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大鼠杏仁核内sirt1信号通路调控海洛因成瘾行为

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中华精神科杂志 2019年第4期52卷 267-274页

作者：张茜王云鹏芦晓红党伟宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系银川750001 西安交通大学法医学院 710100 西安市精神卫生中心 710100

目的通过慢性海洛因给药分析杏仁核内sirt家族表达变化,筛选在海洛因给药后具有显著表达改变的目标分子,继而干预杏仁核内目标分子sirt1的表达,通过海洛因条件位置偏爱大鼠模型研究sirt1对海洛因成瘾行为和下游分子表达调控作用。方法... 详细信息

目的通过慢性海洛因给药分析杏仁核内sirt家族表达变化,筛选在海洛因给药后具有显著表达改变的目标分子,继而干预杏仁核内目标分子sirt1的表达,通过海洛因条件位置偏爱大鼠模型研究sirt1对海洛因成瘾行为和下游分子表达调控作用。方法慢性海洛因给药组大鼠连续7 d腹腔注射5 mg/kg海洛因,采用逆转录-聚合酶链反应及蛋白质印迹法检测sirt家族表达改变。定量染色质免疫沉淀检测ΔFosB对sirt1的上游调控。过表达慢病毒和抑制剂EX527上调/下调杏仁核内sirt1表达,观察海洛因条件位置偏爱行为及脑源性神经营养因子(BDNF)表达改变。结果慢性海洛因给药后,大鼠杏仁核内sirt1 mRNA表达显著高于盐水对照组(t14=8.127,Psirt1 mRNA在海洛因注射后6 h(t14=4.997,Psirt1(t14=5.016,Psirt1启动子区的ΔFosB水平显著升高(t14=7.301,Psirt1过表达慢病毒(OE-sirt1)并未影响大鼠的自然偏爱,但在海洛因条件位置偏爱测试2中OE-sirt1+海洛因组条件位置偏爱测试值显著高于OE-sirt1+盐水组(t20=6.629,Psirt1+海洛因组与OE-sirt1+盐水组BDNF表达分别为绿色荧光蛋白(GFP)+盐水组的(1.67±0.32)倍和(2.66±0.34)倍;EX527+海洛因组BDNF表达与EX527+盐水组差异无统计学意义。结论海洛因可能通过上调杏仁核内ΔFosB调控sirt1表达,继而改变神经元染色质组蛋白乙酰化水平,影响BDNF等下游基因表达,从而引起海洛因成瘾行为变化。

关键词：海洛因杏仁核条件位置偏爱 sirt 组蛋白乙酰化

Outcome Results of Treatment with Selective Internal Radiation Therapy (sirt) in Patients with Hepatocellular Carcinoma: A Single Center Experience

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Journal of Cancer Therapy 2017年第4期8卷 349-359页

作者： Jan Pfeiffenberger Tatjana Zimmermann Daniel N. Gotthardt Christoph Springfeld Wolfgang Stremmel Peter Schirmacher Henning Schulze-Bergkamen Arianeb Mehrabi Christoph W. Michalski Katrin Hoffmann Nikolas Kortes Boris Radeleff Uwe Haberkorn Clemens Kratochwil Karl Heinz Weiss Carsten Grüllich Department of Gastroenterology and Hepatology University Hospital Heidelberg Heidelberg Germany Department of Medical Oncology National Center for Tumor Diseases Heidelberg University Hospital Heidelberg Heidelberg Germany Institute of Pathology University Hospital Heidelberg Heidelberg Germany Department of Gastroenterology and Oncology Marien-Hospital Wesel Germany Department of General and Transplant Surgery University Hospital Heidelberg Heidelberg Germany Department of Diagnostic and Interventional Radiology University Hospital Heidelberg Heidelberg Germany Department of Nuclear Medicine University Hospital Heidelberg Heidelberg Germany Liver Cancer Center Heidelberg University Hospital Heidelberg Heidelberg Germany

Background: Hepatocellular carcinoma (HCC) has a poor prognosis. Selective internal radiation therapy (sirt) with microspheres is a treatment option for HCC. This study aimed to assess safety and survival (OS) in patients with HCC treated with sirt, to stratify patients with tumor vascularization and analyze the impact of sequential sorafenib treatment. Methods: Thirty-nine patients who received sirt for HCC between 2010 and 2013 at our center were included in this retrospective analysis. Tumor vascularization was assessed using a combination of MRI, MAA-scintigraphy and angiography. Tumor vascularization was correlated with survival. Subgroups are treated with two commercially available 90Y-labeled products SIR-Spheres (n = 16) and TheraSpheres (n = 23) and sequential therapy with sorafenib compared to sirt only was analyzed. Results: Adverse events occurred in 49% of patients with only four grade 3 and no grade 4 event. Median survival for all patients was 12.5 months (95% CI: 8.7 - 16.3). No significant differences were detectable between Thera Spheres or SIR Spheres. Survival was shorter in patients with low tumor vascularization score (OS: 3.8 months (95% CI 0 - 15.0), p = 0.043). Survival was longer with sorafenib upon progression after sirt (n=16) with an OS of 17.4 months (95% CI: 12.1 – 22.7) compared to no sorafenib (n = 13;9.1 months;95% CI: 3.0 - 15.1) or progression upon sorafenib before sirt (n = 10;8.6 months;95% CI: 5.5 - 11.7). Conclusions: sirt is safe in HCC patients. Tumor vascularization by radiography and scintigraphy may predict survival benefit. Sorafenib is active after sirt and significantly prolongs survival.

关键词： sirt Sorafenib Liver Cancer Y90

牦牛sirt3基因的克隆及其在各组织和睾丸不同发育阶段的表达

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畜牧兽医学报 2019年第12期50卷 2431-2439页

作者：王斌佟连鑫秦文昌李键殷实西南民族大学生命科学与技术学院成都610041 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室成都610041 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室成都610041 西南民族大学现代生物技术国家民委重点实验室成都610041

旨在克隆牦牛沉默蛋白调节因子3(sirtuin 3,sirt 3)基因,并检测其在牦牛不同组织及不同年龄睾丸中的表达水平,从而为研究sirt 3在牦牛睾丸发育过程中的作用机制提供试验依据。本研究选取胎牛期(5~6个月)、幼年期(1~2岁)、性成熟期(3~5岁... 详细信息

旨在克隆牦牛沉默蛋白调节因子3(sirtuin 3,sirt 3)基因,并检测其在牦牛不同组织及不同年龄睾丸中的表达水平,从而为研究sirt 3在牦牛睾丸发育过程中的作用机制提供试验依据。本研究选取胎牛期(5~6个月)、幼年期(1~2岁)、性成熟期(3~5岁)及老年期(7~9岁)健康雄性牦牛共12头(每组各3头),其中来源于同一年龄阶段的3个组织样本视为生物学重复。采集性成熟期牦牛肝、心、肺、脾、脑、肾、肌肉、小肠、睾丸和大肠以及4个时期的睾丸组织。分别提取各组织的总RNA,并利用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术克隆获得牦牛sirt 3基因序列,使用相关生物信息学软件预测其编码蛋白质的结构和功能;通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测sirt 3 mRNA在牦牛各组织及睾丸4个发育阶段的表达水平。结果表明,sirt 3基因的ORF(open reading frame,开放阅读框)为1002 bp,编码333个氨基酸,与黄牛和绵羊的同源性分别达到99.9%和96.7%,该基因的mRNA在牦牛的各个组织中广泛表达,在脾、睾丸、肺和肌肉中的表达量较高。随年龄增长sirt 3 mRNA在牦牛睾丸中表达呈现先上升后下降的趋势,其中在性成熟期的表达量最高。本研究为揭示sirt 3在牦牛生长发育,尤其是睾丸发育过程中的调控提供了一定的基础数据。

关键词：组蛋白去乙酰化 sirt 3 牦牛组织表达谱睾丸

The Geothermal Regime in sirt Basin, Libya: The Geological Role and Heat Flow Studies

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International Journal of Geosciences 2019年第1期10卷 57-79页

作者： Ahmed Al-Rashed Fouad Shaaban Ahmed Yousef Department of Science College of Basic Education PAAET Kuwait Department of Geology Desert Research Center Cairo Egypt

Bottom hole temperatures (BHTs) and static formation temperatures (DSTs) of 70 deep exploratory wells are used to evaluate the geothermal regime in the northeastern part of sirt Basin. A linear regression was derived between the BHT’s and the DST’s, for correcting the bottom hole temperatures from the drilling factors that lower them from the true formation temperatures. The geothermal gradients were calculated using the corrected BHT’s and the heat flow has been estimated. Interpretation of the geothermal data, utilizing subsurface maps and isothermal geologic cross section, revealed a shallow, local semi-thermal reservoir of Oligo-Miocene age (at depths 1000 m). The geothermal gradients and heat flow values of this reservoir are ranging from 40 - >60°C/Km and from 80 up to >130 mW/m2, respectively. At deeper depths (>1000 m until the maximum depth of investigation), the area has more or less moderate to low geothermal gradients that range from 40 to 2. The study indicates that the vertical and the lateral variations of the formation temperatures, geothermal gradients and the heat flow values are controlled by the structural, groundwater movements as well as lithological and thermal characteristics of the subsurface sequence.

关键词： Geothermal Reservoir Bottom Hole Temperatures Static Formation Temperatures Heat Flow sirt Basin

白藜芦醇对sirt1的调节作用及sirt家族对代谢综合征的防治意义

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食品科学 2011年第23期32卷 352-357页

作者：高洋庞广昌天津市食品生物技术重点实验室天津商业大学生物技术与食品科学学院天津300134

代谢综合征是由一系列代谢紊乱所导致的心血管疾病和Ⅱ型糖尿病等疾病的统称,是饮食紊乱和不正确的生活方式所造成的。随着人们年龄的增长发病率逐渐升高,并且在全球呈现流行趋势。二氢尿嘧啶脱氢酶(NAD+)依赖的sirt家族调节细胞和器官... 详细信息

代谢综合征是由一系列代谢紊乱所导致的心血管疾病和Ⅱ型糖尿病等疾病的统称,是饮食紊乱和不正确的生活方式所造成的。随着人们年龄的增长发病率逐渐升高,并且在全球呈现流行趋势。二氢尿嘧啶脱氢酶(NAD+)依赖的sirt家族调节细胞和器官的代谢,对代谢综合征具有明显的调节作用。本文重点从分子水平阐述白藜芦醇介导的sirt1,以及sirt家族其他成员对代谢的调节作用,为开发白藜芦醇类的功能性食品提供科学依据。sirt家族的乙酰化调节也为由于代谢和饮食紊乱所导致的代谢综合征和癌症治疗方法的发展提供新的途径。

关键词：白藜芦醇乙酰化代谢综合征 sirt

ELECTROACUPUNCTURE IMPROVES INSULIN SENSITIVITY IN HIGH-FAT-DIET-INDUCED INSULIN RESISTANCE RATS VIA ACTIVATION OF sirt1 AND GLUT4 IN QUADRICEPS FEMORIS

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Journal of Integrative Medicine 2014年第3期 231-232页

作者： Fen Xu Feng-xia Liang Rui Chen Hua Wang Ze-bin Chen Hong-yang Wu Hubei University of Chinese Medicine

Insulin resistance(IR) is the common pathologic basis of IRrelated diseases such as obesity, type 2 diabetes mellitus, and *** is proved to be effective in treating IR-related *** intervened IR in early stage and observed the effects of "the Combination of Biao-Ben Acupoints" electroacupuncture(EA) therapy on IR and the expression ofsirt1 and GLUT4 protein in quadriceps femoris of high-fatdiet-induced IR *** models were caused by high-fat diet in forty Wistar *** rats in the normal control group, others were divided randomly into the model control group and EA group(n=8)(needling at ST36, CV4, CV12 and ST40 with low frequency EA of 3 Hz).After EA intervention for six weeks,glucose homeostasis by ip glucose tolerance testing(IPGTT)and insulin tolerance testing(IPITT) was examined *** weight(BW), fasting blood-glucose(FBG) and postprandial blood-glucose(PBG) were measured respectively every two *** EA intervention for eight weeks, the expression of sirt1 in the quadriceps femoris was tested by Western blotting and GLUT4 by immunohistochemical *** with the normal group, the expression of sirt1 and concentration of GLUT4 in the quadriceps femoris decreased significantly in IR *** impaired insulin *** increased and FBG or PPG of IR rats showed no *** with the model control group, after EA intervention sirt1 and GLUT4 increased significantly(Psirt1 and GLUT4 in the quadriceps femoris of IR rats, decrease BW and improve insulin sensitivity, which may be one of the important mechanisms of EA in alleviating insulin resistance.

关键词： GLUT ST sirt ELECTROACUPUNCTURE IMPROVES INSULIN SENSITIVITY IN HIGH-FAT-DIET-INDUCED INSULIN RESISTANCE RATS VIA ACTIVATION OF sirt1 AND GLUT4 IN QUADRICEPS FEMORIS

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sirt家族介导热量限制调控心血管疾病

生命科学 2024年第5期36卷 701-710页

作者：张慧李婷婷张铭宸杜锦超王孝文孙忠广山东第二医科大学潍坊261053

心血管疾病是全球致死率最高的疾病,短期和长期热量限制(caloric restriction,CR)均能够降低心血管疾病的发生率。sirt家族参与细胞内多种代谢,在减轻心脏炎症、氧化应激以及线粒体功能调节上起关键作用。该文就sirt家族在CR改善各类心... 详细信息

心血管疾病是全球致死率最高的疾病,短期和长期热量限制(caloric restriction,CR)均能够降低心血管疾病的发生率。sirt家族参与细胞内多种代谢,在减轻心脏炎症、氧化应激以及线粒体功能调节上起关键作用。该文就sirt家族在CR改善各类心血管疾病中的作用和机制进行综述,并概述了热量限制模拟物通过sirt途径对心血管疾病的改善作用,为心血管疾病的早期防治和康复提供参考。

关键词： sirt 热量限制热量限制模拟物心血管疾病

补阳还五汤通过上调sirt1抑制脑微血管内皮细胞氧糖剥夺再灌注诱导氧化应激损伤

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中药药理与临床 2017年第2期33卷 9-13页

作者：郑华珠王利胜孟英姣广州中医药大学中药学院广州510006

目的:通过建立氧糖剥夺再灌注模型,观察补阳还五汤对氧糖剥夺再灌注诱导脑微血管内皮细胞(r BMECs)氧化应激损伤的作用,并进一步探讨沉默调节蛋白1(sirtuin type 1,sirt1)是否是其发挥作用的靶点。方法:分离培养原代大鼠脑微血管内皮细... 详细信息

目的:通过建立氧糖剥夺再灌注模型,观察补阳还五汤对氧糖剥夺再灌注诱导脑微血管内皮细胞(r BMECs)氧化应激损伤的作用,并进一步探讨沉默调节蛋白1(sirtuin type 1,sirt1)是否是其发挥作用的靶点。方法:分离培养原代大鼠脑微血管内皮细胞,建立体外氧糖剥夺再灌注损伤模型,SD大鼠按15g/kg的剂量每日灌胃给药补阳还五汤1次,连续灌胃1周后分离得到血清,将细胞分为尼莫地平组、对照组、模型组、补阳还五汤含药血清低剂量组(10%),补阳还五汤含药血清高剂量组(20%),应用CCK-8法检测细胞存活率,测定补阳还五汤含药血清对r BMECs活力的影响,检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及活性氧簇(ROS)含量,并采用Western blot、实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)检测sirt1表达水平。结果:与对照组相比,氧糖剥夺再灌注处理组的细胞存活率明显降低,LDH活性及ROS、MDA的含量升高,sirt1蛋白、m RNA表达明显下降;与损伤组相比,10%、20%的补阳还五汤含药血清能明显提高氧糖剥夺再灌注损伤后细胞的存活率,降低LDH、ROS、MDA的含量,提高sirt1蛋白、m RNA的表达;尼莫地平组与补阳还五汤高低剂量组差异无显著。结论:补阳还五汤对脑微血管内皮细胞氧糖剥夺再灌注诱导的氧化应激损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能是通过上调sirt1表达水平实现的。

关键词：补阳还五汤大鼠脑微血管内皮细胞氧糖剥夺再灌注 sirt 1 氧化应激

水牛sirt6基因克隆及其在组织中的表达分析

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中国畜牧兽医 2019年第9期46卷 2526-2534页

作者：崔佳瑜程隽如黄坚强张瑞门石德顺杨素芳邓彦飞广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室

本研究旨在克隆水牛sirt 6基因,构建真核表达载体,并对该基因进行生物信息学及组织表达谱分析。以牛sirt 6基因编码区为种子序列(GenBank登录号:NM_001098084.1),应用Oligo 7.0软件设计引物序列,用RT-PCR方法扩增水牛sirt 6基因完整编... 详细信息

本研究旨在克隆水牛sirt 6基因,构建真核表达载体,并对该基因进行生物信息学及组织表达谱分析。以牛sirt 6基因编码区为种子序列(GenBank登录号:NM_001098084.1),应用Oligo 7.0软件设计引物序列,用RT-PCR方法扩增水牛sirt 6基因完整编码区序列,测序鉴定后进行生物信息学分析,构建逆转录病毒载体pMXs-sirt6-IRES-GFP,并在HEK-293T细胞和水牛胎儿成纤维细胞上进行重组载体表达鉴定;采集水牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠、脑、皮肤、生殖嵴分别提取RNA,反转录后以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR,检测sirt 6基因在各组织中的表达差异。结果表明,水牛sirt 6基因编码区全长1 080 bp,编码359个氨基酸,其中亮氨酸及脯氨酸含量最高(10.3%),酪氨酸含量最低(1.1%)。水牛sirt 6基因核苷酸序列与牛、人和小鼠的同源性分别为98.4%、86.7%和78.5%,物种间同源性较低。系统进化树结果表明,水牛与牛聚为一支,再与人、小鼠聚为一大支,亲缘关系相对较近,与果蝇亲缘关系较远。sirt6蛋白理论分子质量为39.47 ku,分子式为C 1737 H 2783 N 509 O 516 S 13,等电点为8.48,不存在跨膜区,为膜内蛋白;含有sirtuin家族特有的Sir2去乙酰化酶的催化结构。二级结构预测结果显示,水牛sirt6蛋白包含13个α-螺旋、27个β-折叠、24个T-转角和20个无规则卷曲。逆转录病毒载体介导的sirt 6基因能在HEK-293T细胞和水牛胎儿成纤维细胞中表达。实时荧光定量PCR结果显示,sirt 6基因在水牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠、脑、皮肤、生殖嵴中均有表达,其中在生殖嵴中表达量最高,在皮肤中的表达量次之,而在肝脏中表达量最低。本试验结果将为水牛sirt 6基因的功能研究提供参考。

关键词：水牛 sirt 6基因克隆载体构建表达谱