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非小细胞肺癌患者血清中sp70的检测及其临床意义

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非小细胞肺癌患者血清中SP70的检测及其临床意义

作者：彭蘡南京医科大学

学位级别：硕士

背景肺癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,其死亡率居于恶性肿瘤的首位,对人类健康和生命构成极大威胁。肺癌每年约致40万例患者死亡,但早期肺癌术后10年生存率可达到92%。因此,降低肺癌患者死亡率的关键在于早期诊断从而进行早期治疗。与... 详细信息

背景肺癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,其死亡率居于恶性肿瘤的首位,对人类健康和生命构成极大威胁。肺癌每年约致40万例患者死亡,但早期肺癌术后10年生存率可达到92%。因此,降低肺癌患者死亡率的关键在于早期诊断从而进行早期治疗。与影像学检查相比,肿瘤标志物的实验室检测更有希望实现肺癌的早期诊断,但迄今为止尚未能发现对肺癌具有高灵敏度和高特异度的标志物。本实验室前期以人肺腺癌细胞株spC-A1作为免疫原,成功制备并鉴定了一株抗人非小细胞肺癌单克隆抗体NJ001。利用间接免疫荧光和Western blot技术明确sp70的细胞定位,即非小细胞肺癌细胞的胞浆中和胞膜上均有表达;通过免疫组化等方法证明单抗NJ001相关靶抗原sp70具有较强的非小细胞肺癌组织细胞特异性。目的明确非小细胞肺癌患者血清中是否存在sp70,并评价血清中sp70蛋白能否成为早期诊断非小细胞肺癌的新型血清肿瘤标志物。方法应用Western blot方法对非小细胞肺癌患者和健康体检者的血清进行检测,明确非小细胞肺癌患者血清中是否存在sp70蛋白。以人肺腺癌细胞株spC-A1为抗原免疫新西兰兔,制备多克隆抗体;用抗spC-A1多克隆抗体包被微孔板,单克隆抗体NJ001作为第一抗体,辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG抗体为标记抗体,建立检测血清sp70的双抗体夹心ELISA法,优化实验条件并确定cut-off值。采用优化后的血清sp70双抗体夹心ELISA法对1089例临床样本的血清sp70抗原进行检测,包括479例经病理确诊的肺癌(306例肺腺癌、134例肺鳞癌和39例小细胞肺癌)、50例肺良性疾病、20例乳腺癌、20例胃癌、20例结肠癌患者及500例健康体检者。同时,利用电化学发光法检测常用的肺癌肿瘤标志物CEA、NSE和CYFRA21-1,与sp70的结果进行比较分析。结果通过Western blot检测发现单抗NJ001能与非小细胞肺癌患者血清中相关靶抗原sp70特异性结合,表明非小细胞肺癌患者血清中存在sp70蛋白。获得一株抗人spC-A1多克隆抗体,其效价为1:160000;以该多克隆抗体作为包被抗体,单抗NJ001和酶标记的羊抗鼠抗体分别作为一抗和标记抗体,成功建立了检测血清sp70的双抗体夹心ELISA法。包被抗体的最佳工作浓度为0.63μg/ml,单抗NJ001的最佳稀释度为1:4 000,包被抗体与靶抗原的最佳孵育时间为2h,最适反应温度为37℃。临床样本中血清sp70的双抗体夹心ELISA法检测结果显示,肺腺癌、肺鳞癌、小细胞肺癌和肺良性疾病组的阳性率分别为63.1%、59.7%、20.5%和18.0%,均显著高于健康体检组(8.8%,Psp70在非小细胞肺癌患者血清中的检出率显著高于其他类型肿瘤患者(乳腺癌25.0%、胃癌10.0%、结肠癌15.0%,Psp70总检出率显著高于肺癌常用标志物CEA、NSE和CYFRA21-1(40.7%、17.7%和37.5%);四项联合检测(sp70、CEA、NSE和CYFRA21-1)的阳性率显著高于三项(CEA、NSE和CYFRA21-1)联合检测(约提高20%)。结论非小细胞肺癌患者血清中sp70具有较高的阳性检出率;与常用的肺癌标志物CEA、NSE和CYFRA21-1比较,sp70的阳性检出率最高,且在早期非小细胞肺癌患者的血清中sp70即具有很高的阳性检出率。证明sp70是潜在的用于早期诊断非小细胞肺癌的新型血清肿瘤标志物。

关键词：非小细胞肺癌血清肿瘤标志物酶联免疫吸附试验 sp70

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sp70火炮的夭折

现代兵器 1988年第1期 17-20页

作者：徐少凡

“以良好的愿望开始,以走向失败而告终”。当sp70 155毫米自行炮项目宣告结束时,这句英语谚语作为其墓志铭是再恰当不过了。1987年1月14日,sp70项目宣告暂停。15年来,三个北约国家为了研制一种新的自行加榴炮而努力奋斗,但是,在花费了约... 详细信息

“以良好的愿望开始,以走向失败而告终”。当sp70 155毫米自行炮项目宣告结束时,这句英语谚语作为其墓志铭是再恰当不过了。1987年1月14日,sp70项目宣告暂停。15年来,三个北约国家为了研制一种新的自行加榴炮而努力奋斗,但是,在花费了约合4亿美元的费用后,它们终于未能如愿以偿。

关键词：输弹系统重新设计性能指标炮塔英国大不列颠及北爱尔兰联合王国自行火炮自行炮常规武器火炮 sp70

sp70检测在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的临床应用价值

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中国实验诊断学 2014年第5期18卷 746-748页

作者：邓石雄刘映云李尔凡白艳增城市人民医院检验科广东增城511300

目的探讨sp70检测在良恶性胸腔积液鉴别中的临床应用价值。方法选取2011年4月至2011年12月在我院就诊并经临床明确诊断为良性胸腔积液和恶性胸腔积液患者各90例,采集患者胸腔积液标本,检测sp70、CEA、Cyfra21-1和NSE水平,并进行比较分... 详细信息

目的探讨sp70检测在良恶性胸腔积液鉴别中的临床应用价值。方法选取2011年4月至2011年12月在我院就诊并经临床明确诊断为良性胸腔积液和恶性胸腔积液患者各90例,采集患者胸腔积液标本,检测sp70、CEA、Cyfra21-1和NSE水平,并进行比较分析。结果恶性胸腔积液组患者sp70、CEA、CYFRA21-1检测阳性率分别为72.2%、58.9%和53.3%,显著高于良性胸腔积液组的10.0%、13.3%和22.2%(P0.05)。恶性胸腔积液组sp70敏感度、特异度和符合率分别为72.2%、89.2%和81.6%,CEA敏感度、特异度和符合率分别为58.9%、84.9%和74.2%,Cyfra21-1敏感度、特异度和符合率分别为53.3%、67.1%和58.4%,NSE敏感度、特异度和符合率分别为31.1%、78.0%和50.2%。两组患者血清sp70检测率分别为5.6%、6.7%,差异无统计学意义(P>0.05),而胸腔积液sp70检测率分别为10.0%、72.2%,差异具有统计学意义(Psp70对良、恶性胸腔积液的鉴别诊断具有着重要的临床价值和潜在的辅助作用,可为相关疾病的早期诊断和治疗提供有效信息。

关键词： sp70 良恶性胸腔积液癌胚抗原酶联免疫吸附法检测

sp70在乳腺肿瘤患者血清中的检测及其临床意义

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齐齐哈尔医学院学报 2019年第11期40卷 1382-1383页

作者：李娜刘琳朱立强江涛赵利徐州医科大学医学技术学院江苏徐州221000 徐州医科大学附属医院检验科江苏徐州221000 徐州市肿瘤医院检验科江苏徐州221000

目的初步探讨新型肿瘤标志物sp70在乳腺良恶性肿瘤患者血清中检测的临床意义。方法运用双抗体酶联免疫吸附法检测42例乳腺癌患者(乳腺癌组)、16例乳腺良性肿瘤患者(乳腺良性肿瘤组)和14名正常女性体检患者(健康体检组)血清中sp70的含量... 详细信息

目的初步探讨新型肿瘤标志物sp70在乳腺良恶性肿瘤患者血清中检测的临床意义。方法运用双抗体酶联免疫吸附法检测42例乳腺癌患者(乳腺癌组)、16例乳腺良性肿瘤患者(乳腺良性肿瘤组)和14名正常女性体检患者(健康体检组)血清中sp70的含量。结果乳腺癌、乳腺良性肿瘤患者血清中sp70的含量高于健康体检女性,差异具有显著统计学意义(Psp70的浓度差异无统计学意义(P>0.05)。结论新型肿瘤标志物sp70在乳腺良恶性肿瘤患者血清中的含量高于健康对照组,具有一定的临床意义,但无法鉴别诊断乳腺肿瘤的良、恶性。

关键词： sp70 乳腺癌肿瘤标志物诊断

液基细胞学、肿瘤标志物sp70联合检测对肺腺癌转移胸腔积液的诊断价值

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临床与病理杂志 2020年第10期40卷 2529-2533页

作者：钱同樊昱彤金玉朱立强顾兵马萍徐州医科大学附属徐州儿童医院检验科江苏徐州221006 徐州医科大学医学技术学院江苏徐州221004 徐州医科大学附属医院检验科江苏徐州221002

目的:探讨液基细胞学与肿瘤标志物sp70联合检测对肺腺癌转移胸腔积液的诊断价值。方法:回顾性分析徐州医科大学附属医院2018年11月至2019年3月收治肺腺癌转移胸腔积液27例和非癌性胸腔积液12例,收集放化疗前患者的胸腔积液,采用美国Sure... 详细信息

目的:探讨液基细胞学与肿瘤标志物sp70联合检测对肺腺癌转移胸腔积液的诊断价值。方法:回顾性分析徐州医科大学附属医院2018年11月至2019年3月收治肺腺癌转移胸腔积液27例和非癌性胸腔积液12例,收集放化疗前患者的胸腔积液,采用美国SurePathTM PrepStain全自动液基薄层细胞制片染片机(BD TriPath)及相关耗材制备液基薄片,巴氏染色用于细胞学诊断,同时采用双抗体夹心ELISA法对39份胸腔积液标本上清进行sp70检测。统计分析液基细胞学联合sp70检测对恶性胸腔积液诊断的敏感性、特异性、符合率。结果:以27份癌性胸腔积液和12份非癌性胸腔积液sp70的ELISA检测结果作ROC曲线,分析得出胸腔积液sp70>9.73 ng/mL,可以帮助预测肺腺癌转移胸腔积液,AUC为0.824,采用该截断值诊断肺腺癌转移胸腔积液的敏感性、特异性分别为70.4%和91.7%。液基细胞学与肿瘤标志物sp70联合检测的符合率为89.7%,灵敏度为81.4%,均高于单独液基细胞学的检测,差异有统计学意义(Psp70有助于提高肺腺癌转移胸腔积液的诊断。

关键词： sp70 液基细胞学腺癌肺癌胸腔积液诊断

肠道病毒71型中和表位肽sp55、sp70及VP2-28在人血清中的抗体滴度特征研究

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吉林医学 2018年第12期39卷 2205-2207页

作者：刘倩彭琪谢明玉蒋再学陆小梅赖茅陈秀英东莞市儿科研究所广东东莞523325 广东药科大学附属第一医院中心实验室广东广州510080 东莞市儿童医院广东东莞523325

目的:通过肠道病毒71型(EV71)阳性患者抗血清对动物模型的中和表位肽sp55、sp70及VP2-28进行评价,研究动物中确定的表位肽与人抗血清的反应特征。方法:采用体外微量中和实验的方法,筛选高中和抗体滴度的患儿血清共13个样本,其中2 048倍... 详细信息

目的:通过肠道病毒71型(EV71)阳性患者抗血清对动物模型的中和表位肽sp55、sp70及VP2-28进行评价,研究动物中确定的表位肽与人抗血清的反应特征。方法:采用体外微量中和实验的方法,筛选高中和抗体滴度的患儿血清共13个样本,其中2 048倍样本8个,4 096倍样本4个,8 192倍样本1个。使用MEGA5. 0软件对目标中和表位肽sp55、sp70和VP2-28进行序列比对,确定最终使用序列。ELISA分析3个中和表位肽分别在N端和C端偶联BSA的情况下,其在抗血清中的抗体滴度。结果:EV71的中和抗体水平会随着EV71总抗体水平的升高而升高。sp55肽无论在N端还是C端偶联牛血清白蛋白BSA都具体较高的抗体滴度,但sp55肽C端偶联BSA的抗体滴度随着抗血清的中和滴度的升高而升高。VP2-28肽N端偶联BSA的抗体滴度普遍高于C端偶联。sp70肽在人抗血清中的抗体滴度普遍不高,其中N端偶联的sp70肽好于C端偶联。结论:sp55肽和VP2-28肽在人抗血清中具有较高的抗体滴度,而不同方向的偶联对于中和表位肽具有很大影响。

关键词：肠道病毒动物模型 sp55 sp70 VP2-28

sp70型155毫米自行榴弹炮的自动输弹机

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现代兵器 1982年第3期 51-51页

作者：茅金丽

由英国、西德和意大利三国联合研制的sp70型155毫米自行榴弹炮将采用一种自动输弹装置。这种自动输弹装置由英国负责研制,它包括以下几个部件:1.供弹机——用来将弹丸装上车;2.升降机——用来将弹丸升到弹匣

关键词：自行榴弹炮供弹机弹丸装置输弹 sp70

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sp70型自行榴弹炮发展计划推迟

现代兵器 1982年第12期 39-39页

作者：崔红

sp70型155毫米自行榴弹炮是由英国、西德和意大利三国联合研制的一种现代化自行炮。原计划在八十年代初服役,现在由于成本增加,使原来的装备计划不得不推迟到1988年。此外,由于一些技术问题在结构上作了一些改变,使得火炮的采购价格升... 详细信息

sp70型155毫米自行榴弹炮是由英国、西德和意大利三国联合研制的一种现代化自行炮。原计划在八十年代初服役,现在由于成本增加,使原来的装备计划不得不推迟到1988年。此外,由于一些技术问题在结构上作了一些改变,使得火炮的采购价格升到80～90万英镑。该炮的主要优点之一是射速快,10秒钟可

关键词：自行榴弹炮 sp70 自行炮自行火炮

脑淋巴引流阻滞加重蛛网膜下腔出血后脑脊液所致海马神经元凋亡

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生理学报 2009年第4期61卷 317-323页

作者：孙保亮贾丽丽王轩杨明峰张颜波袁慧山东省高校脑微循环重点实验室、泰山医学院附属医院神经内科泰安271000 济南市第六人民医院神经内科济南250200

本文旨在探讨脑淋巴引流系统在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后神经元损伤中的作用。分别建立兔SAH、SAH+脑淋巴引流阻滞(cerebral lymphatic blockage,CLB)模型,于SAH模型建立后5d抽取脑脊液,加入培养的大鼠海马神经元... 详细信息

本文旨在探讨脑淋巴引流系统在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后神经元损伤中的作用。分别建立兔SAH、SAH+脑淋巴引流阻滞(cerebral lymphatic blockage,CLB)模型,于SAH模型建立后5d抽取脑脊液,加入培养的大鼠海马神经元中,随机将神经元分为空白对照组、正常脑脊液组、SAH组、SAH+CLB组,分别于培养0.5h、1h、2h、4h后,检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出率,流式细胞术检测神经元凋亡,免疫组织化学法检测细胞凋亡蛋白Bax、Hsp70的表达。结果显示:正常脑脊液对神经元LDH漏出率无影响,SAH组和SAH+CLB组脑脊液使神经元LDH漏出率增加,以SAH+CLB组更为显著;正常脑脊液没有引起神经元凋亡,SAH组出现神经元凋亡,SAH+CLB组神经元凋亡更为严重。在SAH组和SAH+CLB组均检测到Bax及Hsp70蛋白表达;Bax蛋白表达在SAH+CLB组大于SAH组,且呈时间依赖性增强;在0.5h和1h,SAH+CLB组Hsp70蛋白表达高于SAH组,而在2h和4h则表达减弱,SAH+CLB组表达高峰(1h)早于SAH组(2h)。以上结果表明,CLB加重SAH脑脊液对神经元的损伤,提示脑淋巴引流系统在SAH后可能起到一定的内源性保护作用。

关键词：蛛网膜下腔出血脑淋巴引流神经元凋亡 B ax H sp70