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木香烃内酯对肝癌smmc-7721细胞凋亡的影响及其作用机制

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中国生物制品学杂志 2022年第10期35卷 1195-1199页

作者：刘丹张永慧何秀贞熊书马羚冯彬彬冯晓灵重庆三峡医药高等专科学校三峡库区道地药材开发利用重庆市重点实验室重庆404020

目的探讨木香烃内酯(costunolide,Cos)对肝癌smmc-7721细胞凋亡的影响及其作用机制。方法将smmc-7721细胞随机分为对照组、10、20、30μmol/L Cos剂量组。采用流式细胞术检测Cos对smmc-7721细胞凋亡的影响,Western blot检测smmc-7721... 详细信息

目的探讨木香烃内酯(costunolide,Cos)对肝癌smmc-7721细胞凋亡的影响及其作用机制。方法将smmc-7721细胞随机分为对照组、10、20、30μmol/L Cos剂量组。采用流式细胞术检测Cos对smmc-7721细胞凋亡的影响,Western blot检测smmc-7721细胞中凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase-3)及内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)通路相关蛋白(GRP78、CHOP、ATF4)的表达水平。结果 10、20和30μmol/L Cos剂量组smmc-7721细胞凋亡率(apoptosis rate,AR)均明显高于对照组(P smmc-7721细胞AR随剂量增加明显上升(P smmc-7721细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P 0.05);各组smmc-7721细胞中Caspase-3蛋白表达水平差异无统计学意义(P> 0.05);10、20μmol/L Cos剂量组smmc-7721细胞中GRP78、CHOP、ATF4蛋白表达水平均明显升高(P smmc-7721细胞凋亡。

关键词：木香烃内酯肝癌 smmc-7721细胞细胞凋亡内质网应激

密花香薷挥发油经活性氧-线粒体途径诱导smmc-7721细胞自噬性死亡

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现代预防医学 2022年第19期49卷 3500-3505页

作者：李海赢辛文媛任秋蓉郝俊玫武靖松王亚男马丹炜黄浩恒四川师范大学生命科学学院

目的探讨密花香薷挥发油诱导肝癌smmc-7721细胞死亡的作用及机理。方法设置三个处理组，使密花香薷挥发油处理终浓度为20、40μg/ml和60μg/ml,以1%DMSO为对照。采用AO-EB染色和Annexin-V/PI双染流式细胞术分析细胞死亡率；化学荧光... 详细信息

目的探讨密花香薷挥发油诱导肝癌smmc-7721细胞死亡的作用及机理。方法设置三个处理组，使密花香薷挥发油处理终浓度为20、40μg/ml和60μg/ml,以1%DMSO为对照。采用AO-EB染色和Annexin-V/PI双染流式细胞术分析细胞死亡率；化学荧光法检测细胞内ROS相对含量和线粒体膜电位；通过透射电子显微镜观察细胞超微结构；Western blot检测自噬相关蛋白Beclin 1和LC3的表达量；采用SPSS 17.0进行ANOVA方差分析，Duncan法进行多重比较。结果 AO/EB双染和Annexin-V/PI双染流式细胞术结果表明，随着密花香薷挥发油浓度增加，smmc-7721细胞的死亡率增高(F=132.100,Ρsmmc-7721细胞内相对ROS水平升高，差异有统计学意义(F=61.580,Psmmc-7721细胞内出现自噬体；Western blot检测结果显示，随着密花香薷挥发油处理浓度的增加，自噬相关蛋白LC3-Ⅰ(F=504.100,Ρsmmc-7721细胞自噬性死亡。

关键词：密花香薷 smmc-7721细胞自噬性死亡活性氧

mDRA-6与尼美舒利对人肝癌细胞系smmc-7721细胞的协同杀伤效应

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癌症 2008年第4期27卷 374-378页

作者：刘英杰马远方张军赵粤萍白慧玲李淑莲河南大学免疫学研究所河南大学细胞与分子免疫学重点实验室河南开封475004

背景与目的:mDRA-6为本实验室制备的具有肿瘤细胞杀伤作用的抗人死亡受体5(death receptor5,DR5)的单克隆抗体,尼美舒利作为特异性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂,近年来发现其对某些肿瘤细胞系的细胞具有促凋亡作用,本研究... 详细信息

背景与目的:mDRA-6为本实验室制备的具有肿瘤细胞杀伤作用的抗人死亡受体5(death receptor5,DR5)的单克隆抗体,尼美舒利作为特异性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂,近年来发现其对某些肿瘤细胞系的细胞具有促凋亡作用,本研究探讨mDRA-6与尼美舒利对肝癌细胞系smmc-7721的杀伤作用,及二者有无协同效应。方法:流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率;分别用一定浓度的mDRA-6、尼美舒利、mDRA-6联合200μmol/L尼美舒利处理smmc-7721细胞,MTT法检测细胞毒性作用,Hoechst33258染色观察smmc-7721细胞核形态变化,流式细胞术定量分析凋亡细胞率。结果:smmc-7721细胞表面DR5的表达率为95.0%,mDRA-6能够诱导smmc-7721细胞凋亡,存在浓度依赖性(r=0.984,P=0.002),25ng/mL作用12h可杀伤10.5%的细胞,1600ng/mL作用12h可杀伤35.0%的细胞。尼美舒利能够诱导smmc-7721细胞凋亡,200μmol/L作用12h可使5.0%的细胞凋亡,800μmol/L作用12h可杀伤34.0%的细胞,存在浓度依赖性(r=0.929,P=0.002)。尼美舒利与mDRA-6联合对smmc-7721细胞具有协同杀伤作用(q=1.23),200μmol/L的尼美舒利协同25ng/mL与1600ng/mL的mDRA-6作用12h可分别杀伤31.2%与91.1%的smmc-7721细胞,Hoechst33258染色和Annexin V/PI染色证实杀伤作用是通过诱导细胞凋亡实现的。结论:mDRA-6与尼美舒利均有杀伤smmc-7721细胞的作用,二者具有协同作用,该作用是通过诱导凋亡实现的。

关键词：抗人DR5单克隆抗体尼美舒利协同杀伤作用凋亡 smmc-7721细胞

土荆芥挥发油诱导人肝癌smmc-7721细胞Caspase依赖性凋亡

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中药材 2016年第5期39卷 1124-1128页

作者：王亚男朱晓换马慧杜润元李德容马丹炜四川师范大学生命科学学院细胞生物学研究室四川成都610101

目的:探讨土荆芥挥发油对人肝癌smmc-7721细胞和人正常肝LO2细胞的抑制作用及体外抗肿瘤机制。方法:MTT法检测细胞增殖;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期;显微镜下观察细胞形态变化及凋亡效应;Annexin V-PI双染流式细胞仪检测细... 详细信息

目的:探讨土荆芥挥发油对人肝癌smmc-7721细胞和人正常肝LO2细胞的抑制作用及体外抗肿瘤机制。方法:MTT法检测细胞增殖;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期;显微镜下观察细胞形态变化及凋亡效应;Annexin V-PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:土荆芥挥发油对细胞增殖的抑制作用均呈浓度和时间依赖性(Psmmc-7721细胞的IC50均小于LO2细胞(Psmmc-7721细胞周期于G0/G1期;形态学观察表明细胞皱缩,粘附性降低;细胞核着橘红色,呈固缩状等晚期凋亡特征;细胞凋亡率呈浓度依赖性升高(Psmmc-7721细胞生长,其机制可能与阻滞细胞周期,诱导细胞发生Caspase依赖性凋亡有关。

关键词：土荆芥挥发油 smmc-7721细胞细胞凋亡 Caspase抑制剂体外抗肿瘤

Survivin反义核酸对smmc-7721细胞增殖和凋亡的影响

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生物医学工程学杂志 2006年第3期23卷 625-629页

作者：潘克俭刘小菁杨春蕾王玉明王西岩成都医学院基础部成都610083 四川大学华西医院心血管疾病研究室成都610041 四川大学生命科学院成都610041

Surv iv in是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的一个成员,具有强大的抗细胞凋亡功能,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Surv iv in mRNA序列设计了反义寡核甘酸,RT-PCR检测表明,该序列反... 详细信息

Surv iv in是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的一个成员,具有强大的抗细胞凋亡功能,在几乎所有肿瘤组织中特异性表达,而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Surv iv in mRNA序列设计了反义寡核甘酸,RT-PCR检测表明,该序列反义寡核苷酸可明显降低细胞中surv iv in基因的mRNA含量;W estern印迹显示Surv iv in蛋白水平也被降低。M TT比色实验法检测结果说明人Surv iv in反义寡核苷酸抑制SMM C-7721细胞增殖,抑制率为43%,远高于无义寡核苷酸组和空白对照组。反义寡核苷酸还显著增强SMM C-7721细胞对于抗肿瘤药高三尖杉酯碱的敏感性,TUNEL法检测结果显示,在较低高三尖杉酯碱浓度下,反义寡核苷酸转染细胞的凋亡率明显高于其它对照组。本研究结果提示,surv iv in表达的靶向抑制有望应用于肿瘤的辅助治疗之中。

关键词：存活素反义寡核苷酸 smmc-7721细胞增殖凋亡

反义DNA甲基转移酶1改变肝癌smmc-7721细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的敏感性及其机理的研究

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中华肿瘤杂志 2003年第6期25卷 538-541页

作者：李小安房殿春张宏杨金亮司佩任张汝刚杨柳芹第三军医大学西南医院全军消化专科中心

目的　观察转入反义DNA甲基转移酶 1(DNMT1)基因片段后的肝癌smmc 772 1细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)的敏感性改变 ,初步阐明其机理。方法　台盼蓝排斥实验检测活细胞率 ;TUNEL法检测细胞凋亡率 ;流式细胞仪检测bcl 2、... 详细信息

目的　观察转入反义DNA甲基转移酶 1(DNMT1)基因片段后的肝癌smmc 772 1细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)的敏感性改变 ,初步阐明其机理。方法　台盼蓝排斥实验检测活细胞率 ;TUNEL法检测细胞凋亡率 ;流式细胞仪检测bcl 2、bax和bad蛋白的表达。结果　转入反义DNMT1基因片段的肝癌smmc 772 1细胞与转入正义DNMT1基因片段和空载体的细胞相比 ,活细胞率显著降低 (P 细胞仪结果显示 ,转入反义DNMT1基因片段的smmc 772 1细胞 ,其bax和bad表达 ,尤其是bax的表达 ,明显高于转入正义DNMT1基因片段和空载体的细胞 ,但对bcl 2的表达无影响。结论　转入反义DNMT1基因片段的肝癌smmc 772 1细胞对TRAIL的敏感性明显增强。

关键词：反义DNA甲基转移酶1 肝癌 smmc-7721细胞肿瘤坏死因子凋亡诱导配体敏感性

双萘酰亚胺类化合物诱导smmc-7721细胞凋亡的研究

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中华肝脏病杂志 2008年第8期16卷 608-611页

作者：刘健孙强陈英杰孙抒大连大学医学院病理学教研室 116622 大连大学附属中山医院延边大学医学部基础医学院病理学教研室

目的观察双萘酰亚胺类化合物（C8）对人肝癌细胞株smmc-7721细胞的作用。方法四甲基偶氮唑盐法检测C8对smmc-7721细胞的抑制情况；流式细胞术检测细胞周期和凋亡率；Western blot检测Bcl-2蛋白表达量；流式细胞术分析细胞内Bcl-2蛋白量... 详细信息

目的观察双萘酰亚胺类化合物（C8）对人肝癌细胞株smmc-7721细胞的作用。方法四甲基偶氮唑盐法检测C8对smmc-7721细胞的抑制情况；流式细胞术检测细胞周期和凋亡率；Western blot检测Bcl-2蛋白表达量；流式细胞术分析细胞内Bcl-2蛋白量；酶联免疫法检测Caspase 9和Caspase 3表达量。结果C8抑制smmc-7721细胞增殖，半数抑制浓度为15μmol／L。C8作用浓度在10、15、20μmol／L时，smmc-7721细胞的凋亡比例分别为16.8％、29．4％和35．8％，对照组为2．1％，smmc-7721细胞的凋亡率明显高于对照组，P〈0．01。细胞内Bcl-2蛋白表达水平下降。酶联免疫检测结果表明Caspase 9和Caspase 3被活化。结论C8可诱导人肝癌smmc-7721细胞的凋亡，为抗肿瘤药物的研究提供新的化合物。

关键词：癌,肝细胞细胞凋亡萘酰亚胺 smmc-7721细胞

白杨素通过调控MAPKs信号通路促进smmc-7721细胞凋亡

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南方医科大学学报 2018年第10期38卷 1187-1194页

作者：韦小彤彭文蕊姜琦李强冯遵永戚之琳齐世美皖南医学院活性生物大分子重点实验室安徽芜湖241002 皖南医学院法医学院实验中心安徽芜湖241002 皖南医学院生物化学与分子生物学教研室安徽芜湖241002

目的探究白杨素诱导肝癌细胞系smmc-7721细胞凋亡的效应及分子机制。方法将smmc-7721细胞分为空白对照组,DMSO溶剂对照组和白杨素处理组(5,10,20,40,60,80,100,150,200μg/mL),采用CCK-8法检测细胞的增殖抑制作用;将smmc-7721细胞分为... 详细信息

目的探究白杨素诱导肝癌细胞系smmc-7721细胞凋亡的效应及分子机制。方法将smmc-7721细胞分为空白对照组,DMSO溶剂对照组和白杨素处理组(5,10,20,40,60,80,100,150,200μg/mL),采用CCK-8法检测细胞的增殖抑制作用;将smmc-7721细胞分为空白对照组,DMSO溶剂对照组和白杨素处理组(5,10,20μg/mL),在倒置显微镜下观察细胞形态学变化;DAPI染色后,在荧光倒置显微镜下观察细胞核形态变化;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;将smmc-7721细胞分别用白杨素,P38特异性抑制剂SB203580(0,5,10μmol/L)、ERK特异性抑制剂U0126(0,5,10μmol/L)和JNK特异性抑制剂SP600125(0,5,10μmol/L)处理后,Western blotting技术检测凋亡相关蛋白PARP、caspase-3和凋亡相关信号通路和MAPKs的磷酸化变化情况。结果白杨素显著抑制smmc-7721细胞增殖,和对照组相比,DMSO组,5,10,20μg/mL白杨素处理组细胞抑制率分别为96%,76%,71.75%和64.29%,具有剂量依赖性。超过60μg/mL细胞抑制率达到饱和。另外,白杨素促进细胞凋亡,20μg/mL白杨素处理组细胞凋亡率为68.7%,比空白对照组增加了59.4%,PARP和caspase-3显著切割。白杨素激活MAPKs信号通路,具有剂量和时间依赖性。分别用SB203580、U0126、SP600125预处理细胞,白杨素诱导的P38、ERK和JNK的磷酸化和PARP切割被抑制。结论白杨素通过调控MAPKs信号分子的活化,抑制smmc-7721细胞的增殖并且促进细胞凋亡的发生。

关键词：白杨素 smmc-7721细胞细胞凋亡 MAPKs

As_2S_3纳米粒的制备及其对肝癌smmc-7721细胞的治疗作用

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东南大学学报（自然科学版） 2006年第2期36卷 298-302页

作者：林梅王子妤张东生东南大学基础医学院病理学与病理生理学系南京210009 南京中医药大学基础医学院病理教研组南京210029

研究了雌黄纳米粒的制备方法及其抗肿瘤作用.采用化学方法制备A s2S3纳米粒,通过透射电镜、X射线能谱(EDS)对A s2S3纳米粒进行分析表征,以形态学、MTT法和流式细胞术体外研究不同浓度的A s2S3纳米粒对肝癌smmc-7721细胞生长的影响,并同... 详细信息

研究了雌黄纳米粒的制备方法及其抗肿瘤作用.采用化学方法制备A s2S3纳米粒,通过透射电镜、X射线能谱(EDS)对A s2S3纳米粒进行分析表征,以形态学、MTT法和流式细胞术体外研究不同浓度的A s2S3纳米粒对肝癌smmc-7721细胞生长的影响,并同时与传统剂型的A s2S3进行比较.分析结果显示:实验制备的A s2S3纳米粒平均直径约为80nm,电镜下呈圆形,大小较一致,分散性较好,EDS证实其为A s2S3,无其他成分;A s2S3纳米粒对smmc-7721细胞有明显的生长抑制和凋亡诱导作用,且呈浓度和时间依耐性,其细胞生长抑制率和凋亡诱导率明显高于相同浓度传统剂型的A s2S3处理组(p<0.001).表明化学法可以制备A s2S3纳米粒;与传统剂型的A s2S3相比,A s2S3纳米粒有更强的抗肿瘤作用.

关键词： As2S3 纳米粒 smmc-7721细胞