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PC12细胞SLC6A4基因沉默稳转细胞系的建立及SLC6A4基因沉默对缺氧PC12细胞凋亡的影响

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药学实践与服务 2022年第5期40卷 389-394,463页

作者：张冬梅高迎春何蕾陈克明李文斌王荣马慧萍中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院药剂科甘肃兰州730050

目的构建SLC6A4基因RNA干扰(RNAi)-短发夹RNA(shRNA)慢病毒表达载体,建立慢病毒介导沉默SLC6A4基因的PC12细胞稳转细胞系,检测SLC6A4基因沉默对缺氧诱导的细胞凋亡的影响。方法设计合成3条针对SLC6A4基因的shRNA干扰序列,构建于慢病毒... 详细信息

目的构建SLC6A4基因RNA干扰(RNAi)-短发夹RNA(shRNA)慢病毒表达载体,建立慢病毒介导沉默SLC6A4基因的PC12细胞稳转细胞系,检测SLC6A4基因沉默对缺氧诱导的细胞凋亡的影响。方法设计合成3条针对SLC6A4基因的shRNA干扰序列,构建于慢病毒载体质粒GV248中,在293T细胞中共转染进行慢病毒包装。转染大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC12细胞,荧光显微镜观察GFP荧光,筛选最佳shRNA干扰序列,应用嘌呤霉素筛选出稳定转染的细胞株。应用RT-PCR方法检测SLC6A4基因的表达,Western blot方法检测蛋白5-HTT的表达变化,流式细胞术检测沉默SLC6A4基因对缺氧诱导的PC12细胞凋亡的影响。结果成功构建SLC6A4-shRNA慢病毒载体并转染PC12细胞,与正常对照组及干扰对照组比较,干扰组细胞内SLC6A4基因和蛋白表达明显降低(PSLC6A4基因,沉默SLC6A4基因可以逆转缺氧诱导的细胞凋亡。结论通过shRNA慢病毒载体途径可有效沉默PC12细胞SLC6A4基因,沉默SLC6A4基因可以逆转缺氧诱导的细胞凋亡。

关键词：慢病毒载体 shRNA RNA干扰 SLC6A4 细胞凋亡

SLC6A4基因表达及多态性对吐鲁番斗鸡攻击行为的影响

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石河子大学学报（自然科学版） 2016年第6期34卷 -页

作者：张苗苗王德平张吉保钟新献刘秀霞李岩廖和荣石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 吐鲁番市永盛斗鸡保种场新疆吐鲁番838000

为探讨SLC6A4基因对吐鲁番斗鸡攻击行为的调控作用,寻找吐鲁番斗鸡攻击行为的分子标记,本研究分析吐鲁番斗鸡、新罗曼蛋鸡及其杂交F1代、F2代脑组织初生到6月龄各月龄的SLC6A4基因表达水平,筛查亲代、F1代和F2代的SLC6A4基因SNP,结合攻... 详细信息

为探讨SLC6A4基因对吐鲁番斗鸡攻击行为的调控作用,寻找吐鲁番斗鸡攻击行为的分子标记,本研究分析吐鲁番斗鸡、新罗曼蛋鸡及其杂交F1代、F2代脑组织初生到6月龄各月龄的SLC6A4基因表达水平,筛查亲代、F1代和F2代的SLC6A4基因SNP,结合攻击行为表型分析验证SLC6A4基因多态性与吐鲁番斗鸡攻击行为的关联性。结果显示:初生到6月龄的吐鲁番斗鸡和新罗曼蛋鸡脑组织的SLC6A4基因表达呈波浪形,与攻击行为呈显著的正相关;在SLC6A4基因第一外显子上发现了2个错义突变位点(T6213768G、C6213750G),而且BB基因型的攻击性显著高于其他基因型,因此,SLC6A4基因可作为吐鲁番斗鸡攻击行为选择的候选基因,建议把第一外显子的BB基因型确定为吐鲁番斗鸡攻击行为分子标记的参考基因型。

关键词：吐鲁番斗鸡攻击行为 SLC6A4 基因表达分子标记

新疆维吾尔族、哈萨克族和汉族疼痛敏感性与SLC6A4基因多态性的相关性研究

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国际检验医学杂志 2019年第12期40卷 1453-1457,1462页

作者：雷波柯雪萍李新平柯雪茹曹兴华 1新疆医科大学附属中医医院手术麻醉科新疆乌鲁木齐830001 新疆哈密市中心医院内镜室新疆哈密839000 3新疆兵团第七师医院麻醉科新疆奎屯833200

目的探讨新疆地区维吾尔族、哈萨克族和汉族疼痛敏感性与SLC6A4基因多态性间的相关性。方法随机选取2017年6月至2018年2月在新疆医科大学附属中医医院就诊接受结直肠癌根治术的维吾尔族、哈萨克族、汉族患者各50例,分别采集患者入院后... 详细信息

目的探讨新疆地区维吾尔族、哈萨克族和汉族疼痛敏感性与SLC6A4基因多态性间的相关性。方法随机选取2017年6月至2018年2月在新疆医科大学附属中医医院就诊接受结直肠癌根治术的维吾尔族、哈萨克族、汉族患者各50例,分别采集患者入院后空腹静脉血抽提DNA通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测技术(PCR-RFLP)对SLC6A4基因多态性位点进行检测;利用便携式压力测试仪对患者试验性疼痛压力痛阈(PPT)和耐痛阈(PTO)进行检测;术后6、12、24、48h记录患者VAS评分并统计48h内镇痛不全及不良反应发生率。结果维吾尔族高表达5-HTT基因型(18%)、中表达5-HTT基因型(70%)与低表达5-HTT基因型(12%)患者比例与哈萨克族(12%、60%、28%)、汉族(8%、58%、34%)患者差异有统计学意义(χ^2=4.391,P=0.043);3组患者PPT差异无统计学意义(F=0.317,P=0.633),维吾尔族患者PTO低于哈萨克族和汉族患者,差异有统计学意义(F=2.514,P=0.047),同组患者低表达5-HTT基因型患者具有较高的PPT与PTO;术后6hVAS评分显示维吾尔族患者术后痛感高于哈萨克族和汉族患者,差异有统计学意义(F=2.270,P=0.015),同组内VAS评分显示低表达5-HTT基因型的患者在术后6、12、24、48hVAS评分均低于同组其他基因型患者,差异有统计学意义(P48h不良反应发生率差异无统计学意义(χ^2=0.862,P=0.298)。结论SLC6A4基因多态性与新疆地区维吾尔族、哈萨克族和汉族疼痛敏感性相关,低表达5-HTT的基因型可提高患者疼痛耐受。

关键词：维吾尔族 SLC6A4 基因多态性试验性疼痛术后疼痛

SLC6A4甲基化与精神心理疾病易感性和冠心病预后的关系

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临床医学 2020年第5期40卷 121-124页

作者：张晗张敏昆明医科大学附属第一医院心内科云南昆明650032

随着社会发展,慢性社会心理压力导致的心身疾病已成为威胁人们健康的重要因素。研究发现多种基因的表观修饰和心身疾病发生发展密切相关,其中五羟色胺转运体基因甲基化作用的研究开展广泛,但各研究结果间却相互矛盾。已知倦怠与五羟色... 详细信息

随着社会发展,慢性社会心理压力导致的心身疾病已成为威胁人们健康的重要因素。研究发现多种基因的表观修饰和心身疾病发生发展密切相关,其中五羟色胺转运体基因甲基化作用的研究开展广泛,但各研究结果间却相互矛盾。已知倦怠与五羟色胺转运体基因甲基化有关,又是冠心病预后的重要影响因素。本文主要对五羟色胺转运体基因甲基化与精神心理疾病易感性的关系进行阐述,并提出其作为冠心病预后预测指标的可能性。

关键词： SLC6A4 倦怠精神心理疾病易感性冠心病预后

SLC6A4基因多态性与术后切口疼痛的相关性研究

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SLC6A4基因多态性与术后切口疼痛的相关性研究

作者：赖露明福建医科大学

学位级别：硕士

背景与目的:人类编码5-HT转运体(serotonin transporter,5-HTT)的基因SLC6A4多态性中研究较多的是5-HTTLPR和rs25531，根据二者对转录和表达5-HTT的影响可分为高、中、低表达三类基因型，已有研究表明5-HTT不同表达水平基因型与慢性疼... 详细信息

背景与目的:人类编码5-HT转运体(serotonin transporter,5-HTT)的基因SLC6A4多态性中研究较多的是5-HTTLPR和rs25531，根据二者对转录和表达5-HTT的影响可分为高、中、低表达三类基因型，已有研究表明5-HTT不同表达水平基因型与慢性疼痛综合征的严重程度密切相关，在热疼痛阈值及阿片药物的镇痛作用上也证实5-HTT低表达基因型具有更高的阈值与较好的镇痛效果。为了更好地指导临床的个性性化镇痛用药，本研究拟探讨SLC6A4基因多态性(5-HTTLPR、rs25531)与术后病人切口疼痛个体差异性之间的相关性。方法:择期行经腹子宫肌瘤剔除术或子宫切除术的患者80例，年龄305岁，ASA II级。采用统一的静吸复合麻醉方案，Accufuser镇痛泵(100ml，2ml/h)用于术后镇痛，并用VAS评估术后24小时疼痛等情况。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)和基因测序技术对SLC6A4基因多态性(5-HTTLPR、rs25531)进行位点检测。结果:SLC6A4基因多态性中5-HTTLPR可得到5种基因型：LL、LS、SS、XLL、XLS，符合Hardy–Weinberg遗传平衡(P>0.05);rs25531经测序共有三种基因型：AA、AG、GG，其突变频率具有种族与地域差异性。本研究表明不同基因型间术后疼痛并无差异(P>0.05)，但与SLC6A4基因多态性的5-HTT中表达基因组相比，5-HTT低表达基因组于术后即刻和术后4小时VAS评分显著性降低(P4小时低表达组VAS评分差异无统计学意义(P>0.05);两组术后恶心呕吐发生率也未见统计学意义(P>0.05)。结论:5-HTT低表达基因型的个体的镇痛效果优于中表达基因型的个体。SLC6A4基因多态性(5-HTTLPR、rs25531)很可能是影响术后切口疼痛个体差异性的重要基因突变位点。

关键词： SLC6A4 术后切口疼痛基因多态性个体差异 5-HT转运体

中国汉族反社会人格障碍人群slc6A基因启动子区基因多态性的分析

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南京医科大学学报（自然科学版） 2004年第6期24卷 630-632,646页

作者：谭钊安张建平曾彦英茆正红朱晓静张慧林朱进南京医科大学第二附属医院医学心理科江苏南京210011 南京医科大学病理教研室江苏南京210029

目的:探讨中国汉族人群SLC6A4基因启动子区基因多态性与反社会人格障碍的关系。方法:反社会人格障碍人群来自江苏省少年劳教所的被劳教人员,经人格诊断问卷(PDQ鄄4)筛查,符合美国精神病协会精神疾病诊断方法(DSM鄄Ⅳ)关于反社会人格障... 详细信息

目的:探讨中国汉族人群SLC6A4基因启动子区基因多态性与反社会人格障碍的关系。方法:反社会人格障碍人群来自江苏省少年劳教所的被劳教人员,经人格诊断问卷(PDQ鄄4)筛查,符合美国精神病协会精神疾病诊断方法(DSM鄄Ⅳ)关于反社会人格障碍的诊断标准;对照组来自健康体检人群,经PDQ鄄4排除反社会人格障碍和重型精神病。全部对象取血液标本提取DNA,用PCR方法扩增SLC6A4基因(5-羟色氨转移蛋白基因,5鄄HTT)启动子区序列片断,部分PCR产物行测序验证。对等位基因频率和基因型频率进行对比分析。结果:符合DSM鄄Ⅳ反社会人格障碍诊断标准者共90例,对照组140例,PCR产物电泳及测序比对,共获得3种等位基因条带L、S和XL,片断长度各相差44个碱基,分别组成4种基因型LL、LS、SS和XLL。反社会人格障碍人群S等位基因频率和SS基因型频率分别为61.80%和37.08%,与对照组比较,差异有极显著性意义(P<0.005)。结论:S等位基因频率和SS基因型频率与中国汉族人群反社会人格障碍的遗传易感性相关。

关键词：反社会人格障碍汉族人群 SLC6A4 基因多态性

SLC6A4基因rs2020939多态性与卒中后抑郁相关性的研究

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徐州医学院学报 2014年第10期34卷 689-692页

作者：姚珊沈霞岳炫烨徐州医学院附属医院神经内科江苏徐州221002

目的探讨SLC6A4基因的单核苷酸多态性位点rs2020939与卒中后抑郁（PSD）的相关性。方法本研究纳入246例首次发生脑梗死的患者，入院时登记患者基本资料、脑梗死病灶、美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分和脑血管病危险因素等，入... 详细信息

目的探讨SLC6A4基因的单核苷酸多态性位点rs2020939与卒中后抑郁（PSD）的相关性。方法本研究纳入246例首次发生脑梗死的患者，入院时登记患者基本资料、脑梗死病灶、美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分和脑血管病危险因素等，入院时和随访后3个月均采用汉密尔顿抑郁量表（HAMD）进行抑郁评分，根据3个月后HAMD评分将脑梗死患者分成卒中后抑郁组（n=86）和卒中后无抑郁组（n=160）。运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术对rs2020939进行基因分型。用单因素和多因素Logistic回归模型来分析卒中后抑郁的危险因素。结果年龄为卒中后抑郁的保护因素（P=0．0047，OR=0．977，95％可信区间0．955—1．000），NIHSS评分（P=0．00，OR=1．386，95％可信区间1．249～1．583）与PSD有关。rs2020939多态位点基因型和等位基因在卒中后抑郁组和卒中后无抑郁组中的分布均有显著性差异（基因型：Х^2=10．007，P=0．007；等位基因：Х^2=10．551，P=0．001）。结论除了患者年龄、脑梗死后病情严重程度与PSD有关外，还发现SLC6A4基因rs2020939位点多态性与淮海地区汉族人群卒中后抑郁的发病相关，该位点可能是PSD的易感基因。

关键词：卒中后抑郁 SLC6A4 基因脑梗死单核苷酸多态性

反社会人格障碍患者攻击行为与SLC6A4基因、MAOA基因多态性的关联分析以及与父母教养方式的研究

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反社会人格障碍患者攻击行为与SLC6A4基因、MAOA基因多态性的关联...

作者：茆正洪南京医科大学

学位级别：硕士

目的探讨中国汉族人群SLC6A4基因(5-羟色胺转移蛋白基因、5-HTT)启动子区基因多态性、MAOA(单胺氧化酶A)基因启动子区可变数目串联重复多态性(MAOA-VNTR)与反社会人格障碍攻击行为遗传易感性的关系。方法本研究中反社会... 详细信息

目的探讨中国汉族人群SLC6A4基因(5-羟色胺转移蛋白基因、5-HTT)启动子区基因多态性、MAOA(单胺氧化酶A)基因启动子区可变数目串联重复多态性(MAOA-VNTR)与反社会人格障碍攻击行为遗传易感性的关系。方法本研究中反社会人格障碍攻击性人群来自江苏省少年劳教所的男性被劳教人员，经人格诊断问卷(PDQ-4)筛查，符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-Ⅳ)关于反社会人格障碍的诊断标准，并具有诊断标准中冲动性或易激惹性和攻击性项目者共90例;对照组140例来自正常体检人群，经PDQ-4排除反社会人格障碍和重型精神病。全部对象取血液标本提取DNA，用PCR方法扩增SLC6A4基因动子区序列片断和MAOA基因启动子区VNTR序列片断，部分PCR产物行测序验证。对等位基因频率和基因型频率进行对比分析。结果 PCR产物电泳及测序比对，SLC6A4基因共获得三种等位基因条带L、S和XL，片断长度各相差44个碱基，分别组成四种基因型LL、LS、SS和XLL。反社会人格障碍人群S等位基因频率和SS基因型频率分别为61.80％和37.08％，与对照组比较，差异有极显著性意义(P＜0.005)。

关键词：反社会人格障碍 SLC6A4 MAOA-VNTR 基因多态性父母养育方式(EMBU) PDQ-4 罪犯

Genes in the serotonin pathway are associated with bipolar affective disorder in a Han Chinese population

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Neuroscience Bulletin 2014年第1期30卷 33-42页

作者： Bo Xiang Zhenxing Yang Yin Lin Lijie Guan Xuan Li Wei Deng Zeyu Jiang Guohui Lao Qiang Wang Xiaoyu Hao Xiang Liu Yingcheng Wang Liansheng Zhao Xiaohong Ma Tao Li Liping Cao Xun Hu State Key Laboratory of Biotherapy Laboratory of Psychiatry Research West China Hospital Sichuan University Mental Health Center West China Hospital Sichuan University Guangzhou Brain Hospital Biobank West China Hospital Sichuan University

Serotonin plays an important role in mood regulation, but the involvement of serotonin pathway genes in the development of bipolar I disorder. （BP-I）, a mood disorder, is not clear. We selected 21 single- nucleotide polymorphisms （SNPs） within the HTR2A gene, 8 within the SLC6A4 gene and 23 within the TPH2 gene for genotyping using the GoldenGate genotyping assay. A total of 375 patients with BP-I and 475 normal controls were recruited. Two out of 21 SNPs （rs1475196 and rs9567747） in the HTR2A gene and 1/23 SNPs （rs17110566） in the TPH2 gene were significantly associated with BP-I, both genotype-wise and allele-wise. Furthermore, a specific haplotype in the HTR2A gene showed a significant association with BP-I. Our results indicate that the HTR2A and TPH2 genes in the serotonin pathway play important roles in susceptibility to BP-I.

关键词： bipolar affective disorder serotonin pathway TPH2 HTR2A SLC6A4