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Reduced expression of sk3 and IK1 channel proteins in the cavernous tissue of diabetic rats

Asian Journal of Andrology 2010年第4期12卷 599-604页

作者： Jin-Hai Zhu Rui-Peng Jia Lu-Wei Xu Jian-Ping Wu Zi-Zheng Wang Shu-Kui Wang Cheng-Jia Bo Department of Urology Nanjing First Hospital Affiliated to Nanjing Medical University Nanjing 210006 China Laboratory of Molecular Medicine Nanjing First Hospital Affiliated to Nanjing Medical University Nanjing 210006 China

The small （sk3） and intermediate （IK 1） conductance calcium-activated potassium channels could have key roles in the endothelium-dependent hyperpolarization factor pathway, which is believed to contribute to normal penile erection function. We aimed to investigate the expression of sk3 and IK1 in diabetic rodents. The experimental diabetes model was induced in 8-week-old male Sprague-Dawley rats （250-300 g） by a single administration of streptozotocin. Both the diabetes mellitus group （DM group, n = 20） and the control group （NDM group, n = 10） were injected with a low dose of apomorphine to allow for the measurement and comparison of the corresponding penile erections. The mRNA and protein expression levels of sk3 and IK1 were measured by reverse transcription polymerase chain reaction and western blot, respectively. Erectile function was significantly decreased in the DM group compared with control group （P 〈 0.05）. The mRNA and protein expression levels of sk3 and IK1 were reduced in the cavernous tissue of diabetic rats compared with the control group （P 〈 0.05）. Diabetes inhibits mRNA and protein expression of both sk3 and IK1 in the cavernous tissue of diabetic rats. This could play a key role in the development of erectile dysfunction in diabetic rats.

关键词： diabetes mellitus endothelium-dependent hyperpolarization factor erectile dysfunction IKI sk3

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The diabetes-induced colonic transit disorder mediated by PDGFRα+ cell/sk3 in STZ-induced diabetic mice

The diabetes-induced colonic transit disorder mediated by PD...

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中国生理学会内分泌代谢、比较生理与应激生理学术会议

作者： Ni-na Song Hong-li Lu Chen Lu Ling Tong Shi-qi Huang Xu Huang Wen-xie Xu Department of Physiology Shanghai Jiao Tong University School of Medicine

Objective A major complication related to colonic dysmotility in diabetic patients is severe *** constipation has serious negative impact on the quality of life and is now considered in the guidelines of professional health *** without a Ml understanding of the disease,current available treatments do not provide a *** muscle cells and ICs（ICC&PDGFRα cells） that form the SIP syncytium,have important functions in gastrointestinal *** the present study the contribution of PDGFRα cells to diabetes-induced colonic dysmotility was investigated in STZ-induced diabetic *** Western blot,real-time PCR,contractile experiment,video imaging and intracellular recording were used in this *** The results demonstrated that length of colon in diabetic mice was much longer than that in normal;The video imaging experiment showed that colonic transit of fecal pellets was significantly delayed in diabetic mice;Both the mRNA and protein expressions of PDGFRa,small-conductance Ca2+-activated K channels（sk3） and P2Y1 receptors were increased in diabetic colon;The response of colonic smooth muscles to the antagonist and agonist of sk3 channels and P2Y1 receptors were more susceptible in diabetic groups;The agonist of sk3 channels（CyPPA） and P2Y1 receptors（MRS2365） caused more dramatically hyperpolarization in diabetic colonic smooth muscle;The inhibitors of sk3 channels（Apamin） and P2Y1 receptors（MRS2500） induced more depolarization in diabetic colonic smooth muscle;The amplitude of fast inhibitory junctional potentials（fIJP） of colonic smooth muscle was significantly increased in diabetic *** results suggest that purinergic neurotransmitters-P2Y1 receptors/sk3 signaling pathway is up-regulated in diabetic colon;Conclusion Diabetes-induced colonic smooth muscle dysmotility is mediated by PDGFRα cells/sk3 up-regulation.

关键词： diabetes constipation platelet-derived growth factor receptor-a positive cell sk3 P2Y1 receptor

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小电导钙激活型钾通道sk3在大鼠偏头痛模型中的表达变化研究

小电导钙激活型钾通道SK3在大鼠偏头痛模型中的表达变化研究

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作者：陶然中南大学

学位级别：硕士

偏头痛是神经系统常见的疾病,严重影响患者生活质量和工作。目前偏头痛的发病机制仍未明了。脑干可能是潜在的偏头痛发生器,头痛的始动可能源于脑干核团的兴奋(其中可能包括5-HT神经元)。离子通道基因多态性在家族偏瘫型偏头痛中的确定... 详细信息

偏头痛是神经系统常见的疾病,严重影响患者生活质量和工作。目前偏头痛的发病机制仍未明了。脑干可能是潜在的偏头痛发生器,头痛的始动可能源于脑干核团的兴奋(其中可能包括5-HT神经元)。离子通道基因多态性在家族偏瘫型偏头痛中的确定,提示偏头痛可能与离子通道有关。有研究认为编码小电导钙激活型钾通道sk3的KCNN3基因的多聚谷氨酰胺重复序列CAG多态性和一般性偏头痛有关。sk3在脑干有丰富的表达。sk3通道的改变可显著影响单胺能神经递质的释放,如5-HT、DA等。sk3可产生后超级化电位mAHP,改变神经元放电模式,参与峰频率适应的早期阶段,限制动作电位的发放频率,对正常的神经传递至关重要,它与细胞兴奋性密切相关。目的初步探讨sk3与大鼠偏头痛的关系,为深入研究偏头痛的发病机制,寻找新治疗靶点提供实验依据。方法1.56只成年雌性SD大鼠随机分为4组,对照组(n=8),模型组(n=16),氟桂利嗪组(n=16),卡马西平组(n=16)。其中后三个组每组再随机平均分为发作期组和间歇期组两个亚组,每组8只。2.模型组、氟桂利嗪组和卡马西平组均背部皮下注射硝酸甘油溶液10mg/kg(2ml)造模,每周注射一次,共5周。对照组用等量生理盐水代替硝酸甘油注射。氟桂利嗪组和卡马西平组分别于第二次造模后每天灌服氟桂利嗪5mg/kg和卡马西平一次4mg/kg。对照组于第二次造模后每天灌服生理盐水一次10ml/kg。3.所有发作期组于第5次造模后3小时断头处死取脑干组织,间歇期组第5次造模后4天断头处死取脑干组织。***-PCR法分别检测各组脑干小电导钙激活型钾通道sk3mRNA的表达量。Western-Blot法分别检测各组脑干小电导钙激活型钾通道sk3蛋白的表达量。结果1.与对照组相比,模型组、氟桂利嗪组和卡马西平组脑干sk3mRNA和蛋白的表达水平均下降(p＜0.05)。2.各组内发作期组较相应间歇期组脑干sk3 mRNA和蛋白的表达水平均下降(p＜0.05)。3.与模型组相比,氟桂利嗪组和卡马西平组脑干sk3 mRNA和蛋白的表达水平均无明显差异(p＞0.05)。结论1.脑干sk3表达量的降低可能与偏头痛的发生发展有关。2.氟桂利嗪和卡马西平防治偏头痛可能不是通过影响脑干sk3的表达量实现的。

关键词：偏头痛小电导钙激活型钾通道 sk3 氟桂利嗪卡马西平

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PGRMC1在孕酮抑制人输卵管平滑肌自发性收缩中的作用及其机制研究

PGRMC1在孕酮抑制人输卵管平滑肌自发性收缩中的作用及其机制研究

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作者：张朵上海交通大学

学位级别：硕士

背景:正常的输卵管上皮纤毛摆动频率(Fallopian tubal cilia beat frequency,CBF)和肌肉蠕动功能对于受精卵的运输十分重要。其功能异常会导致输卵管妊娠(Tubal pregnancy,TP)或不孕。我们团队前期的流行病学研究发现,在使用左炔诺孕酮... 详细信息

背景:正常的输卵管上皮纤毛摆动频率(Fallopian tubal cilia beat frequency,CBF)和肌肉蠕动功能对于受精卵的运输十分重要。其功能异常会导致输卵管妊娠(Tubal pregnancy,TP)或不孕。我们团队前期的流行病学研究发现,在使用左炔诺孕酮紧急避孕失败后,其患TP的风险较未服用者大大增加。进一步研究发现孕酮能降低CBF,并具有浓度依赖性。既往有文献报道,孕酮能抑制输卵管平滑肌自发性收缩,但其机制研究甚少。本研究选择一类较新的孕酮膜受体即孕激素膜受体组分1(Progesterone receptor membrane component 1,PGRMC1)作为切入点,探究其在孕酮抑制输卵管平滑肌自发性收缩中的作用,并对其机制做初步的探索,旨在为孕酮导致TP提供新的预防思路。目的:本研究利用多学科技术探讨以下四个方面的科学问题。(1)孕酮对人输卵管平滑肌自发性收缩的影响。(2)PGRMC1、小电导钙激活钾离子通道3(Small-conductance calcium-activated K,sk3)在人输卵管平滑肌中的表达、并分析对照组与病例组表达量的差异。(3)PGRMC1和sk3在孕酮抑制输卵管平滑肌自发性收缩中的作用。(4)血小板源性生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptorα,PDGFRα)(+)细胞是否存在于人输卵管平滑肌中;其是否表达sk3和PGRMC1。方法:临床收取因未绝经妇女因子宫肌瘤切除的输卵管组织和因宫外孕切除的输卵管组织。通过q PCR、Western Blot、免疫荧光和免疫组化明确PGRMC1和sk3在人输卵管平滑肌中的表达和定位。通过肌条实验探究孕酮对人输卵管平滑肌自发性收缩的影响以及PGRMC1和sk3在此过程中的作用。结果:本研究得到了以下创新性结果。(1)PGRMC1、sk3在人输卵管平滑肌中均有表达;在对照组,壶腹部与伞部PGRMC1的表达量高于间质部,而sk3的表达在各部位无差异;在病例组,各部位之间PGRMC1或sk3的表达均未见差异;但对照组壶腹部的PGRMC1表达明显高于病例组同部位;对照组的峡部、壶腹部、伞端的sk3表达明显高于病例组。(2)病例组输卵管平滑肌基础收缩幅度显著小于对照组。(3)孕酮能抑制人输卵管平滑肌的自发性收缩幅度,且随着浓度增加而减小;分别使用PGRMC1的拮抗剂(AG-205)或sk3的拮抗剂(Apamin)或非选择性钙离子激活钾通道拮抗剂(TEA)能一定程度地抵消孕酮对对照组平滑肌收缩幅度的抑制作用。应用TEA能部分抵消孕酮对病例组平滑肌收缩幅度的抑制作用(4)PDGFRα(+)细胞存在于人输卵管平滑肌中,并可能共表达sk3和PGRMC1。结论:孕酮能快递地抑制人输卵管平滑肌自发性收缩幅度,并呈浓度依赖性。PGRMC1、sk3存在与人输卵管平滑肌中,且可能共表达在PDGFRα(+)细胞上。sk3可能参与基础状态下输卵管平滑肌收缩活动。孕酮可能部分通过PGRMC1激活sk3参与抑制输卵管平滑肌收缩的过程。sk3在TP患者输卵管平滑肌中低表达可能会影响输卵管节律性蠕动,而增加紧张性收缩从而阻碍受精卵的运输。

关键词：孕酮左炔诺孕酮输卵管妊娠异位妊娠 PGRMC1 sk3 输卵管平滑肌

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