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Biorhythms and the Biological Clock Involvement of Melatonin and the Pineal Gland in Life and Disease

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Biomedical and Environmental Sciences 1995年第2期8卷 90-105页

作者： ISAACNIR M.D Ph.D DepartmentofPharmacology HebrewUniversity-HadassahMedicalSchoolP.O.B.12065JerusalemIsraelDepartmentofPharmacologyHebrewUniversity-HadassahMedicalSchoolP.O.B.12065JerusalemIsraelDepartmentofPharmacologyHebrewUniversity-HadassahMedicalSchoolP.O.B

Humanbeingsliveinanenvironmentoflightanddarknessandatvarioustemper-atures.Thusweaskourselves'dothesedaiIyandseasonalenvironmentalchangeshaveanyeffectsonourbodilyandmentalfunctionsandhowdoesthelivingorganismadaptitselftothem?Areoursleep-wakerhythmscasualcircadianchronobiologicalevents,ordoweresIX)ndandreassessourbiologicalfunctiontothenaturalIight/darkcycle?Moreover,couldsomedisordersinourbOdybeinducedbyshiftingthephotoperiod,especiallytoitsextIemesofcontinuousIightordarkness?DoesthebodyPossessacircadianpace...

关键词： snat SAD Biorhythms and the Biological Clock Involvement of Melatonin and the Pineal Gland in Life and Disease

拟南芥褪黑素合成基因snat在盐应答中的功能探究

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拟南芥褪黑素合成基因SNAT在盐应答中的功能探究

作者：李帜奇东北林业大学

学位级别：硕士

土壤盐渍化影响作物生长、制约农业发展,威胁全球粮食安全,是人类亟待解决的重大问题。探究植物响应盐胁迫机制,挖掘耐盐基因是当下研究的重点,虽然目前植物耐盐响应调控通路及分子机制探索已经取得了很大进展,但仍有待进一步完善和补充... 详细信息

土壤盐渍化影响作物生长、制约农业发展,威胁全球粮食安全,是人类亟待解决的重大问题。探究植物响应盐胁迫机制,挖掘耐盐基因是当下研究的重点,虽然目前植物耐盐响应调控通路及分子机制探索已经取得了很大进展,但仍有待进一步完善和补充,其中植物微量激素及其合成响应盐胁迫的机制尚未深入研究。褪黑素作为一种微量激素,其高效的活性氧清除能力被逐渐重视,目前人们对褪黑素提高植物抗盐性的研究多集中在外施后的生长情况和生理生化观察,缺乏从植物内源褪黑素合成对耐盐适应的影响和褪黑素耐盐作用机制及其关联生理代谢途径的相关研究。5-羟色胺-N-乙酰转移酶snat作为褪黑素生物合成途径中的重要合成酶,其编码基因snat调控植物耐盐性的机制鲜有报道。因此,本文通过对褪黑素合成基因snat缺失突变体的褪黑素含量、表型、生理监测以及结合转录组测序分析,试图初步探究内源褪黑素及其合成基因snat在盐应答中的功能,主要研究结果如下:（1）通过内源褪黑素的测定分析发现,盐胁迫下拟南芥植株中褪黑素合成增加,且褪黑素合成相关酶的编码基因显著上调表达,初步表明微量激素褪黑素参与盐胁迫响应。基于此获得了褪黑素合成基因snat1、snat2的功能缺失突变体并进行褪黑素含量测定,结果显示snat1snat2双突变体内源褪黑素明显减少,显著影响褪黑素内源合成。（2）对snat1snat2双突变体进行盐胁迫应答表型观察,发现与野生型Col-0相比,snat1snat2双突变体出现叶片略微泛黄、根长变短、生物量降低,萌发率及绿化率和存活率显著下降等盐敏感表型。生理监测结果发现盐胁迫下snat1snat2双突变体相对含水量降低、Na/K失调、活性氧积累增加,叶片光保护能力下降。从生长表型和生理响应方面,证明了褪黑素合成基因snat在植物响应盐胁迫具有重要作用。（3）为探明内源褪黑素可能影响的耐盐生理代谢途径,通过对盐处理72 h的野生型及snat1snat2双突变体进行转录组高通量测序分析,发现参与多条生物学路径的相关基因在snat功能缺失后其表达发生显著变化,对受snat影响的盐应答基因进行功能富集分析发现,多数基因与植物激素生长素合成及相关信号通路密切相关。通过snat1snat2中生长素的含量检测,以及外源NAA、IAA处理后对snat1snat2盐敏感生长表型的恢复,证明了生长素通路可能受snat和褪黑素调节。综上所述,本研究对褪黑素合成基因snat在盐应答中的生物学功能进行了初步探究,阐述了内源褪黑素在植物应答盐胁迫中的生理功能和潜在作用机制,为深入了解微量激素调控植物耐盐的分子机制提供理论依据。

关键词：拟南芥盐胁迫褪黑素褪黑素合成基因 snat

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青稞褪黑素合成酶的表达及生物学特性研究

青稞褪黑素合成酶的表达及生物学特性研究

作者：王炳生安徽工程大学

学位级别：硕士

青稞作为一种抗逆性强的禾本类植物,因其营养价值丰富且具有独特的生物活性,愈发受到农、工业关注。褪黑素不仅能够促进种子萌发和植物生长发育,还能够作为抗氧化剂,维持植物细胞活性氧动态平衡。当前,国内外关于青稞中内源褪黑素合成... 详细信息

青稞作为一种抗逆性强的禾本类植物,因其营养价值丰富且具有独特的生物活性,愈发受到农、工业关注。褪黑素不仅能够促进种子萌发和植物生长发育,还能够作为抗氧化剂,维持植物细胞活性氧动态平衡。当前,国内外关于青稞中内源褪黑素合成路径方面的研究极少,因此,本实验以“藏青2000”为材料,研究了盐胁迫条件下不同萌发时期青稞内源褪黑素和其他代谢产物含量的变化,通过转录组学数据对青稞褪黑素合成酶基因进行初步的筛选,并且利用q RT-PCR技术分析盐胁迫条件下褪黑素合成基因的表达水平,进一步探究青稞内源褪黑素含量与褪黑素合成基因之间的关联;此外还克隆了青稞褪黑素合成途径关键酶5-羟色胺-N-乙酰转移酶(snat)基因和咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT)基因的核苷酸序列,构建表达载体导入大肠杆菌中,IPTG诱导产生重组蛋白,初步研究了青稞snat基因和COMT基因酶学特性。主要研究结果如下:1.发现盐胁迫条件下青稞种子中总多酚类物质、总黄酮类物质、木质素和褪黑素含量显著增加。随着萌发时间的延长青稞中总多酚类物质、总黄酮类物质和褪黑素的含量先上升后下降,在第三天达到最大值,分别为8.38 mg/g、1.982 mg/g和13.702 ng/g。盐胁迫条件下青稞褪黑素、总多酚类物质、总黄酮类物质和木质素等抗逆物质含量均显著上升,并且随着萌发时间的延长变化趋势一致,褪黑素不仅能够作为抗氧化剂直接清除体内活性氧,还能作为信号分子提高其他代谢产物含量来维持植物的正常生长,提高青稞对盐胁迫的抵抗。2.通过转录组数据分析显示盐胁迫条件下超过20%的基因发生显著性变化,Gene Ontology(GO)分析发现盐胁迫条件下DEGs主要参与抗氧化胁迫、渗透调节、蛋白质-DNA复合体、辅助因子结合等过程。Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)富集分析发现DEGs主要富集在苯丙烷合成途径、谷胱甘肽代谢、色氨酸代谢途径和光合作用等通路,说明青稞会通过提高自身抗逆通路相关基因的表达来增强对盐胁迫对植物体带来的不利影响。并且根据转录组学数据筛选出青稞褪黑素合成路径11个关键基因,利用荧光定量PCR技术分析了两个差异显著基因不同条件下表达水平变化,发现青稞褪黑素合成路径关键基因变化趋势与青稞内源褪黑素含量变化趋势基本一致,推测盐胁迫条件下青稞通过提高合成路径相关基因的表达量,从而提高褪黑素的含量,抵抗盐胁迫带来的不利影响。其中COMT酶作为一种多底物酶,不仅能够参与褪黑素的合成,还能作为苯丙烷代谢途径关键酶生成总多酚类物质、总黄酮类物质和木质素,说明褪黑素能够与总多酚类物质、总黄酮类物质和木质素共同提高青稞对盐胁迫的抵抗。3.本实验筛选并克隆了青稞snat基因序列,全长为729 bp,共编码243个氨基酸,具有乙酰基转移酶(GNAT)功能结构域,为亲水性不稳定蛋白,与其他禾本植物snat的氨基酸序列的相似性较高。构建表达载体导入大肠杆菌,对表达条件优化获得青稞snat蛋白。体外酶活测试表明,青稞snat蛋白具有N-乙酰基转移酶的活性,在体外能够以乙酰辅酶A和5-羟色胺为底物生成N乙酰-5-羟色胺。在55℃时,snat的酶活性最高,酶活随着底物浓度增加而增加,底物浓度和酶促反应速率呈双倒数曲线,K=371μm,V=4.5nmol/min/mg protein。4.克隆了青稞COMT全长CDS序列,其核苷酸序列全长1074 bp,共编码358个氨基酸,蛋白质分子量为38.7 k Da,N端不存在信号肽序列,12～355个氨基酸具有典型的II型氧甲基转移酶SAM结构域,S-腺苷-L-甲硫氨酸结合位点在第219位的半胱氨酸,酶反应位点在第260位的天冬氨酸。在35℃时,COMT的酶活性最高,随着底物血清素浓度的提高,COMT生成褪黑素的含量也呈梯度增加。底物浓度和酶促反应速率呈双倒数曲线,K=230μm,V=2.1 nmol/min/mg protein。

关键词：青稞褪黑素盐胁迫 snat COMT

Kud-da MAY BE INNOCENT! AN UR III LAWSUIT DEALING WITH SHEEP ROBBERY REVISED

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Journal of Ancient Civilizations 2001年第1期16卷 31-36页

作者： Magnus Widell IHAC

THE CALENDAR SYNCHRONIZATION AND INTERCALARY MONTHS IN UMMA,PUZRIS-DAGAN,NIPPUR,LAGAS AND UR DURING THE UR Ⅲ PERIOD

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Journal of Ancient Civilizations 2002年 113-134页

作者： Wu Yuhong, IHAC/Study Center of World History*

In my article in JAC 15,I discuss“the Mada calendar”of Puzri-Dagan of the UrⅢ period.This calendar started from the month iti-ma-d-k while its alternatecycle“the Akiti Calendar”started from the month iti-ki-ti(vi).The Akiticalendar was only used for three whole and two half years(ulgi 44’viii’-xii’,45’-47’,48’i’-vii’)during the Mada years of ulgi 45/i to ulgi 48/xii.It wasonly used by the main office of Puzri-Dagan.The Mada calendar was used from

关键词： La PERIOD THE CALENDAR SYNCHRONIZATION AND INTERCALARY MONTHS IN UMMA,PUZRIS-DAGAN,NIPPUR,LAGAS AND UR DURING THE UR AS PDT TRU UMI snat

THE CALENDAR SYNCHRONIZATION AND INTERCALARY MONTHS IN UMMA,PUZRIS-DAGAN,NIPPUR,LAGAS AND UR DURING THE UR Ⅲ PERIOD

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Journal of Ancient Civilizations 2002年第1期17卷 113-134页

作者： Wu Yuhong IHAC/Study Center of World History

In my article in JAC 15,I discuss“the Mada calendar”of Puzri-Dagan of the UrⅢ period.This calendar started from the month iti-ma-d-k while its alternatecycle“the Akiti Calendar”started from the month iti-ki-ti(vi).The Akiticalendar was only used for three whole and two half years(ulgi 44’viii’-xii',45’-47’,48’i’-vii’)during the Mada years of ulgi 45/i to ulgi 48/xii.It wasonly used by the main office of Puzri-Dagan.

关键词： La PERIOD THE CALENDAR SYNCHRONIZATION AND INTERCALARY MONTHS IN UMMA,PUZRIS-DAGAN,NIPPUR,LAGAS AND UR DURING THE UR AS PDT TRU UMI snat

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多链路管理中的负载均衡策略

南开大学学报（自然科学版） 2004年第4期37卷 59-63页

作者：王海英张建忠南开大学信息技术学院天津300071

企事业单位为了提高与因特网互联的速度和可靠性,通常设置多条链路与因特网互联.但是出现了某些链路负载过重,而另外一些负载过轻的问题,通过在多条链路的出口处增设一个链路均衡器可以实现各条链路中的负载均衡功能.本文提出链路负载... 详细信息

企事业单位为了提高与因特网互联的速度和可靠性,通常设置多条链路与因特网互联.但是出现了某些链路负载过重,而另外一些负载过轻的问题,通过在多条链路的出口处增设一个链路均衡器可以实现各条链路中的负载均衡功能.本文提出链路负载均衡技术,分析了链路负载均衡的特点,利用snat技术实现双向数据流的引导,提出计算链路负载的公式和正常状态随机法、最短路由最小负载法两个均衡算法.

关键词：负载链路均衡器 snat 负载均衡策略

褪黑素对棉花耐盐性的影响及相关基因Ghsnat34的功能研究

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褪黑素对棉花耐盐性的影响及相关基因GhSNAT34的功能研究

作者：张悦新郑州大学

学位级别：硕士

棉花作为一种经济作物,在生长发育的过程中经常会受到非生物胁迫的威胁。通过外源施加褪黑素(MT)和遗传转化MT合成基因提高MT浓度都可以减轻非生物胁迫的影响。已有研究报道,MT参与植物应对盐胁迫,但MT调控棉花应答盐胁迫的分子机制尚... 详细信息

棉花作为一种经济作物,在生长发育的过程中经常会受到非生物胁迫的威胁。通过外源施加褪黑素(MT)和遗传转化MT合成基因提高MT浓度都可以减轻非生物胁迫的影响。已有研究报道,MT参与植物应对盐胁迫,但MT调控棉花应答盐胁迫的分子机制尚不清楚。在本研究中,以棉花中9807为材料,利用植物生理学、生物信息学、分子生物学和基因组学等手段从内源和外源两个方向研究了褪黑素调控棉花耐盐性的分子功能。主要研究结果如下:1对三叶期的棉花幼苗进行不同浓度褪黑素(0、20、50、100、200μM)预处理,以0μM作为对照,用100 m M浓度的Na Cl溶液处理棉花幼苗。在盐胁迫处理四天时,20μM MT处理的棉花幼苗尽管子叶全部萎蔫脱落,但真叶只出现部分萎蔫且未死亡。为了探究内源褪黑素含量是否与棉花耐盐性有关,测定了两个棉花材料(中9807,GK50)三叶期幼苗内源褪黑素水平,发现耐盐性较好的中9807根和叶中的褪黑素含量均高于GK50。推测棉花的耐盐性可能与MT含量存在着一定的关系。同时,为了探究棉花内源MT是否参与到棉花抵御盐胁迫,对三叶期棉花幼苗盐处理,测定内源褪黑素含量,以清水处理作为对照,结果表明盐处理诱导了内源褪黑素含量的升高。总之,棉花褪黑素参与了棉花应对盐胁迫的抵御,与棉花耐盐性存在一定的关系。2利用三种处理:CK(对照)、S(100 m M Na Cl)和M-S(20μML褪黑素+100 m M Na Cl)研究MT对盐胁迫下棉花的保护作用,通过RNA-seq分析,在S和M-S处理之间,有786个显著差异表达基因(DEGs)(356个上调,430个下调)。MT处理改变了氧化还原相关基因的表达,受MT诱导的AP2、WRKY、NAC等转录因子可能在耐盐性中发挥重要作用,MT在棉花抵御盐胁迫的防御网络中协调其他植物激素,通过磷脂酰肌醇信号系统相关基因诱导信号分子应答盐胁迫。综合我们的结果,通过一条复杂调控网络去描述褪黑素在提高棉花耐盐性方面的分子作用,通过调节抗氧化系统、植物激素、转录因子、磷脂类代谢、信号分子多种机制提高棉花对盐胁迫的耐受性。3发现一个推定的5-羟色胺-N-乙酰转移酶(snat)基因GH＿D02G1113,通过整合陆地棉生snat基因家族成员的结构特征、系统发育、基因结构、表达模式以及非生物胁迫等因素,在全基因组中对陆地棉的snat所在家族进行了系统分析。系统发育分析表明,陆地棉全基因组共鉴定出63个snat基因,可分为5个亚类(亚类I-V)。各组snat成员多数具有相似的motif组成和基因结构特征。这些成员中有一半多的Gh snat成员含有gibberellin-responsive元件和Me JA-responsive元件,GA、Me JA可能是调控Gh snat家族的重要信号,参与非生物胁迫反应。利用本实验室内的RNA-seq数据研究Gh snat基因在冷、热、盐和PEG胁迫下的表达模式。在不同胁迫条件下,Gh snat基因的表达水平发生了变化,说明Gh snat成员参与了非生物胁迫的调控。4利用病毒诱导的基因沉默技术将褪黑素合成相关基因Gh snat34沉默,基因沉默植株内源褪黑素含量显著降低,植株活性氧清除系统和Ca信号转导降低,导致耐盐性降低。外源补充适量的褪黑素可以缓解盐胁迫对沉默植株带来的影响。说明棉花Gh snat34在调控内源褪黑素水平中发挥着重要的作用,通过调控棉花内源褪黑素含量来参与盐胁迫反应。

关键词：棉花盐胁迫褪黑素 snat 脂质代谢 Ca2+信号

snat:a fast SNP annotation tool for bovine

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Snat:a fast SNP annotation tool for bovine