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安徽医科大学学报 2023年第11期58卷 1921-1927页

作者：刘嘉戴媛娟汪思应安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室合肥230032

目的构建shp2 E76K突变的小鼠模型,利用其间充质干细胞(MSC)研究激活突变引发的shp2蛋白相分离对其细胞增殖能力的影响及其机制。方法将Ptpn11 E76K-neo/+的C57BL/6J小鼠与Mx1-cre工具鼠杂交,得到所需要的Mx1-cre;Ptpn11^(+/+)和Mx1-cre... 详细信息

目的构建shp2 E76K突变的小鼠模型,利用其间充质干细胞(MSC)研究激活突变引发的shp2蛋白相分离对其细胞增殖能力的影响及其机制。方法将Ptpn11 E76K-neo/+的C57BL/6J小鼠与Mx1-cre工具鼠杂交,得到所需要的Mx1-cre;Ptpn11^(+/+)和Mx1-cre;Ptpn11^(E76K/+)小鼠,并对后者注射pI-pC以诱导Cre酶的表达,使Ptpn11在骨髓MSC中突变。从Mx1-cre;Ptpn11^(+/+)和Mx1-cre;Ptpn11^(E76K/+)小鼠体内分离培养MSC,通过细胞免疫荧光染色确定所分离的细胞为MSC。以Ptpn11^(+/+)的MSC为对照组,Ptpn11^(E76K/+)的MSC为实验组,通过加药将两种细胞分成6组:Ptpn11^(+/+)组;Ptpn11^(+/+)+shp099组;Ptpn11^(+/+)+ET070组;Ptpn11^(E76K/+)组;Ptpn11^(E76K/+)+shp099组;Ptpn11^(E76K/+)+ET070组。免疫荧光染色法观察6组细胞内shp2蛋白相分离的差异,Western blot法检测6组MSC中shp2蛋白表达水平的差异。CCK-8检测相分离被影响之后细胞增殖能力的改变。提取实验组与对照组细胞总蛋白通过Western blot法检测ERK/p-ERK、AMPK/p-AMPK、mTOR/p-mTOR等蛋白的表达水平。结果小鼠基因型鉴定证实得到Mx1-cre;Ptpn11^(E76K/+)和Mx1-cre;Ptpn11^(+/+)小鼠并分离出原代Ptpn11^(+/+)和Ptpn11^(E76K/+)骨髓MSC。与Ptpn11^(+/+)组相比,Ptpn11^(E76K/+)组的shp2蛋白产生更多的相分离冷凝物;与Ptpn11^(E76K/+)组相比,Ptpn11^(E76K/+)+shp099组和Ptpn11^(E76K/+)+ET070组shp2蛋白凝聚成的冷凝物在均明显减少;Western blot检测各组shp2蛋白表达水平差异无统计学意义;与Ptpn11^(+/+)组相比,Ptpn11^(+/+)+shp099组和Ptpn11^(+/+)+ET070组MSC的增殖能力下降,细胞内p-ERK和p-mTOR蛋白表达减少,p-AMPK蛋白表达增加;与Ptpn11^(E76K/+)组相比,Ptpn11^(E76K/+)+shp099组和Ptpn11^(E76K/+)+ET070组MSC的增殖能力下降,细胞内p-ERK和p-mTOR蛋白表达减少,p-AMPK蛋白表达增加。结论shp2的相分离通过刺激AMPK-mTOR信号通路的表达参与了shp2 E76K激活突变的MSC的增殖能力改变。

关键词：间充质干细胞相分离 shp2蛋白激活突变增殖

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shp2蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

Shp2蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

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作者：王磊苏州大学

学位级别：硕士

目的和意义:研究乳腺癌标本中shp2(一种含有SH2结构域的酪氨酸蛋白磷酸酶)的表达,及其与乳腺癌雌激素水平(E2),泌乳素(PRL),HER2(人类表皮生长因子受体-2)的表达情况及淋巴结转移状态之间的关系,揭示shp2蛋白作为一种新型肿瘤标记物可... 详细信息

目的和意义:研究乳腺癌标本中shp2(一种含有SH2结构域的酪氨酸蛋白磷酸酶)的表达,及其与乳腺癌雌激素水平(E2),泌乳素(PRL),HER2(人类表皮生长因子受体-2)的表达情况及淋巴结转移状态之间的关系,揭示shp2蛋白作为一种新型肿瘤标记物可用于乳腺癌的诊断以及转移风险评估的可行性研究以及作为抗肿瘤新型药物筛选靶点的研究。方法:本研究采用Western印迹法检测shp2在乳腺癌组织中的表达,采用放射免疫分析法(RIA法)检测血清E2的表达,采用一步酶免法检测血清中PRL的表达,采用Elivision plus免疫组化染色方法测定乳腺癌标本中HER2的表达,分析shp2在乳腺癌组织中的表达程度及其与E2、PRL、HER2、淋巴结转移之间的关系及与相关临床资料进行分析,实验结果用spss16.0统计软件进行分析。结果:shp2蛋白在乳腺癌组织中有高表达,有淋巴结转移的患者的乳腺癌组织中shp2表达明显高于无淋巴结转移的患者,同时雌激素与shp2的表达之间有相关性,随着血清中雌激素表达的升高,乳腺癌组织中shp2的表达也不断升高,但乳腺癌组织中shp2与HER2的表达呈负相关。结论:shp2蛋白在乳腺癌组织中呈现高表达,与血清中E2的表达呈正相关关系,与血清中PRL的表达无相关关系,与乳腺癌组织中HER2的表达呈负相关关系,由此shp2蛋白在乳腺癌中的表达可作为新型肿瘤标记物用于乳腺癌诊断以及转移风险评估的指标之一。

关键词：乳腺癌 shp2蛋白

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shp2蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

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吉林医学 2011年第36期32卷 7692-7694页

作者：王磊秦锡虎王旭芬朱峰江苏省常州市第一人民医院江苏常州213003 江苏省常州市中医医院江苏常州213003

目的:研究乳腺癌标本中shp2(一种含有SH2结构域的酪氨酸蛋白磷酸酶)的表达,及其与乳腺癌雌激素水平(E2),泌乳素(PRL)的表达情况及淋巴结转移状态之间的关系。方法:采用Western印迹法检测shp2在乳腺癌组织中的表达,采用放射免疫分析法(RI... 详细信息

目的:研究乳腺癌标本中shp2(一种含有SH2结构域的酪氨酸蛋白磷酸酶)的表达,及其与乳腺癌雌激素水平(E2),泌乳素(PRL)的表达情况及淋巴结转移状态之间的关系。方法:采用Western印迹法检测shp2在乳腺癌组织中的表达,采用放射免疫分析法(RIA法)检测血清E2的表达,采用一步酶免法检测血清中PRL的表达,分析shp2在乳腺癌组织中的表达程度及其与E2、PRL、淋巴结转移之间的关系及与相关临床资料进行分析。结果:shp2蛋白在乳腺癌组织中有高表达,有淋巴结转移的患者的乳腺癌组织中shp2表达明显高于无淋巴结转移的患者,同时E2与shp2的表达之间有相关性,随着血清中雌激素表达的升高,乳腺癌组织中shp2的表达也不断升高。结论:shp2蛋白在乳腺癌组织中呈现高表达,与血清中E2的表达呈正相关关系,与血清中PRL的表达无相关关系,shp2蛋白在乳腺癌中的表达可作为新型肿瘤标记物用于乳腺癌诊断以及转移风险评估的指标之一。

关键词：乳腺癌 shp2蛋白

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蛋白酪氨酸磷酸酶shp2与接头蛋白Gab2在子宫内膜癌中的表达及意义

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海南医学 2016年第1期27卷 10-13页

作者：李美艳卢静韩新彦王菊荣邯郸市中心医院妇一科河北邯郸056008 邯郸市中心医院生殖医学科河北邯郸056008

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶shp2与接头蛋白Gab2在子宫内膜癌中的表达、两者的相关性及其与预后的关系。方法采用免疫组化SP法,检测50例子宫内膜癌(癌组)、50例子宫内膜不典型增生(癌前病变组)及30例正常增殖期子宫内膜(正常组)中shp2蛋白... 详细信息

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶shp2与接头蛋白Gab2在子宫内膜癌中的表达、两者的相关性及其与预后的关系。方法采用免疫组化SP法,检测50例子宫内膜癌(癌组)、50例子宫内膜不典型增生(癌前病变组)及30例正常增殖期子宫内膜(正常组)中shp2蛋白和Gab2蛋白的表达水平,分析其表达与子宫内膜癌临床病理参数的关系,及二者的相关性。结果正常组、癌前病变组和癌组的子宫内膜组织中,shp2蛋白的阳性表达率分别为0、12.00%、64.00%,Gab2蛋白的阳性表达率分别为3.33%、38.00%、58.00%,且组间比较均有统计学意义(Pshp2蛋白及Gab2蛋白的阳性表达率在肌层浸润深度及有无淋巴结转移组中比较,差异均有统计学意义(Pshp2蛋白阳性表达者的总生存率明显下降,Gab2蛋白阳性表达者总生存率也明显下降;子宫内膜癌中shp2蛋白的表达与Gab2蛋白的表达呈正相关(r=0.368,Pshp2蛋白及Gab2蛋白的表达可能参与了子宫内膜癌的发生、发展、浸润等过程,有可能作为判断子宫内膜癌预后的新指标。

关键词：子宫内膜癌 shp2蛋白 Gab2蛋白免疫组织化学

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PTPN11基因多态性与胃癌患者预后的研究

PTPN11基因多态性与胃癌患者预后的研究

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作者：尤丽丽吉林大学

学位级别：硕士

胃癌是人类常见的恶性肿瘤,2012年全球约有95.2万新发胃癌病例,72.3万胃癌死亡病例,分别占恶性肿瘤发病率的第五位和死因第三位。尽管在发达国家的胃癌发病率和死亡率均呈现下降趋势,但在我国仍然居高不下。2012年我国胃癌新发病例数为4... 详细信息

胃癌是人类常见的恶性肿瘤,2012年全球约有95.2万新发胃癌病例,72.3万胃癌死亡病例,分别占恶性肿瘤发病率的第五位和死因第三位。尽管在发达国家的胃癌发病率和死亡率均呈现下降趋势,但在我国仍然居高不下。2012年我国胃癌新发病例数为42.4万,死亡病例数为29.8万,均占全球的40%以上。目前随着胃癌诊断技术的提高和术后放化疗方案的进展,胃癌患者术后生存率有所提高,但术后5年生存率仅为27.4%。研究发现即使处于相同的病理分期并接受相同的手术及术后治疗的胃癌患者,其术后生存时间也存在差异,提示胃癌患者的预后可能与个体的遗传背景有关。原癌基因蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型11(PTPN11)编码蛋白酪氨酸磷酸酶2(shp2),在多种肿瘤组织中高表达,与多种肿瘤的发生、发展和预后密切相关。目前已有研究表明PTPN11基因多态性(SNPs)与多种肿瘤的发生有关,对于肿瘤预后的评估关注较少。本研究在中国胃癌高发地区的东北地区开展PTPN11基因变异与胃癌预后的研究,揭示PTPN11基因多态性作为肿瘤标志物用于评估胃癌患者术后长期生存的可能性。目的:本研究选择中国东北地区接受胃癌切除术的患者作为研究对象,探讨中国北方汉族人群PTPN11基因单核苷酸多态性与胃癌患者术后长期生存的关系,以及PTPN11基因多态性对shp2蛋白表达的影响,为胃癌患者实施个性化精准化治疗提科学的理论依据。方法:本研究选取2008年6月至2010年11月就诊于吉林大学第一医院,接受胃肿瘤切除术并经病理学确诊为胃癌的388例患者为研究对象。应用Taq Man基因分型技术检测PTPN11上5个SNPs位点(rs2301756、rs12423190、rs12229892、rs4767860和rs7958372)的基因型分布,应用免疫组织化学技术检测93例胃癌组织中的shp2蛋白表达水平。Kaplan-Meier法绘制生存曲线,log-rank检验比较不同基因型患者间术后生存时间的差异,应用单因素和多因素Cox回归模型计算风险比(HR)及95%可信区间(95%CI)。结果:(1)本研究最终纳入363例胃癌患者进行生存分析,中位随访时间为60.7个月;单因素Cox回归分析结果显示,与PTPN11基因rs2301756 CC基因型比较,携带CT基因型的胃癌患者术后生存时间更短,死亡风险更高(HR=1.78,95%CI:1.26-2.52,P=0.001),尚未发现其余4个位点的基因多态性与胃癌患者预后存在关联。肿瘤直径≥5cm(Pshp2蛋白表达的水平均无统计学差异(P>0.05)。结论:PTPN11 rs2301756基因多态性可能作为胃癌患者术后长期生存预测的生物标记物,但仍需在大样本人群中进行长期随访来验证。

关键词：胃癌单核苷酸多态性预后 PTPN11 shp2蛋白

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