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艾迪注射液对肺癌spc-a-1细胞的增殖抑制作用及其机制

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中成药 2015年第3期37卷 630-633页

作者：陈军武延庆姚莉兰州大学第二医院药学部甘肃兰州730030

目的研究艾迪注射液对肺癌spc-a-1细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法采用巯基罗丹明B(SRB)法检测艾迪注射液对肺癌spc-a-1细胞的抑制率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞核形态的变化,免疫印迹法(Wes... 详细信息

目的研究艾迪注射液对肺癌spc-a-1细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法采用巯基罗丹明B(SRB)法检测艾迪注射液对肺癌spc-a-1细胞的抑制率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞核形态的变化,免疫印迹法(Western blot)检测ERK1/2磷酸化,caspase-9及caspase-3的表达。结果艾迪注射液作用24h和48 h均对肺癌spc-a-1细胞增殖具有显著的抑制作用(P1,P1);与对照组相比,艾迪注射液作用48h后G2/M期细胞比例增加(P1),G0/G1期和S期细胞比例下降(P1,P1);同时细胞中ERK1/2磷酸化水平降低(P1),caspase-9及caspase-3表达增强(Pspc-a-1细胞增殖,其机制与降低ERK1/2磷酸化水平和增加caspases-9及caspase-3活性有关。

关键词：艾迪注射液 spc-a-1 周期凋亡 ERK1/2 caspase

白花蛇舌草提取液诱导人肺癌spc-a-1细胞凋亡的实验研究

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白花蛇舌草提取液诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的实验研究

作者：陈丽萍江西医学院

学位级别：硕士

目的:白花蛇舌草为茜草科一年生草本植物,具有清热解毒、活血化瘀、利尿通淋等功能。现代研究表明,白花蛇舌草主要化学成分有熊果酸、免疫多糖、乌索酸、白花蛇舌草素等,这些主要的有效成分具有增强免疫活性和抗肿瘤活性。临床观察发现... 详细信息

目的:白花蛇舌草为茜草科一年生草本植物,具有清热解毒、活血化瘀、利尿通淋等功能。现代研究表明,白花蛇舌草主要化学成分有熊果酸、免疫多糖、乌索酸、白花蛇舌草素等,这些主要的有效成分具有增强免疫活性和抗肿瘤活性。临床观察发现白花砣舌草对肺癌疗效显著。原癌基因bcl-2 是最重要的抑制凋亡基因,其基因表达产物是一种相对分子量为26x10 的蛋白,存在于线粒体膜、核膜和内质网膜上。该基因能抑制细胞凋亡,使细胞长期存活,促使细胞内某些癌基因活化,产生恶性细胞克隆。本研究探讨中药白花蛇舌草提取液诱导人肺癌spc-a-1 细胞凋亡的作用及初步作用机制。方法:1.细胞增殖实验:测定细胞吸光值,观察白花蛇舌草提取液对spc-a-1 细胞增殖的影响。2.倒置显微镜观察:经白花蛇舌草提取液和顺铂处理48 小时的spc-a-1 细胞直接置于倒置镜下观察细胞形态。3.荧光显微镜观察:观察在25mg/ml、50mg/ml 白花蛇舌草提取液和DDP 作用spc-a-1 细胞48 小时后细胞核染色后的形态。*** 琼脂糖凝胶电泳:用DNA 琼脂糖凝胶电泳检测经不同浓度白花蛇舌草提取液和DDP 作用spc-a-1 细胞48 小时后,细胞DNA 断裂的情况(DNA 梯状条带)。5.流式细胞仪检测:用流式细胞仪检测细胞凋亡率。6.免疫组化:以不同浓度(12.5、25、50 mg/ml)白花蛇舌草提取液和DDP 作用于spc-a-1 细胞48 小时后,检测bcl-2 基因的表达。结果:1.白花蛇舌草提取液能抑制spc-a-1 细胞的生长,其效果与白花蛇舌草的浓度和作用时间相关。2.倒置镜下, spc-a-1 细胞出现细胞凋亡早期形态学改变。3.荧光显微镜观察到染色质凝聚或断裂等凋亡细胞

关键词：白花蛇舌草凋亡 spc-a-1 细胞 bcl-2 基因

转染自杀基因pCEAcd-tk的spc-a-1细胞的死亡机制

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中山医科大学学报 2000年第2期21卷 120-122页

作者：郭语彬伍新尧骆晓枫李芳徐平何光耀中山医科大学生化教研室中山医科大学法医学系广东广州510089

【目的】探讨自杀基因 pCEAcd tk/前体药物体系旁观者效应的细胞死亡机制。【方法】提取质粒pCEAcd tk ,转染到肺癌细胞株spc A 1中 ,与未转染的细胞按 2∶8的比例混合后加到 96孔培养板中 (每孔 3× 10 3 ) ,加前体药物 5 FC(5 μmol... 详细信息

【目的】探讨自杀基因 pCEAcd tk/前体药物体系旁观者效应的细胞死亡机制。【方法】提取质粒pCEAcd tk ,转染到肺癌细胞株spc A 1中 ,与未转染的细胞按 2∶8的比例混合后加到 96孔培养板中 (每孔 3× 10 3 ) ,加前体药物 5 FC(5 μmol/L)和GCV(10 μmol/L)孵育 5d后 ,MTT法测定细胞存活率而估计旁观者效应。取处理后的细胞 ,提取DNA ,琼脂糖凝胶电泳 ;Hoechst染色后荧光显微镜观察及碘化丙啶 (PI)染色 ,流式细胞仪分析细胞周期。【结果】①spc A 1细胞株在转染了pCEAcd tk体系后加前体药物存在明显的旁观者效应 ;②处理细胞的基因组DNA琼脂糖凝胶电泳呈涂布状 ;③处理细胞用荧光显微镜观察到形状变大 ,无凋亡小体形成 ;④流式细胞仪分析到细胞周期发生改变。【结论】spc A 1细胞在转染了pCEAcd tk后存在旁观者效应 ,这种旁观者效应引起的细胞死亡是一种坏死。

关键词：自杀基因旁观者效应 pcEAcd-tk spc-a-1 肿瘤

体外人肺腺癌细胞(spc-a-1)超微结构的动态变化

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分子细胞生物学报 1982年第3期 113-118+120-125页

作者：叶秀珍,朱德厚,苏建中中国科学院上海细胞生物学研究所中国科学院上海细胞生物学研究所上海市胸科医院

本文对体外培养的人肺腺癌细胞(SP-C-A-l)进行了传代周期1—5天的超微结构观察。从第49、61、68和84代细胞的观察结果表明,传代培养5天过程中,细胞的超微结构发生明显变化。主要表现在胞质内粘液颗粒的数量随着细胞进入对数生长期(3—4... 详细信息

本文对体外培养的人肺腺癌细胞(SP-C-A-l)进行了传代周期1—5天的超微结构观察。从第49、61、68和84代细胞的观察结果表明,传代培养5天过程中,细胞的超微结构发生明显变化。主要表现在胞质内粘液颗粒的数量随着细胞进入对数生长期(3—4天)逐渐增多,并有粘液在异常的部位(变性的线粒体)积聚;与此同时,线粒体的数量相应增加,内部结构出现明显改变。当细胞生长活动处于相对稳定阶段(1—2天和5天),粘液颗粒和变性的线粒体明显减少。细胞的高尔基复合体不发达以及正常形态的粗面内质网少的情况,在传代5天内变化不大,提示该系腺癌细胞粘液颗粒的形成与正常的粘液腺细胞不尽相同。结合细胞内有肺泡Ⅱ型上皮细胞特有的板层体的存在,文中进一步讨论了SP-C-A-l细胞系可能来源于人的细支气管上皮细胞在细胞癌变过程中发生粘液化生,而使细胞具有合成和分泌粘液的功能。

关键词：超微结构对数生长期内质网生长指数期 spc-a-1 粒线体线粒体细胞癌变肺腺癌细胞

人体肺腺癌细胞系——spc-a-1的建立及其生物学特性

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中国科学:化学 1982年第10期 913-921页

作者：吴善芳苏建中王恩忠徐蕙萱叶庆炜徐昌文陈瑞铭叶秀珍朱德厚杨正洪中国科学院上海细胞生物学研究所上海市胸科医院

从一例男性原发性肺腺癌患者手术中,取得胸膜转移结节,经离体培养建成细胞系,定名为:spc-a-1。对本系细胞进行生物学特性的观察分析的结果是:细胞群体的倍增时间约30小时,细胞形态以多形性上皮样细胞为主。在电子显微镜下,细胞表面具多... 详细信息

从一例男性原发性肺腺癌患者手术中,取得胸膜转移结节,经离体培养建成细胞系,定名为:spc-a-1。对本系细胞进行生物学特性的观察分析的结果是:细胞群体的倍增时间约30小时,细胞形态以多形性上皮样细胞为主。在电子显微镜下,细胞表面具多量微绒毛,细胞核形态不规则,胞质内有粘液性分泌颗粒和类似于肺泡Ⅱ型上皮细胞的板层体,张力原纤维束以及细胞间的桥粒结构。细胞的染色体众数范围为75—80,其中均有一对异常长的具有亚中着丝点的染色体。动物异种移植形成恶性肿瘤结节,其组织结构与该病例的临床肺腺癌标本相似。PAS和粘液卡红染色反应阳性。以上特性表明:本细胞系是一个人体原发性肺腺癌细胞系。

关键词：肺腺癌细胞系微绒毛原发性电子显微镜电镜细胞表面 spc-a-1 移植术(医学) 异种移植生物学特性

藤黄酸诱导spc-a-1肺腺癌细胞凋亡机制的探讨

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实用临床医药杂志 2009年第2期13卷 44-47页

作者：张洪明朱晓莉陈保安王振中肖伟林勇东南大学附属中大医院呼吸科江苏南京221002 东南大学附属中大医院血液肿瘤科江苏南京221002 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222000

目的研究藤黄酸(GA)对spc-a-1肺腺癌细胞的生长抑制作用及诱导肺癌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法应用改良的MTT法及流式细胞术分别检测GA对spc-a-1的生长抑制作用及诱导肺癌细胞凋亡的作用,并通过Western-blotting检测不同浓度的GA... 详细信息

目的研究藤黄酸(GA)对spc-a-1肺腺癌细胞的生长抑制作用及诱导肺癌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法应用改良的MTT法及流式细胞术分别检测GA对spc-a-1的生长抑制作用及诱导肺癌细胞凋亡的作用,并通过Western-blotting检测不同浓度的GA作用spc-a-1细胞后Caspase9、Caspase10及p53蛋白表达的变化。结果GA对spc-a-1细胞有明显的生长抑制作用,GA对其有显著的促凋亡作用。Caspase9、Caspase10及p53都参与了GA诱导的肺腺癌细胞凋亡,且随着GA浓度的增大,Caspase9、Caspase10及p53蛋白的表达均上调。结论GA对spc-a-1有明显的生长抑制作用,具有显著的促spc-a-1肺腺癌细胞凋亡作用,其分子机制可能与上调凋亡起始酶Caspase9、Caspase10及促凋亡蛋白p53的表达有关。

关键词：藤黄酸 spc-a-1 Caspase10 p53 凋亡

白花蛇舌草提取液诱导人肺癌spc-a-1细胞凋亡的实验研究

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江西中医学院学报 2005年第6期17卷 53-55页

作者：陈丽萍杨香生韦星万福生江西省新余市人民医院肿瘤科新余338025 江西医学院第一附属医院中医科南昌330006 江西医学院生物化学与分子生物学教研室南昌330006

目的:探讨中药白花蛇舌草提取液(HDE)诱导人肺癌spc-a-1细胞凋亡的作用及初步作用机制。方法:MTT法检测HDE对人肺癌spc-a-1细胞生长的影响;采用倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态变化;用DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂的情况(DNA梯状条... 详细信息

目的:探讨中药白花蛇舌草提取液(HDE)诱导人肺癌spc-a-1细胞凋亡的作用及初步作用机制。方法:MTT法检测HDE对人肺癌spc-a-1细胞生长的影响;采用倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态变化;用DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂的情况(DNA梯状条带);用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用免疫组化分析bcl-2基因在spc-a-1细胞中的表达。结果:HDE抑制spc-a-1细胞的生长,其效果与白花蛇舌草的浓度和作用时间相关;倒置、荧光镜下spc-a-1细胞出现细胞凋亡早期形态学改变;琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“ladder”;流式检测到凋亡峰,且凋亡率呈浓度依赖性;免疫组化结果提示HDE能使spc-a-1细胞bcl-2蛋白表达降低。结论:一定浓度的HDE对spc-a-1细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与相关基因bcl-2的调控有关。

关键词：白花蛇舌草细胞凋亡肺癌 spc-a-1 bcl-2基因

顺铂与培美曲塞对肺癌A549及spc-a-1细胞作用的研究

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中外医学研究 2013年第3期11卷 148-149页

作者：王燕孙晓东王珺龚坚余明华湖北医药学院基础医学研究所湖北十堰442000

目的:研究顺铂(DDP)与培美曲塞对体外培养的人肺癌A549及spc-a-1细胞增殖活力的影响。方法:分别用不同浓度的DDP(1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)作用细胞株A549及spc-a-1细胞,DDP5μg/ml联合培美曲塞10mmol/L作... 详细信息

目的:研究顺铂(DDP)与培美曲塞对体外培养的人肺癌A549及spc-a-1细胞增殖活力的影响。方法:分别用不同浓度的DDP(1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)作用细胞株A549及spc-a-1细胞,DDP5μg/ml联合培美曲塞10mmol/L作用细胞株A549及spc-a-1细胞;48h后用MTT法测细胞增殖,并按细胞的抑制率(100%)=(1-实验组吸光度/阳性对照组吸光度)×100%计算不同浓度DDP及DDP(5μg/ml)与培美曲塞10mmol/L联用对细胞的抑制率,比较细胞抑制率的差异。结果:DDP(5μg/ml)联合培美曲塞10mmol/L处理A549细胞、spc-a-1细胞48h抑制率分别为(53.2200±0.0192)%、(73.7800±0.0171)%。DDP1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml处理A549细胞、spc-a-1细胞48h抑制率逐渐增高,20μg/ml时最高,分别为(49.4300±0.0403)%、64.8700±0.0280)%。结论:DDP(1.25～20μg/ml)明显抑制2株细胞的增殖,作用呈现浓度依赖性。而DDP(5μg/ml)与培美曲塞10mmol/L联合对spc-a-1细胞的增殖抑制更为明显。

关键词：顺铂培美曲塞 A549 spc-a-1 细胞增殖抑制率

黄芪多糖对人肺腺上皮spc-a-1细胞增殖作用的研究

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四川生理科学杂志 2007年第4期29卷 152-154页

作者：谢蟪旭朱玲李精韬杨圣周黎明四川大学华西口腔医学院四川大学基础医学院药理教研室四川大学临床医学院医学技术系四川成都610041

目的:研究黄芪多糖(APS)对人肺腺上皮spc-a-1细胞的体外作用。方法:用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定在体外实验中黄芪多糖对人肺腺上皮spc-a-1细胞的增殖的影响。结果:体外低浓度(500mg/L～4.4185mg/L)APS对spc-a-1肺癌细胞无明显生长抑制... 详细信息

目的:研究黄芪多糖(APS)对人肺腺上皮spc-a-1细胞的体外作用。方法:用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定在体外实验中黄芪多糖对人肺腺上皮spc-a-1细胞的增殖的影响。结果:体外低浓度(500mg/L～4.4185mg/L)APS对spc-a-1肺癌细胞无明显生长抑制作用。结论:体外实验表明黄芪多糖对人肺腺上皮spc-a-1细胞可能无直接细胞毒效应。

关键词： MTT比色法黄芪多糖 spc-a-1