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sept9基因甲基化在结直肠癌诊断中的研究进展

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胃肠病学 2017年第6期22卷 381-384页

作者：温蕾冯义朝杜夏延安大学附属医院消化内科 716000

结直肠癌(CRC)是最常见的消化道恶性肿瘤之一,其预后差,病死率高。sept9基因是一种抑癌基因,在细胞分裂末期起重要作用,目前研究已发现sept9基因甲基化检测可用于CRC的早期诊断。本文就sept9基因甲基化在CRC筛查和诊断中的研究进展作一... 详细信息

结直肠癌(CRC)是最常见的消化道恶性肿瘤之一,其预后差,病死率高。sept9基因是一种抑癌基因,在细胞分裂末期起重要作用,目前研究已发现sept9基因甲基化检测可用于CRC的早期诊断。本文就sept9基因甲基化在CRC筛查和诊断中的研究进展作一综述。

关键词：结直肠肿瘤 sept9基因甲基化诊断

sept9基因过表达对人肝癌HepG2细胞增殖及侵袭转移的影响

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SEPT9基因过表达对人肝癌HepG2细胞增殖及侵袭转移的影响

作者：李洁泸州医学院

学位级别：硕士

目的：构建sept9基因真核表达载体转染惰性转移潜能人肝癌细胞株HepG2，研究sept9基因过表达对HepG2细胞增殖、迁移以及侵袭转移的影响，探讨sept9在肝癌发生发展中的作用，为sept9成为肝癌侵袭转移新的生物学指标及基因治疗靶点提供更... 详细信息

目的：构建sept9基因真核表达载体转染惰性转移潜能人肝癌细胞株HepG2，研究sept9基因过表达对HepG2细胞增殖、迁移以及侵袭转移的影响，探讨sept9在肝癌发生发展中的作用，为sept9成为肝癌侵袭转移新的生物学指标及基因治疗靶点提供更充分的依据。方法：常规培养人肝癌HepG2细胞，待细胞生长状态良好并达到指数生长期时接种于6孔板，接种后24h内将sept9基因真核表达载体pIRES2/EGFP-sept9转染HepG2细胞。设过表达组（转染重组质粒pIRES2/EGFP-sept9）、空质粒组（转染空质粒pIRES2/EGFP）和空白组（不加任何特殊试剂正常培养）。各孔HepG2细胞中加入脂质体LipofectamineTM200010μl+DNA4μg混合物进行转染。①转染后48h，荧光显微镜下观察带有EGFP的细胞所占比例，判断转染效率。②转染后72h，细胞裂解法提取各组细胞总蛋白，BCA法测定蛋白浓度，SDS-PAGE电泳，半干法转膜，脱脂奶粉封闭，一抗、二抗杂交孵育，化学发光液显影，紫外凝胶成像分析系统自动曝光，凝胶成像仪扫描Image J2X软件分析，检测各组细胞中sept9蛋白相对于内参蛋白GAPDH的表达量。③以转染后0h、24h、48h、72h为时间点，CCK-8法检测sept9基因过表达对细胞生长增殖的影响。④转染后0h、24h、48h、72h细胞划痕实验检测各组HepG2细胞迁移运动能力变化。⑤转染后48h Transwell实验检测各组HepG2细胞侵袭性及转移性。结果：①转染后48h，绿色荧光细胞所占比率判断出转染效率约达70%。②western blot法分析显示：过表达组sept9蛋白条带亮度明显强于两对照组。定量分析显示，空白组、空质粒组、过表达组sept9蛋白的相对表达量分别为0.7078±0.018、0.7136±0.012、1.0526±0.020。经SNK-q检验方差分析，过表达组sept9蛋白相对表达量分别与两对照组相比，约上升了48%左右，差异有统计学意义（Psept9基因真核表达载体pIRES2/EGFP-sept9可使惰性转移潜能肝癌细胞株HepG2中sept9蛋白表达量增加。②过表达sept9基因能显著促进HepG2细胞增殖。③过表达sept9基因能增强HepG2细胞迁移、侵袭转移能力。

关键词： sept9基因过表达 HepG2细胞增殖侵袭转移

sept9基因在人浸润性乳腺癌组织与正常乳腺组织中的表达差异及临床意义

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SEPT9基因在人浸润性乳腺癌组织与正常乳腺组织中的表达差异及临...

作者：迪丽扎娃尔·海来提新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨在人浸润性乳腺癌组织与正常乳腺组织中sept9基因相对表达量的差异及其与患者一些临床病理参数之间的关系。方法:采用Real-time PCR法检测目标组织中sept9基因的表达水平(测定组织中目标m RNA相对表达量来反应sept9基因的表达... 详细信息

目的:探讨在人浸润性乳腺癌组织与正常乳腺组织中sept9基因相对表达量的差异及其与患者一些临床病理参数之间的关系。方法:采用Real-time PCR法检测目标组织中sept9基因的表达水平(测定组织中目标m RNA相对表达量来反应sept9基因的表达程度)。采用SPSS21.0和Medcalc19.4.1进行统计分析,比较乳腺癌组织与正常乳腺组织中sept9基因的表达程度差异并检验分析sept9基因的表达与患者一般临床资料(如临床分期)和临床病理特征(如肿瘤的大小、组织学分级等情况)之间的关系,分别从不同因素分析sept9基因的表达与乳腺癌的关系。结果:乳腺癌组织及正常乳腺组织中sept9基因的表达量结果提示:sept9基因的表达量在乳腺癌组织中较正常乳腺组织高,差异有统计学意义(Psept9基因的表达与临床病理特征进行分析结果提示:浸润性乳腺癌组织中sept9基因的表达与患者年龄、组织学分级、绝经状态、TNM分期、淋巴结转移状态、肿瘤大小及Ki-67的表达量等均无明显相关性,均无统计学意义(P>0.05);CK5/6及p53的阳性、阴性表达的sept9基因表达量大小差异均无统计学意义(P>0.05);sept9基因的表达量高低与Ki-67的表达水平可能无关(P>0.05)。结论:1、sept9基因在人乳腺癌组织中的表达程度高于正常乳腺组织,提示sept9基因与肿瘤的发生发展有一定的相关性。2、Ki-67、CK5/6、p53等肿瘤浸润性指标的表达程度均与乳腺癌组织中sept9基因的表达量无明显相关性。3、乳腺癌组织中sept9基因的表达程度与患者年龄、肿瘤大小、TNM分期、绝经状态、淋巴结转移状态、组织学分级等均无明显相关性。

关键词：乳腺癌 sept9基因基因表达

血浆甲基化sept9基因检测在结直肠癌诊断中的临床意义

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中华消化杂志 2014年第11期34卷 726-731页

作者：贺娜褚文慧李永奇杨丽平谢华红王飙落聂勇战王新郭学刚吴开春第四军医大学西京消化病医院消化科西安710032

目的探讨检测血浆甲基化sept9基因（msept9）在结直肠癌患者诊断中的临床意义.方法将试验对象分为3组,即结直肠癌组79例、结直肠息肉组73例和健康对照组146名.应用PCR荧光探针法检测外周血浆中msept9,分析该基因阳性率与结直肠临床病... 详细信息

目的探讨检测血浆甲基化sept9基因（msept9）在结直肠癌患者诊断中的临床意义.方法将试验对象分为3组,即结直肠癌组79例、结直肠息肉组73例和健康对照组146名.应用PCR荧光探针法检测外周血浆中msept9,分析该基因阳性率与结直肠临床病理特征的关系,并与CEA和（或）CA19-9阳性率作比较.统计学分析采用卡方检验或连续性校正的卡方检验.结果结直肠癌组血浆m SEP T9阳性率为71.05％（54/76）,结直肠息肉组为5.80％（4/69）,健康对照组为3.68％（5/136）,结直肠癌组msept9阳性率明显高于其他两组（x2=141.700,P＜0.01）.血浆msept9在结直肠癌患者中的敏感度为71.05％,特异度为95.61％.在结直肠肿瘤最大径＞5.0 cm、病灶侵及浆膜层或周围组织、组织病理分型为腺癌、临床分期为Ⅳ期的患者中,血浆msept9阳性率较高,分别为88.46％（23/26）、78.57％（44/56）、74.63％（50/67）和8/10,差异均有统计学意义（x2=6.635、8.661、3.333、10.969,P均＜0.05）.与血清其他肿瘤标志物相比,结直肠癌患者血浆msept9阳性率明显高于CEA、CA19-9及联合检测CEA、CA19-9的阳性率,分别为71.05％（54/76）、34.21％（26/76）、18.42％（14/76）、40.79％（31/76）,两两比较差异均有统计学意义（x2=20.689、42.577、14.119,P均＜0.01）.结论结直肠癌患者血清mSEP T9阳性率明显增高,检测该基因在结直肠癌的诊断中具有重要的临床意义.

关键词：结直肠肿瘤 sept9基因甲基化

血浆甲基化sept9基因在原发性肝癌患者中的表达及其临床意义

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中华肝脏病杂志 2023年第3期31卷 265-270页

作者：贺娜冯巩张粉娜郝帅李嵘赵梓琪田亚文闫红林西安医学院第一附属医院消化内科西安710006 西安医学院全科医学研究所西安710077 西安医学院西安710077

目的研究血浆甲基化sept9基因(msept9)在原发性肝癌患者中的表达及临床意义。方法选取2016年5月至2018年10月在西安就诊393例患者资料,其中原发性肝癌组75例、肝硬化组50例、健康对照组268例。应用聚合酶链式反应荧光探针法检测3组外周... 详细信息

目的研究血浆甲基化sept9基因(msept9)在原发性肝癌患者中的表达及临床意义。方法选取2016年5月至2018年10月在西安就诊393例患者资料,其中原发性肝癌组75例、肝硬化组50例、健康对照组268例。应用聚合酶链式反应荧光探针法检测3组外周血浆msept9表达阳性率,并分析其与肝癌临床特征的相关性,同时与电化学发光法检测的甲胎蛋白阳性率进行比较。采用χ^(2)检验或连续性校正的χ^(2)检验进行统计学分析。结果实际有效样本数为367例。肝癌组64例,肝硬化组42例,健康对照组261例,其中获得肝癌病理组织者34例。血浆msept9阳性率在肝癌组明显高于肝硬化与健康对照组[分别为76.6%(49/64)、35.7%(15/42)、3.8%(10/261)],差异均有统计学意义(χ^(2)=176.017,Psept9检测灵敏度(76.6%)明显优于甲胎蛋白(54.7%),差异具有统计学意义(χ^(2)=6.788,Psept9联合甲胎蛋白检测较其单一检测灵敏度及特异度均明显提高(分别为89.7%、特异度96.3%)。肝癌患者年龄≥50岁、临床分期Ⅱ期以上及病理示中低分化者血浆msept9阳性表达较高,差异均有统计学意义(χ^(2)=6.41、9.279、6.332,P值均sept9表达阳性的肝癌患者生存时间明显短于阴性者[分别为(310±26)、(487±59),差异具有统计学意义(Log Rank,P=0.039)]。结论血浆msept9检测在我国肝癌患者中的阳性率高于甲胎蛋白,且与年龄及临床分期、组织分化程度相关,并有一定生存预测价值,故检测该基因在原发性肝癌患者无创诊断及预后评估中具有重要的临床意义,有潜在的临床应用价值。

关键词： sept9基因甲基化原发性肝癌诊断临床意义

血浆sept9基因甲基化联合血清癌胚抗原、糖类抗原724对结直肠癌的诊断价值

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肿瘤研究与临床 2022年第5期34卷 370-374页

作者：高海锋薛挺穆建强陕西省宝鸡市中心医院检验科宝鸡721008 陕西省宝鸡市中心医院消化内科宝鸡721008 云南省新昆华医院检验科昆明655600

目的探讨血浆sept9基因甲基化联合血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原724(CA724)检测在结直肠癌诊断中的临床应用价值。方法选取2018年5月至2021年10月陕西省宝鸡市中心医院和云南省新昆华医院收治的219例结直肠病变患者,包括病理诊断结直肠癌... 详细信息

目的探讨血浆sept9基因甲基化联合血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原724(CA724)检测在结直肠癌诊断中的临床应用价值。方法选取2018年5月至2021年10月陕西省宝鸡市中心医院和云南省新昆华医院收治的219例结直肠病变患者,包括病理诊断结直肠癌149例、结直肠息肉70例,选择同期体检健康者100名作为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定血浆sept9基因甲基化状态,电化学发光法测定血清CEA和CA724的水平。比较各组3项指标表达情况,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析3项指标单独及联合诊断结直肠癌的效果。结果结直肠癌组sept9基因甲基化阳性率(74.50%,111/149)高于结直肠息肉组(22.86%,16/70)和健康对照组(1.00%,1/100),差异有统计学意义(P98%,70/149)高于结直肠息肉组(40.00%,28/70)和健康对照组(3.00%,3/100),差异有统计学意义(P93%,58/149)高于结直肠息肉组(32.86%,23/70)和健康对照组(2.00%,2/100),差异有统计学意义(Psept9基因甲基化、CEA和CA724单独诊断结直肠癌的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.823(95%CI 0.753~0.891)、0.788(95%CI 0.725~0.852)、0.689(95%CI 0.624~0.754)。sept9基因甲基化诊断结直肠癌的最佳临界Ct值为36.5,灵敏度为90.30%,阳性预测值为84.68%,均高于CEA和CA724;CEA诊断结直肠癌的最佳临界值为8.80 ng/ml,特异度(77.50%)和阴性预测值(78.48%)均高于sept9基因甲基化和CA724;3项指标联合检测的临界值取3项指标单项最佳临界值时的灵敏度(97.66%)、阳性预测值(93.98%)、阴性预测值(81.25%)、AUC(0.846,95%CI 0.749~0.944)均较单项指标高。结论血浆sept9基因甲基化、血清CEA和CA724联合检测诊断结直肠癌,灵敏度和准确度高,三者可以优势互补,提高诊断效率,对于结直肠癌的诊断具有较高的临床价值。

关键词：结直肠肿瘤癌胚抗原抗原,肿瘤相关,碳水化合物 DNA甲基化糖类抗原724 sept9基因

外周血sept9基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用进展

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胃肠病学 2017年第10期22卷 619-622页

作者：冷霞陈卫昌苏州大学附属第一医院消化内科 215006

结直肠癌(CRC)的早期诊断具有重要临床意义。外周血sept9基因甲基化在大量研究中被证实是CRC的特异性生物学标记物,敏感性和特异性均较高,较之目前常用的粪便隐血试验、血清肿瘤标记物和结肠镜筛查具有一定优势,但在筛查腺瘤、息肉等癌... 详细信息

结直肠癌(CRC)的早期诊断具有重要临床意义。外周血sept9基因甲基化在大量研究中被证实是CRC的特异性生物学标记物,敏感性和特异性均较高,较之目前常用的粪便隐血试验、血清肿瘤标记物和结肠镜筛查具有一定优势,但在筛查腺瘤、息肉等癌前病变中的应用价值有限,用于评估CRC术后复发和放化疗效果的潜力则尚需进一步临床验证。本文就外周血sept9基因甲基化检测在CRC筛查中的应用进展作一综述。

关键词：结直肠肿瘤筛查早期诊断 DNA甲基化 sept9基因

BMSCs诱导分化为胆碱能神经元过程中干扰Hes1表达对Stmn1和sept9基因的影响

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神经解剖学杂志 2013年第1期29卷 45-50页

作者：李鹏飞王春芳柳勇崔素梅邓春圣龙志晶刘彩玉山西医科大学科研实验中心太原030001 山西医科大学实验动物中心太原030001 中国人民解放军第322医院大同037006 山西康宝生物制品股份有限公司长治046000

目的:通过检测体外培养的骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)定向诱导分化为胆碱能神经元过程中干扰Hes1基因对Stmn1和sept9基因的表达变化情况,探讨骨髓基质细胞定向分化为胆碱能神经元的机制。方法:采用全骨髓培养法体外... 详细信息

目的:通过检测体外培养的骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)定向诱导分化为胆碱能神经元过程中干扰Hes1基因对Stmn1和sept9基因的表达变化情况,探讨骨髓基质细胞定向分化为胆碱能神经元的机制。方法:采用全骨髓培养法体外分离培养获得BMSCs,将第三代培养的BMSCs进行诱导分化,实时定量PCR技术分析干扰Hes1基因后,在骨髓基质细胞诱导分化为胆碱能神经元过程中Stmn1和sept9基因的表达变化情况。结果:BMSCs诱导分化为胆碱能神经元后,经免疫荧光检测有乙酰胆碱转移酶阳性细胞表达;Hes1基因表达在诱导组和干扰后诱导组中均较对照组高(P基因表达水平在干扰后诱导组、干扰组、诱导组均较对照组高(Psept9基因在干扰后诱导组和干扰组中表达水平均较对照组高(P基因可调控sept9,Stmn1的表达,Hes1基因的表达变化导致与分化和增殖相关基因的表达改变。

关键词：骨髓基质细胞胆碱能神经元 RNA干扰 Hes1基因 Stmn1基因 sept9基因

沉默sept9基因对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

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肿瘤防治研究 2013年第3期40卷 236-239页

作者：曾永秋曹洋梅志强刘岚税青林泸州医学院医学细胞生物学与遗传学教研室四川泸州646000 泸州医学院生理学教研室四川泸州646000 泸州医学院医学实验中心四川泸州646000

目的探讨sept9基因与肝癌的关系,进一步揭示sept9基因在肝癌发生发展过程中的作用。方法将构建的针对sept9基因的shRNA表达载体通过脂质体LipofectamineTM2000转染人肝癌HepG2细胞,荧光显微镜下观察细胞的转染效率,RT-PCR、Western blo... 详细信息

目的探讨sept9基因与肝癌的关系,进一步揭示sept9基因在肝癌发生发展过程中的作用。方法将构建的针对sept9基因的shRNA表达载体通过脂质体LipofectamineTM2000转染人肝癌HepG2细胞,荧光显微镜下观察细胞的转染效率,RT-PCR、Western blot法分别检测sept9 mRNA和蛋白质的表达抑制情况,CCK-8检测细胞的生长抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果荧光显微镜观察细胞的转染效率达到70%以上;sept9 mRNA及蛋白表达抑制率均受到明显抑制。CCK-8法检测结果显示,实验组HepG2细胞的生长受到明显抑制;流式细胞术检测结果显示实验组HepG2细胞凋亡明显(Psept9基因的表达可有效抑制HepG2细胞的增殖,并对细胞凋亡有明显的促进作用。

关键词： sept9基因 RNAi HepG2细胞细胞增殖细胞凋亡