的患者约为140万,占各种恶性肿瘤死亡总人数的18%^（[1]）。肺癌患者的预... 详细信息

肺癌（lung cancer）是目前危及人类健康最常见的恶性肿瘤之一,随着人口老龄化、空气质量的降低等,肺癌的发病率及死亡率呈现逐年上升的趋势,全球每年因肺癌死亡的患者约为140万,占各种恶性肿瘤死亡总人数的18%^（[1]）。肺癌患者的预后状况筛查成为研究的热点,同时为治疗肺癌奠定了基础。

关键词： spinophilin 催化亚基 PPP

邻苯二甲酸丁苄酯(BBP)对雄性F1大鼠海马BDNF、CREST、spinophilin mRNA表达的影响

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邻苯二甲酸丁苄酯(BBP)对雄性F1大鼠海马BDNF、CREST、Spinophili...