检索结果-南通市图书馆

作者：潘向欧复旦大学

学位级别：硕士

目的：用免疫组化方法检测结直肠癌原发病灶中SCIN、CDKL1、CUGBP、slc16a7基因的表达,并进一步研究上述基因表达与结直肠癌及肝转移的发生、临床病理特征及预后相关性。方法：随机选取2001年～2009年复旦大学附属中山医院普外科手术治... 详细信息

目的：用免疫组化方法检测结直肠癌原发病灶中SCIN、CDKL1、CUGBP、slc16a7基因的表达,并进一步研究上述基因表达与结直肠癌及肝转移的发生、临床病理特征及预后相关性。方法：随机选取2001年～2009年复旦大学附属中山医院普外科手术治疗的结直肠癌病例300例,根据术前、术中诊断及术后随访,分为结直肠癌无肝脏转移组（n=100）、结直肠癌同时性肝脏转移组（n=100）和结直肠癌异时性肝脏转移组（n=100）,运用免疫组化技术检测SCIN、DKL1、CUGBP1、slc16a7基因在各组结直肠癌癌组织和正常结直肠组织中的表达,采用非参数Wilcoxon检验和Kaplan-meier生存分析方法,单因素和多因素Cox比例风险模型分析与原发灶病理特征、肝脏转移发生及生存预后的关系。结果：1、在结直肠癌组织中,SCIN基因在同时性肝转移组较无转移组表达上调,P=0.021。异时性肝转移组与无转移组（P=0.117）和同时性肝转移组（P=0.404）表达比较均无明显差异。SCIN基因表达在大体类型（P=0.034）、浸润深度（P=0.011）、淋巴结转移（P=0.012）、癌结节（P=0.027）、神经侵犯（P=0.041）等方面有差异。SCIN基因在溃疡型、T3-T4期、淋巴结转移阳性、癌结节阳性、神经侵犯阳性的癌组织中表达上调。在正常组织中,SCIN在同时性肝转移组中表达较无转移组明显上调（P=0.014）,异时性肝转移组表达较无转移组明显也上调（P=0.019）,同时性肝转移组和异时性肝转移组之间无明显差异（P=0.931）。2、在结直肠癌组织中,CUGBP1在无转移、同时性肝转移及异时性肝转移三组之间虽无明显差异,但P值接近0.05。其表达与临床病理方面无明显差异相关性（P＞0.05）。在正常组织中,CUGBP1在异时性肝转移组表达较无转移组明显上调（P=0.029）。同时性肝转移组较无转移组,同时性肝转移组较异时性肝转移组之间无明显差异。CUGBP1在各组及总体结直肠癌组织中较正常组织明显上调,P＜0.0001。3、CDKL1在结直肠癌组织中,异时性肝转移组较无转移组表达上调（P=0.023）;无转移组与同时肝转移性组及同时性肝转移组与异时性肝转移组无统计学差异。在正常结直肠组织中,CDKL1在无转移组、同时性肝转移组和异时性肝转移组之间表达无明显差异,P＞0.05。CDKL1在各组及总体结直肠癌组织中较正常组织明显上调,P＜0.0001。在结直肠癌组织中,CDKL1表达在组织学分型和浸润深度方面有差异。在粘液腺癌中表达明显高于非粘液腺癌（P＜0.001）;在T3-T4期肿瘤中表达高于T1-T2期肿瘤（P=0.014）。4、slc16a7在结直肠癌组织中,异时性肝转移组与无转移组（P=0.015）和同时性肝转移组（P=0.005）比均明显下调。同时性肝转移组和无转移组比无明显差异。其表达与临床病理方面无明显差异相关性（P＞0.05）。在结直肠癌正常组织中,三组之间slc16a7表达无明显差异。结直肠癌组织与正常组织比：在无转移组中,结直肠癌和正常组织比slc16a7表达无差异;在同时性肝转移组中,结直肠癌组织较正常组织表达上调（P=0.013）;在异时性肝转移组中,结直肠癌组织较正常组织表达下调（P=0.0005）。5、单因素分析提示同时性肝转移的发生与年龄、分化程度、浸润程度、淋巴结转移、癌结节、脉管侵犯、神经侵犯相关。异时性肝转移的发生与浸润程度、淋巴结转移、癌结节相关。多因素分析提示淋巴结转移阳性、癌结节阳性、SCIN基因高表达情况是结直肠癌同时性肝转移发生的独立风险因素。浸润深度越深、淋巴结转移阳性、slc16a7低表达是结直肠癌异时性肝转移发生的独立风险因素。6、单因素分析提示结直肠癌肝转移总体生存时间与浸润深度、淋巴结转移、癌结节、神经侵犯、CUGBP1基因表达情况、SCIN基因表达情况相关。多因素分析提示癌结节阳性、神经侵犯、SCIN基因高表达是结直肠癌肝转移独立风险预后因素。结论：1、SCIN基因在结直肠癌组织中,同时性肝转移组表达较无转移组上调。可作为预测结直肠癌肝转移指标。SCIN基因在溃疡型、T3-T4期、淋巴结转移阳性、癌结节阳性、神经侵犯阳性的癌组织中表达上调。2、结直肠癌组织中,CUGBP1在无转移、同时性肝转移及异时性肝转移三组之间虽无明显差异,但P值接近0.05。在正常结直肠组织中,CUGBP1在异时性肝转移组表达较无转移组明显上调。3、在结直肠癌组织中,CDKL1在结直肠癌异时性肝转移组表达较无转移组上调。在粘液腺癌及T3-T4期肿瘤中表达上调。提示CDKL1基因可能是结直肠癌异时性肝转移的预测因素。4、slc16a7在结直肠癌组织中,异时性肝转移组与无转移组和同时性肝转移组比均明显

关键词：结直肠癌肝转移免疫组化 SCIN CDKL1 CUGBP1 slc16a7

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miR-192在尼罗罗非鱼应答碱度胁迫中的表达及靶基因

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上海海洋大学学报 2021年第3期30卷 407-415页

作者：周昊天张成硕王艳玲赵金良赵岩上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306

采用实时荧光定量、生物信息学、双荧光素酶报告和体内miRNA抑制的方法,探究miR-192在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)应答碳酸盐碱度胁迫中的作用。结果如下:(1)实时荧光定量PCR实验表明,在急性碱度胁迫(6 g/L NaHCO3)尼罗罗非鱼6 h... 详细信息

采用实时荧光定量、生物信息学、双荧光素酶报告和体内miRNA抑制的方法,探究miR-192在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)应答碳酸盐碱度胁迫中的作用。结果如下:(1)实时荧光定量PCR实验表明,在急性碱度胁迫(6 g/L NaHCO3)尼罗罗非鱼6 h后,鳃组织中miR-192的表达显著下调,溶质转运蛋白基因(solute carriers16A7,slc16a7)表达显著上调(Pslc16a7可能是miR-192的靶基因;(3)利用双荧光素酶报告实验发现miR-192会与slc16a7的3′UTR结合;(4)体内对miR-192抑制后,slc16a7的表达显著上调(Pslc16a7是miR-192的直接靶基因,为探明miRNAs调控尼罗罗非鱼应答碱度胁迫的分子机制提供了一定的依据。

关键词：碱度胁迫 microRNA 尼罗罗非鱼 miR-192 slc16a7

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碱胁迫下尼罗罗非鱼miRNA的表达分析和靶基因的筛选鉴定

碱胁迫下尼罗罗非鱼miRNA的表达分析和靶基因的筛选鉴定

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作者：周昊天上海海洋大学

学位级别：硕士

我国拥有大量的盐碱水资源,但开发难度大、利用率低。尼罗罗非鱼是一种广盐性的经济鱼类,具有生长速度快、抗逆性强的特点。开展耐盐碱尼罗罗非鱼选育工作有利于盐碱水资源的开发利用,也有助于修复生态环境。同时,深入研究鱼类适应盐碱... 详细信息

我国拥有大量的盐碱水资源,但开发难度大、利用率低。尼罗罗非鱼是一种广盐性的经济鱼类,具有生长速度快、抗逆性强的特点。开展耐盐碱尼罗罗非鱼选育工作有利于盐碱水资源的开发利用,也有助于修复生态环境。同时,深入研究鱼类适应盐碱环境的机制可以为选育实践提供理论基础。本论文首先对不同碱度下尼罗罗非鱼鳃组织进行miRNAs高通量测序,并进行生物信息学分析;利用实时荧光定量方法,对随机挑选的有代表性的7个miRNA进行表达验证和靶基因分析;最后结合双荧光素报告实验和体内注射实验验证miR-192和slc16a7的靶向关系,主要研究结果如下:(1)设置了2个碱度组AW4(4g/L Na HCO)、AW6(6g/L Na HCO)和淡水对照组FW。急性胁迫尼罗罗非鱼进行72h后,对鳃组织进行高通量测序和生物信息分析。结果发现,276个已知miRNA表达,其中包含42个随碱度升高表达持续显著升高的miRNAs(P7个miRNA(miR-24a、miR-30d、miR-143、miR-155、miR-122、miR-192和miR-194a)和6个预测靶基因(slc20a1a、nme3、slc16a7、them4、slc7A1、igfbp5a)的表达变化。结果表明,7个miRNAs的表达基本符合测序结果,并发现2对可能的靶向关系(miR-122和slc20a1a、miR-192和slc16a7)。(3)选取对应关系较明确的一组(miR-192和slc16a7)进一步验证靶向关系。双荧光素报告实验表明,miR-192通过与slc16a7的3’UTR结合的方式,抑制了slc16a7的表达。体内注射miR-192抑制剂antagomir,miR-192表达降低,slc16a7表达增加。说明miR-192和slc16a7参与了罗非鱼应答碱胁迫的过程,发挥了重要的生物学作用。

关键词：尼罗罗非鱼 miRNA 碱胁迫 miR-192 slc16a7

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