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中国兽医学报 2010年第7期30卷 969-973页

作者：刘慧敏陈陆杨霞常洪涛郑鹿平王永生高冬生王珊王川庆河南农业大学禽病研究所河南郑州450002

采用鸡杆菌自然病例分离纯化的鸡杆菌人工感染开产前(105日龄)和开产后(163日龄)的spf蛋鸡,运用组织学的方法对鸡杆菌自然病例和试验病例进行比较病理学观察。结果表明,自然病例和试验病例均可引起蛋鸡产蛋高峰推迟,产蛋量下降,且多产... 详细信息

采用鸡杆菌自然病例分离纯化的鸡杆菌人工感染开产前(105日龄)和开产后(163日龄)的spf蛋鸡,运用组织学的方法对鸡杆菌自然病例和试验病例进行比较病理学观察。结果表明,自然病例和试验病例均可引起蛋鸡产蛋高峰推迟,产蛋量下降,且多产畸形蛋;病变主要在呼吸道和生殖道,主要表现为呼吸道和生殖道黏膜层严重充血、水肿、浆液性及炎性渗出等反应。但是试验病例未出现自然病例中常见的腹膜炎和输卵管炎症状。输卵管的病变主要在膨大部和子宫部,这种特征性病变可作为该病病理诊断的重要指征之一。这表明鸡杆菌单因子感染可引起spf开产蛋鸡生产性能明显降低以及呼吸道和生殖道的病理变化。

关键词： spf蛋鸡鸡杆菌病理学输卵管

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鸭源鸡杆菌在spf蛋鸡体内的动态分布及鸡IBV对其影响

鸭源鸡杆菌在SPF蛋鸡体内的动态分布及鸡IBV对其影响

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十六次学术研讨会

作者：皇甫和平赵军杨霞李乔晶王川庆王新卫刘红英河南农业大学禽病研究所郑州牧业工程高等专科学校河南农业大学禽病研究所

前言鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis)在鸡体内的分布能反映出其和相应疾病之间的关系,研究***在鸡体内的动态分布将有助于进一步了解其致病机制。鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitisvirus,IBV)也可以引起鸡的呼吸道及生殖... 详细信息

前言鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis)在鸡体内的分布能反映出其和相应疾病之间的关系,研究***在鸡体内的动态分布将有助于进一步了解其致病机制。鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitisvirus,IBV)也可以引起鸡的呼吸道及生殖道感染,并且有人认为鸡输卵管囊肿的发生与鸡IBV早期感染有关心;鸡杆菌常和IBV、禽肺病毒、腺病毒、支原体等混合感染,并且鸡杆菌可能会诱发或加剧其它病原的感染。因此本试验拟通过对spf蛋鸡人工感染***和IBV,利用定量PCR(Quantitative PCR,qPCR)检测接种后不同时间点、不同器官中***的DNA含量,研究其在鸡体

关键词：鸭源鸡杆菌 spf蛋鸡动态分布传染性支气管炎病毒

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与鸡传染性支气管炎病毒混合感染状况下鸭源鸡杆菌在鸡体内的分布

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畜牧兽医学报 2012年第10期43卷 1623-1629页

作者：皇甫和平赵军杨霞李乔晶王川庆陈陆常洪涛王新卫刘红英姚慧霞河南农业大学禽病研究所郑州450002 郑州牧业工程高等专科学校郑州450011

为研究鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis)在鸡体内的动态分布及鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)对其的影响,将鸭源鸡杆菌和鸡传染性支气管炎病毒分别或同时人工接种spf蛋鸡,分别于接种后12、24、48、72、96h对... 详细信息

为研究鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis)在鸡体内的动态分布及鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)对其的影响,将鸭源鸡杆菌和鸡传染性支气管炎病毒分别或同时人工接种spf蛋鸡,分别于接种后12、24、48、72、96h对鸡进行剖检,无菌采集鸡的10种组织样品(上腭裂、气管、肺脏、心脏、脾脏、卵巢、肾脏、肝脏、十二指肠和输卵管),利用SYBR Green I定量PCR(Quantitative PCR,qPCR)方法检测鸭源鸡杆菌组、混合感染组在不同时间点、不同器官中的鸭源鸡杆菌DNA含量。结果显示:鸭源鸡杆菌单独感染时,12h时即可侵袭到气管、心脏、脾脏、卵巢和肾脏,24h时便可感染肝脏、十二指肠和输卵管,48h时可传播到肺脏,72h时感染上腭裂。混合感染组结果表明,鸭源鸡杆菌12h到达卵巢,24h时即可出现在所有器官。混合感染组各器官的总体qPCR检出率为37.1%,显著高于鸭源鸡杆菌组的25.3%。鸭源鸡杆菌组和混合感染组qPCR检测结果均显示,鸭源鸡杆菌DNA在气管中的检出率最高,在卵巢中达到最高含量。鸭源鸡杆菌能够造成试验鸡的全身感染,该菌主要对鸡的呼吸系统和生殖系统有致病性,气管和卵巢是其主要的致病器官;2种病原同时接种加重了全身感染,IBV促进了鸭源鸡杆菌在鸡体内的传播,尤其促进了其在十二指肠中的增殖,增强了鸭源鸡杆菌对消化系统的致病性,导致鸡腹泻的发生。

关键词：鸭源鸡杆菌 spf蛋鸡动态分布传染性支气管炎病毒定量PCR 人工感染

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我国鸡群鸡杆菌的首次分离鉴定及生物学特性初步研究

我国鸡群鸡杆菌的首次分离鉴定及生物学特性初步研究

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作者：郑鹿平河南农业大学

学位级别：硕士

鸡杆菌属（Gallibacterium）是Christensen等2003年以16S rRNA基因序列分析为基础建议在巴氏杆菌科单独成立的一个新属。2009年Bisgaard等明确该属包括Gallibacterium anatis、Actinobacillus salpingitidis、Gallibacterium melopsittaci和Gallibacterium trehalosifermentans 4个种,其代表种是Gallibacterium anatis。该菌有溶血型和非溶血型两个表型。国内对该菌的研究甚少。为进一步了解我国部分地区鸡场不同鸡群中鸡杆菌的感染情况,本实验对河南、山西、山东等地区的30个鸡群进行了鸡杆菌的分离鉴定。30个鸡群包括15个输卵管炎患病鸡群、2个spf鸡群、6个健康蛋鸡群、5个商品公鸡群、2个种公鸡群。同时为了解鸡杆菌的微生物学特性,以便开展其分子流行病学、分子遗传学及发病机制的研究,本试验对部分鸡杆菌分离株的培养特性、生化特性、药物敏感性及致病性进行了初步研究,并得到如下结果:1.对107只来自河南、山西的15个鸡群的输卵管炎患病鸡的10种组织脏器（心脏、肝脏、脾脏、肺脏、气管、十二指肠、输卵管、卵巢、泄殖腔、上腭裂）进行鸡杆菌的分离鉴定。通过形态学检查、鉴别培养、特异性PCR鉴定和16SrRNA基因序列测定等方法,最终分离鉴定到鸡杆菌76株,同时得到大肠杆菌180株。鸡杆菌的感染率达42.9%。说明河南、山西两地输卵管炎患病鸡群中普遍存在鸡杆菌的感染。其中,有11只具有典型临床及病理变化的鸡仅分离出鸡杆菌一种细菌,这说明鸡杆菌具有一定的致病性,可能在鸡的输卵管炎中扮演一定的角色。但是感染鸡杆菌的46只鸡中,有35只鸡同时感染大肠杆菌（占鸡杆菌阳性鸡的76.1%）,而在临床上,大肠杆菌也是引起鸡输卵管炎的重要病原菌之一,因此,鸡杆菌在鸡输卵管炎中扮演什么样的角色,到底是继发、原发或是协同仍需进一步的研究证实。2.通过形态学检查、鉴别培养、特异性PCR鉴定等方法,对来自河南、山东、山西的2个spf鸡群的38只spf鸡、6个临床健康鸡群的33只健康鸡进行了鸡杆菌的分离鉴定。从38只spf鸡未分离出鸡杆菌,从临床健康鸡群中分离出鸡杆菌10株;临床健康鸡群中鸡杆菌的感染率达27.3%,说明临床健康蛋鸡群存在鸡杆菌的感染,但是与输卵管炎患病鸡群相比,鸡杆菌的感染率降低了15.6%,说明输卵管炎是鸡杆菌感染的重要临床特征之一。3.对来自河南省5个商品公鸡群的20只商品公鸡和两个种鸡群的9只商品种公鸡的8种组织脏器（心脏、肝脏、脾脏、肺脏、气管、十二指肠、泄殖腔、上腭裂）进行鸡杆菌的分离鉴定。从20只商品公鸡中未分出鸡杆菌,从9只商品种公鸡中分离出鸡杆菌8株。这表明,鸡杆菌可以感染种公鸡。8只鸡杆菌分离株中,其中1株不具有溶血性,可能会对鸡杆菌致病性的研究有一定价值。4.选择不同区域、不同宿主脏器的鸡杆菌分离株64株,进行培养特性、生化特性、药物敏感性研究。鸡杆菌在绵羊血、鸡血、鸭血琼脂平板上均生长良好;但是,在SS琼脂平板均不生长。通过在不同PH值的LB液体培养基中的培养,确定了鸡杆菌最适生长PH值范围是7.0～8.0。将在绵羊血培养基上划线的鸡杆菌,放于不同温度条件下培养,发现鸡杆菌在31～40℃生长良好,且在此范围内,温度越低溶血性越明显。此外,各个菌株对温度和PH敏感度存在差异。生化试验结果表明,本研究分离的鸡杆菌的某些生化特性上与国外报道的存在差异。药敏实验结果表明,大多数鸡杆菌分离株对庆大霉素、链霉素、氨苄西林、青霉素、强力霉素、诺氟沙星及磺胺类药物等具有不同程度的耐药性,耐药率在44%6.9%之间,给该菌的控制带来了难度。5.首次人工复制出鸡杆菌所致的spf鸡病例。用从输卵管囊肿自然病例中分离的鸡杆菌、大肠杆菌分别或混合对112日龄开产前和164日龄、184日龄开产后spf蛋鸡进行人工感染。对开产前的spf蛋鸡人工感染结果显示:单一鸡杆菌感染组和鸡杆菌-大肠杆菌混合感染组与对照组相比,平均开产日龄分别推迟7 d和13 d;攻毒后50 d内,产蛋量分别下降了69.7%和87.8%,劣质蛋分别增加了70%和75%。单一大肠杆菌感染组产蛋量和产蛋质量与对照组相比没有明显差异。对开产后的spf蛋鸡感染结果显示:大肠杆菌感染组和鸡杆菌-大肠杆菌混合感染组均出现死亡,而鸡杆菌感染组没有肉眼可见临床症状,只是与对照组相比,产蛋量下降了33%,劣质蛋增加了23%。112日龄鸡于感染后50 d内仍可带菌排菌。112日龄鸡于感染后50 d内、164日龄和184日龄鸡于感染后16 d内,鸡只出现输卵管的充血等炎症,但均未出现输卵管囊肿。证实了鸡杆菌具有致病

关键词：输卵管炎鸡杆菌分离鉴定微生物学特性耐药性致病性 spf蛋鸡

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鸡杆菌检测方法的建立、应用及鸡输卵管囊肿的病理学研究

鸡杆菌检测方法的建立、应用及鸡输卵管囊肿的病理学研究

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作者：刘慧敏河南农业大学

学位级别：硕士

鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis)是感染产蛋鸡群的一种潜在病原菌,与鸡输卵管囊肿有一定的关系。本研究于2007～2010年,在对河南、山东、山西、安徽等地鸡杆菌流行病学调查的基础上,从自然病例和实验病例两方面,通过PCR方法、荧光原... 详细信息

鸭源鸡杆菌(Gallibacterium anatis)是感染产蛋鸡群的一种潜在病原菌,与鸡输卵管囊肿有一定的关系。本研究于2007～2010年,在对河南、山东、山西、安徽等地鸡杆菌流行病学调查的基础上,从自然病例和实验病例两方面,通过PCR方法、荧光原位杂交方法和病理组织学观察等技术手段,建立快速、特异的检测方法并观察自然感染病例、鸡杆菌单因子感染spf蛋鸡及大肠杆菌和鸡杆菌混合感染spf蛋鸡的病理学变化,建立病理学诊断方法,为鸡杆菌的鉴别诊断和发病机理提供一定的理论依据。研究结果表明: 1.本研究建立的鸡杆菌属特异性PCR方法和荧光原位杂交法(FISH),可对临床病料组织、分泌液及血液中的鸡杆菌进行快速、特异地检测,其特异性、敏感性均高于细菌分离法。可用于对鸡杆菌早期检测和预防。 2.鸡输卵管囊肿病例的病变主要表现在鸡的呼吸系统和生殖系统,严重影响蛋鸡的产蛋量及产蛋质量;主要剖检病变为腹膜炎和输卵管不同程度的囊肿;主要组织学变化为呼吸道黏膜上皮脱落,毛细血管充血,炎性细胞浸润,输卵管病变在膨大部和子宫的黏膜层充血、炎性细胞浸润及腺体细胞变性。 3.鸡杆菌单因子人工感染开产前后spf鸡,引起开产前鸡群的开产日龄平均推迟7天,产蛋量下降69.7 %,劣质蛋增加70 %;开产后鸡群产蛋量下降33 %,劣质蛋增加23 %。未出现典型的剖检病变;组织学病变主要为输卵管膨大部和子宫黏膜上皮细胞增生,纤毛脱落及炎性渗出,腺体上皮细胞变性、胞核呈多形态等。 4.大肠杆菌感染开产前spf蛋鸡后产蛋量无变化,无特征性病理组织学变化;大肠杆菌和鸡杆菌混合感染开产前spf鸡,引起鸡群产蛋量下降87.8 %,劣质蛋增加75 %,组织学观察主要为呼吸系统和生殖系统出血、淤血,大量嗜异性白细胞浸润等。开产后spf鸡感染大肠杆菌和/或鸡杆菌后均出现急性死亡,剖检可见心包炎、肝周炎及腹膜炎症状;呼吸系统出现严重的组织学病变。 5.混合感染对鸡群引起的病理损伤比单一感染大肠杆菌或鸡杆菌严重,鸡杆菌单因子仅影响鸡群产蛋量和产蛋质量,不引起鸡群的死亡;证实了鸡杆菌与大肠杆菌有一定的协同作用。本项研究在国内外首次利用鸡杆菌人工感染spf蛋鸡,并与自然感染病例进行了比较病理学研究。对鸡杆菌病的流行病学调查和鉴别诊断有重要的参考价值,并具有重要的学术意义和实用价值。

关键词：鸡杆菌输卵管囊肿 PCR FISH 自然病例人工感染 spf蛋鸡病理组织学

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